三氟乙酸(TFA)在有機合成中是多功能的。他們最有用的特性包括揮發性,在有機溶液中的溶解度和高酸度。然而,例如,由于其“爬行”特性,去除TFA殘留物可能是危險的。 圖1:由于其多功能性,三氟乙酸(TFA)廣泛用于有機合成 用TFA作為溶劑或酸催化劑進行許多化學轉化,包括重排,官能團脫保護,還原,縮合,氫化芳基化,三氟甲基化和溶劑分解反應。但是,使TFA成為一種有用的工具的一些功能在去除不需要的殘留物時會成為問題。由于該有機酸的其他試劑去除方法受損,大部分TFA被蒸發。本文涵蓋了一些常見的TFA反應和使用蒸發器去除TFA殘留物時必須采取的預防措施。用TFA去除保護基團 圖2:用TFA去除保護基團 TFA可用于在含水或無水條件下通過溶劑分解來溶解氮和氧的保護基團。圖2顯示了用TFA裂解O-和N-保護基團的一些方法: N-叔丁氧基羰基(N-Boc)基團的去保護:這種類型的N-Boc去保護已用于合成瓢蟲屬......閱讀全文
實驗方法原理 實驗材料 蛋白質樣品(約 200 mol)試劑、試劑盒 1%乙酸溶液(含麗春紅 S 染料)1% 乙酸0.2 mol/L NaOH0.1 mol/L 乙酸溶液(含PVP-40) 消化緩沖液 1 mg/ml 胰蛋白酶層析溶液 A 層析溶液 B儀器、耗材 0.22 μm 硝酸纖維素膜酸洗過的
基本方案 實驗方法原理 實驗材料
實驗材料蛋白質樣品(約 200 mol) 試劑、試劑盒1%乙酸溶液(含麗春紅 S 染料)1% 乙酸0.2 mol/L NaOH0.1 mol/L 乙酸溶液(含PVP-40)消化緩沖液1 mg/ml 胰蛋白酶層析溶液 A層析溶液 B儀器、耗材0.22 μm 硝酸纖維素膜酸洗過的玻璃/Petri 培養皿
引言反相HPLC已成為分離和分析蛋白質和多肽的重要工具。它在生物技術行業中被廣泛應用于蛋白質類治療產品的表征,以及這些產品和雜質的鑒定。在通過質譜鑒定蛋白質之前,反相HPLC在從消化后的蛋白質組中分離多肽方面有著至關重要的作用。它也被用于探索性研究中多種蛋白質和多肽的純化,以及蛋白類治療藥物的大規模
3. 糖基釋放后的蛋白質分析1 ) 糖基釋放的化學處理方法還原性氨化反可應選擇性的解離糖蛋白上的 O-糖苷(見注釋 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,將其遷移情況與其糖基化形式的蛋白進行比較,電泳遷移率的增加是 O-連糖苷出現在蛋白上的證據(見注釋 11)。( 1 ) 將 1
實驗材料鏈霉親和素-過氧化物酶 &
3.3 我的糖基化蛋白在哪實驗人員可通過這個方法獲得關于糖苷在蛋白骨架上的分布及糖苷本身的結構信息。這類實驗可在純化的糖蛋白或者從 1D 或 2D 電泳膠上分離出來的蛋白上進行,首先,用蛋白內切酶消化蛋白質,通過高效液相色譜(HPLC) 分離消化后的肽和糖肽混合物。對含有糖苷的收集組分進行糖
液相色譜耦聯Q Exactive 臺式軌道阱質譜儀分析利妥昔單克隆抗體關鍵詞單克隆抗體,完整蛋白質的質量測定,序列確定,蛋白質去卷積,自上而下的測序 目的優化液相色譜質譜工作流程,采用整體柱在線耦聯Thermo Scientific Q Exactive 臺式軌道阱質譜儀對單克隆抗體進行分
胰蛋白酶水解分析。蛋白質水解產生的肽段利用反相高效液相色譜分析,流動相采用含TFA體系(參見第15-17頁),以起始濃度約5%的乙腈梯度洗脫(乙腈起始濃度低于5%可能導致較早洗脫出肽的色譜的不可重現性),乙腈濃度逐漸升至70%(參見圖31)。梯度洗脫的時間取決于待水解蛋白的大小。大分子蛋白比小分子蛋
