蛋白酶K的功能及使用方法
蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體 DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(pH 4-12.5)均有活性。推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。蛋白酶K配制標準:20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinase K):將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。蛋白酶K的保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融,有效保證12月。孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵......閱讀全文
蛋白酶的按蛋白酶作用分類
按蛋白酶作用的最適 pH 可以分為 pH2.5-5.0 的酸性蛋白酶、pH9.5-10.5 的堿性蛋白酶、pH7-8 的中性蛋白酶。根據蛋白酶的活性中心和最適反應 pH 可以分為絲氨酸蛋白酶、巰基蛋白酶、金屬蛋白酶和活性中心有兩個羧基的酸性蛋白酶。
什么是蛋白酶?及蛋白酶的用途
蛋白酶是水解蛋白質肽鏈的一類酶的總稱。按其降解多肽的方式分成內肽酶和端肽酶兩類。前者可把大分子量的多肽鏈從中間切斷,形成分子量較小的朊和胨;后者又可分為羧肽酶和氨肽酶,它們分別從多肽的游離羧基末端或游離氨基末端逐一將肽鏈水解生成氨基酸。
蛋白酶的作用及蛋白酶的種類
蛋白酶是一種活性酶,它分為很多種,每種都可以用作不同的地方。下面我為大家帶來了蛋白酶的作用,僅供參考,謝謝閱讀。 蛋白酶的種類 ?1.木瓜蛋白酶 木瓜蛋白酶,是一種蛋白水解酶,可將抗體分子水解為3個片段。是番木瓜中含有的一種低特異性蛋白水解酶,活性中心含半胱氨酸,屬巰基蛋白酶,應用于啤酒及
蛋白酶簡介
CAS編碼 9014-01-1,9001-92-7,9036-06-0英文通用名稱 Protease中文通用名稱 蛋白酶英文商品名稱 Proteinase性狀描述 近乎白色至淺棕黃色無定形粉末或液體。溶于水,水溶液一般呈淡黃色。幾乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚。主要作用是使蛋白質水解為低分子蛋白胨、多肽及
糜蛋白酶
鑒別取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含lmg的溶液,取0.05m置白色點滴板上,加N-乙酰-L-酪氨酸乙酯試液0.2ml,混勻后,顯紫紅色制法要求本品應從檢疫合格的牛或豬胰中提取,所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》要求。本品為動物來源,工藝中應進行病毒的安全性控
胰蛋白酶
制法要求本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求。本品為動物來源,工藝中應進行病毒的安全性控制性狀本品為白色或類白色結晶性粉末鑒別取本品約2mg,置白色點滴板上,加對甲苯磺酰-L精氨酸甲酯鹽酸鹽試液0.2ml,攪勻,即顯紫色。檢查酸
糜蛋白酶
鑒別取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含lmg的溶液,取0.05m置白色點滴板上,加N-乙酰-L-酪氨酸乙酯試液0.2ml,混勻后,顯紫紅色制法要求本品應從檢疫合格的牛或豬胰中提取,所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》要求。本品為動物來源,工藝中應進行病毒的安全性控
胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法
方法名稱: 胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法應用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價。本方法適用于胃蛋白酶。方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價。試劑: 1. 血紅蛋白試液2.?三氟醋酸溶液3. 鹽酸溶
胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法
方法名稱: 胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法應用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價。本方法適用于胃蛋白酶。方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價。試劑: 1. 血紅蛋白試液2.?三氟醋酸溶液3. 鹽酸溶
胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法
方法名稱: 胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法應用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價。本方法適用于胃蛋白酶。方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價。試劑: 1. 血紅蛋白試液2.?三氟醋酸溶液3. 鹽酸溶
胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法
方法名稱: 胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法應用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價。本方法適用于胃蛋白酶。方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價。試劑: 1. 血紅蛋白試液2.?三氟醋酸溶液3. 鹽酸溶
