RNA提取時RNA降解原因
1 ) 新鮮細胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鮮組織： 某些含有內源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時采用更多的裂解液。 3 ) 冷凍樣品： 樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉移到-70℃冰箱存放。如果未經液氮速冷直接轉移到-70℃冰箱存放，會造成RNA緩慢降解。樣品研磨后，在液氮剛剛揮發完時，將樣品迅速轉移到含裂解液的容器中，立即混勻勻漿。 4 ) 外源 RNA 酶的污染： 試劑、器械等實驗用品應該采用DEPC 水滅菌處理。 5 ) 內源 RNA 酶的污染： 抑制劑失效或者用量不夠，實驗樣品過多或者勻漿溫度過高。......閱讀全文
RNA加工修飾
中文名RNA加工修飾所屬領域生物學定義RNA加工修飾，主要加工方式是切斷和堿基修飾，真核生物tRNA前體一般無生物學特性，需要進行加工修飾。
前信使RNA
中文名稱前信使RNA英文名稱pre-messenger RNA;pre-mRNA;precursor mRNA定 義未經剪接加工的基因轉錄產物。即初級轉錄物。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞遺傳（二級學科）
小分子RNA
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”，但越來越多的證據清楚的表明，RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾（RNA interference）的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識，更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有力工具，
DNA－and－RNA－EXTRACTIONS
A protocol / method / schedule /procedure for extraction / isolation of both DNA and RNA from the same material typically plant leaf / leaves(See also
Poly(A)+RNA－Isolation
Eukaryotic messenger RNA (mRNA) can be separated from the other RNA species in a total RNA preparation by affinity chromatography by virtue of the
RNA－反轉錄
?實驗材料 poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin實驗步驟 一材料與設備1)p
Reverse－Transcription－of－RNA
實驗概要The purpose of Reverse transcription of RNA is acquiring cDNA for follow research.實驗原理Reverse ?Transcription (RT reaction) is a process in which s
RNA的提取
一、準備試劑：氯仿，異丙醇，75℅乙醇，無RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC處理過的水配制）。二、操作步驟：1. 勻漿處理：a. 組織 將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1ml TRIzol，用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。b. 單層培養細胞
RNA－isolation－for－Microarray
Description?RNA extraction using TRI REAGENT. This method gives ample amout of RNA.Procedure?It is 3 days procedure.Day 1:1. Harvest the cells and cen
RNA的制備
來源于任何細胞的RNA都可以通過反轉錄酶的作用拷貝成雙鏈DNA并克隆化，獲得相應的于特定細胞來源的cDNA文庫。因此，RNA制備的意義有兩個方面?* 獲得特定細胞來源的cDNA文庫，克隆目的基因?* 分析基因的表達，闡明基因調控的特性，了解從基因轉錄產生RNA的結構，數量，水平及合成的速率抑制RNA
RNA－gel－electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
純化RNA實驗
從培養的細胞中純化總RNA 從組織中純化總RNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
RNA點雜交
RNA點雜交1）??純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1．切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕，在20×SSC中室溫泡1 h。2．在膜浸泡期間，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置，再用無菌水洗干凈。3．把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕，再放到
RNA點線雜交
RNA點線雜交（Dot and Slot blotting）·?????????RNA dot blot and slot blot (Beverly Faulkner-Jones)This methods allows the rapid analysis of numerous small sa
RNA－Isolation－Protocol
Stabilize RNAStart with 15 ml E. coli Culture containing 7.5* 109 cells (OD600= 0.2 Dilute cells or scale up)Pipet 30 ml of RNAProtect Bacteria Reagen
RNA－Isolation－Protocol
RNA Isolation Protocol(Revised 5-15-2003)Stabilize RNAStart with 15 ml E. coli Culture containing 7.5* 109?cells (OD600= 0.2 Dilute cells or scale up)
RNA干涉實驗
RNA 干涉（RNA1） 是指在真核細胞中引入雙鏈 RNA ( doubt-stranded RNA，dsRNA ) 分子從而導致具有序列同源性的基因產生特異件基內沉默（gene silencing ) 的現象。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理當確定了靶基因上的 siRN
RNA點雜交
1） 純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1．切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕，在20×SSC中室溫泡1 h。2．在膜浸泡期間，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置，再用無菌水洗干凈。3．把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕，再放到真空器頂部。4
RNA－Immunoprecipita...
實驗概要Interest in RNA-protein interactions is booming as we begin to appreciate the role of RNA, not just in well-established processes such as tran
RNA干涉實驗
化學合成siRNA分子實驗 體外轉錄合成siRNA分子實驗 采用RNA聚合酶Ⅲ啟動子表達siRNA分子 采用RNaseⅢ制備siRNA分子實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法
RNA－gel－electrophoresis
實驗概要RNA gel electrophoresis主要試劑DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
RNA－反轉錄
? ? ? ? ? ? 實驗材料 poly(A)+RNA 反轉錄酶 鼠源反轉酶 ?或禽源反轉錄酶 試劑、試劑盒 oligo
RNA微注射
·?????????RNA Injection?(Hoshi Lab)The oocyte is a useful model for the investigation of the function of usr/localious genes and is a widely used syst
RNA干涉實驗
實驗方法原理 當確定了靶基因上的 siRNA 分子作用位點以后，根據靶位點的序列可以很方便地推導得到相應的 siRNA 分子的正義與反義 RNA 鏈序列。它們包含 19 bp 的互補雙鏈區和兩側的不配對區（每側為 2 個 U 成 2 個 T )，在合成時用 T 替代 U 可以降低成本并可以提
RNA的提取
【實驗原理】Trizol 試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA 的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持RNA 的完整性。加入氯仿后離心，樣品分成水樣層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后，RNA 可以通過異丙醇沉淀獲得。【實驗儀器】1. 勻漿機2. 低溫離心機3. 渦旋器【試劑及配制】1
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成
RNA病毒介紹
RNA是核糖核酸，single-stranded是單鏈。一般看脫氧核糖核酸（DNA）的圖片都是有兩條鏈扭在一起，而核糖核酸一般都是單鏈的。講到ssRNA，一般都是在說RNA病毒。一般來說生物學家是根據RNA能否直接起mRNA作用而分成正鏈ssRNA病毒與負鏈ssRNA病毒兩種。(1)正鏈RNA病毒（
真核細胞總RNA的制備（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation?Guanidine-based isolation Objective: ?To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials ?Denaturing Solution
從果蠅胚胎中提取總－RNA－或－poIy(A)－+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH ?乙醇 ?3mol L 乙酸鈉 ? 苯酚 ?無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖
從果蠅胚胎中提取總－RNA－或－poIy(A)－+RNA
試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸鈉 苯酚 無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖液 TE 緩沖液 SEVAG 漂白劑（Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蠅勻漿緩沖液實驗步驟 一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/