1. 前言與其他真核細胞一樣,植物細胞中,糖基化通常發生在分泌蛋白質上,雖然在細胞質蛋白和核蛋白上也發現一些糖基化反應。根據寡糖部分和蛋白質骨架之間的連接方式,可將糖基化分為兩種類型:N -糖基化和 O-糖基化。植物中 N-糖基化研究最多。1.1 N-糖基化與其他真核細胞一樣,在植物細胞
實驗材料 培養基中生長的適宜細胞株 試劑、試劑盒 乙腈
實驗目標針對血清、血漿、體液、組織、真菌、細菌、細胞培養物以及植物等樣本的差異蛋白質組研究,以蛋白質芯片為載體,通過對目標疾病樣本組及對照組之間進行鑒定,以期找到能夠區分不同組別的差異峰,并通過對差異峰進行蛋白質鑒定找到與目標疾病密切關聯的基因/蛋白。 實施方案 &n
1. 多肽含量與多肽純度有什么區別? 一條多肽產品中除了多肽本身還包括生產過程中帶入的水份及有機鹽分等雜質,多肽純度僅指多肽本身所含肽產品的含量及雜質的含量,不包括水份等雜質;而多肽含量則是指目標多肽在產品中的凈含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法來檢測;因此一條多肽即使純
1. 多肽含量與多肽純度有什么區別? 一條多肽產品中除了多肽本身還包括生產過程中帶入的水份及有機鹽分等雜質,多肽純度僅指多肽本身所含肽產品的含量及雜質的含量,不包括水份等雜質;而多肽含量則是指目標多肽在產品中的凈含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法來檢測;因此一條多肽即使純
應用優勢 反相肽分離的峰容量更高 與甲酸流動相兼容 有應用于UPLC?和HPLC的兩種顆粒 CSH130 C18 使用細胞色素c 的胰蛋白 酶消化液進行QC檢驗沃特世解決方案 ACQUITY UPLC? H-Class Bio系統 Xevo? G2 QTof質譜儀 AC
實驗材料 培養基中生長的適宜細胞株試劑、試劑盒 乙腈考馬斯亮藍 R-250EBC 裂解緩沖液NETN磷酸鹽緩沖溶液SDS 凝膠加樣緩沖液三氟乙酸胰蛋白酶胰蛋白酶消化緩沖液沉淀靶蛋白的抗體對照抗體不連續的 SDS-PAGE 梯度膠儀器、耗材 沸水浴蛋白質 A-Sepharose平板搖臺實驗步驟 材料緩
試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G 乙酸 甲醇 Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸
實驗材料 蛋白酶K 試劑、試劑盒 變性膠電泳緩沖液 非變
補骨脂素介導的光交聯反應研究RNA與蛋白質分子間的作用實驗實驗材料 蛋白酶K試劑、試劑盒 變性膠電泳緩沖液非變性膠電泳緩沖液結合緩沖液水解緩沖液丙烯酰胺儲存液RNA 洗脫緩沖液四甲基乙二胺過硫酸銨AMV 反轉錄酶及反應緩沖液磷酸鈉8-羥基補骨脂素13-二碘丙烷碳酸鉀丙酮石油醚乙酸乙酯硫酸鈉硅膠三氟乙
基于補骨脂素光化學反應的 RNA-蛋白分子復合物分析法,能夠在數據相對缺乏的情況下分析生理條件下的 RNA-蛋白復合物的拓撲構象。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗材料蛋白酶K試劑、試劑盒變性膠電泳緩沖液非變性膠電泳緩沖液結合緩沖液水解緩沖液丙烯酰胺儲存液RNA 洗脫緩沖液四甲基乙
結果與討論:進口藥品注冊標準中采集的方法時間較長,為30 min一針,改用1.7 μm的BEH C18 100 x 2.1 mm色譜柱,應用HPLC到UPLC的方法轉換器將方法進行同步轉換,采集時間可縮短至5 min。并且將流動相中的三氟乙酸改為甲酸的溶液。DMAG和鹽酸美金剛分離度良好,如圖1。靈
試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G乙酸甲醇Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸乙腈2-丙醇儀器、耗材 SpeedVac 型旋轉濃縮器Tween-20UltrafreeTM MC 濾器C18 反相 HPLC 柱實驗步驟 材料與設備考馬斯亮藍 G(0.05% 的乙酸-20% 甲醇溶液)乙酸 (5
分子生物學中最重要的環節之一是對微量蛋白質進行分析,使對編碼待研究蛋白的 cDNA 序列的克隆成為可能。為有效地做到這一點,通常需要知道蛋白質的內序列。在這一方面,肽段的有效分離是極重要的。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒考馬斯亮藍 G乙酸甲醇Achromobacte
一、檢測目的:1、熟練掌握薄層層析法原理。2、掌握薄層層析操作作方法。 二、原理 樣品中黃曲霉毒素B1經有機溶劑提取,濃縮、凈化以及薄層分離前處理后,在波長365nm紫外光下產生蘭紫色熒光,根據其在薄層板上顯示熒光的最低檢出量來測定含
黃曲霉毒素是一種肝臟毒素,對人和許多動物都有極強的致癌性,其中黃曲霉毒素B1毒性最大,致癌性最強。因此,食品中黃曲霉毒素B1的檢測是非常重要的。下面介紹的分離及測定黃曲霉毒素的方法——薄層色譜法(TLC)是常規分析中常用的一種重要方法。 一、 原理 樣品中黃曲霉毒素B1經提取、濃縮、薄層分離
微量金屬的金屬測定在國外早就開始進行了測定,但是國內目前還是處在研究的初級階段,技術方面還是不如國外先進,但是我們也開始向智能化方向發展了,磁性金屬物測定儀主要就是對金屬進行測定的。主要是想通過一些有機物質對金屬的合成,然后再通過我們的超強分辨力將色
引言基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是近些年發展起來的一種新型的細菌鑒定技術。它主要根據不同細菌具有不同的蛋白質指紋
總流程:超純水沖洗柱——流動相分離樣品——超純水沖洗柱——純乙睛保存柱1.電源準備打開穩壓器()電源開關,須待電壓指示至220V后,才能開啟其他有關設備。2.HP1100高效液相色譜儀的準備試劑:三氟乙酸乙腈(Fisher公司產品色譜純)超純水(Millipore超純水)冰乙酸溶液配置:貯液瓶與流動
1.適用范圍本方法適用于出口茶葉中黃曲霉毒素B1含量的檢驗。2.原理概要樣品用三氯甲烷提取,提取液經硅膠柱凈化,凈化后的提取液用三氟乙酸衍生,用配有熒光檢測器的液相色譜儀測定,外標法定量。3.主要試劑和儀器3.1.主要試劑三氯甲烷;正己烷;苯;甲醇:紫外光譜級;乙腈:紫外光譜級;三氟乙酸;乙腈-水溶
近日,中國科學技術大學教授吳長征研究組與張群研究組合作,研制出全新水溶性簡單小分子助催化劑,使光催化產氫性能大幅提升,為擺脫目前廣泛使用的貴金屬助催化劑提供了新途徑。該成果已在線發表于《自然—通訊》。 貴金屬被廣泛認為是提高太陽光光子能量利用效率的高效助催化劑,然而貴金屬作為固體催化劑往往接觸