蛋白酶的應用
蛋白酶是最重要的一種工業酶制劑,能催化蛋白質和多肽水解,廣泛存在于動物內臟、植物莖葉、果實和微生物中。在干酪生產、肉類嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人體消化道中的蛋白酶,在它們的作用下,人體攝入的蛋白質被水解成小分子肽和氨基酸。目前在焙烤工業
胰凝乳蛋白酶
用 SUPHEPA 測定 用 GLUPHEPA 測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 α
蛋白酶應用介紹
皮革工業的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節省時間,又改善勞動衛生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用,如用胃蛋白酶治療消化不良,用酸性蛋白酶治療支氣管炎,用憚性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科化膿性創口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的
胰凝乳蛋白酶
實驗方法原理 實驗材料 α-胰凝乳蛋白酶試劑、試劑盒 三甲醇胺-NaOH三甲醇胺-NaOHN-琥珀酰-L-苯丙氨酰對硝基苯胺儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」在 25℃。測定 405 nm 吸光值增加,對硝基苯胺的吸收系數為 ε405=10.2×103 l(mol · c
蛋白酶作用機理
蛋白酶能作用于蛋白質和多肽形成多肽和氨基酸。完好的面粉中蛋白質活力很低,制作面包時添加蛋白酶會使面團中多肽和氨基酸含量增加,氨基酸是形成香味物質的中間產物,多肽則是潛在的滋味增加劑,氧化劑、甜味劑或苦味劑。蛋白質種類不同,產生的羰 化合物也不同,若蛋白酶中不含產生異味的脂酶,適量添加有利于改善面包的
蛋白酶的用途
1 用于食品發酵工業醬油的釀造就是利用米曲霉分泌的蛋白酶分解原料中的蛋白質,使其降解為胨、多肽、氨基酸,生成色、香、味于一體的產品。也有直接用蛋白酶制劑釀造醬油,但風味欠佳。啤酒釀造中,當麥芽糖用量減少輔料增加時,常需要補充蛋白酶,使蛋白質充分降解,霉菌和細菌蛋白酶適合這一用途。微生物酸性蛋白酶還是
?蛋白酶作用機理
蛋白酶能作用于蛋白質和多肽形成多肽和氨基酸。完好的面粉中蛋白質活力很低,制作面包時添加蛋白酶會使面團中多肽和氨基酸含量增加,氨基酸是形成香味物質的中間產物,多肽則是潛在的滋味增加劑,氧化劑、甜味劑或苦味劑。蛋白質種類不同,產生的羰 化合物也不同,若蛋白酶中不含產生異味的脂酶,適量添加有利于改善面包的
蛋白酶的分布
蛋白酶廣泛存在于動物內臟、植物莖葉、果實和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、細菌,其次由酵母、放線菌生產。
胃蛋白酶-Pepsin
CAS編碼 9001-75-6英文通用名稱 Pepsin中文通用名稱 胃蛋白酶英文商品名稱 Aviun pepsin性狀描述 I白色至淡棕黃色水溶性粉末,無臭,或為琥珀色糊狀,或為澄清的琥珀色至棕色液體。主要作用是使多肽類水解為低分子的肽類。在酸性介質中有極高的活性,即使在PH值為1時仍為活化的,最
蛋白酶的分類
蛋白酶(Protecses)粗分;可分為溶膠化酶(Peptldesos)和蛋白質水解酶(Protcinases),它們都能將肽鍵分解成酸與胺兩部分,但往往表現出不同的與表面活性劑的適應性,后者(蛋白酶)只與陰離子型中直鏈苯磺酸鹽相容,其活性不受影響。前者(溶膠化酶),對陰離子與非離子的LAS,LES
菠蘿蛋白酶簡介
性狀描述 白色至淺棕黃色無定形粉末。溶于水,不溶液無色至淡黃色,有時有乳白光,不溶于乙醇、氯仿和乙 醚。屬糖蛋白。主要作用原理是使多肽類水解為低分子量的肽類。尚有水解酰胺基鍵和酯類的作用。分子量約33000,等電點的pH值為9.35,最適pH值6~8,最適溫度55℃。制法 由菠蘿(Ananas co
蛋白酶的分類
按蛋白酶水解蛋白質的方式可分為以下幾種。(1)切開蛋白質分子內部肽鍵,生成相對分子質量較小的多肽類,這類酶一般叫內肽酶;(2)切開蛋白質或多肽分子氨基或羧基末端的肽鍵,而游離出氨基酸,這類酶叫外肽酶。作用于氨基末端的稱為氨肽酶,作用于羧基末端的稱為羧肽酶;(3)水解蛋白質或多肽的脂鍵;(4)水解蛋白
蛋白酶的來源
蛋白酶廣泛存在于動物內臟、植物莖葉、果實和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、細菌,其次由酵母、放線菌生產。
蛋白酶的用途
1 用于食品發酵工業醬油的釀造就是利用米曲霉分泌的蛋白酶分解原料中的蛋白質,使其降解為胨、多肽、氨基酸,生成色、香、味于一體的產品。也有直接用蛋白酶制劑釀造醬油,但風味欠佳。啤酒釀造中,當麥芽糖用量減少輔料增加時,常需要補充蛋白酶,使蛋白質充分降解,霉菌和細菌蛋白酶適合這一用途。微生物酸性蛋白酶還是
堿性蛋白酶簡介
CAS編碼 9014-01-1英文通用名稱 Alcalase中文通用名稱 堿性蛋白酶中文商品名稱 愛爾卡酶性狀描述 澄清透明褐色液體。主要成分為絲氨酸型蛋白酶的枯草溶菌素(Subtilisin carlsberg)。混溶于水,相對密度約為1.06。最適溫度50~60℃,PH8.5(6~10)。制法
胰蛋白酶-簡介
CAS編碼 9002-07-7英文通用名稱 Trypsin中文通用名稱 胰蛋白酶性狀描述 一種蛋白質水解酶。白色至淺棕黃色無定形粉末。可溶于水,幾乎不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。其主要作用是使多肽類水解為低分子的肽類。由233個氨基酸組成。作用的最適PH值為3,PH值6以下安定,PH值9以上時自溶。
胃蛋白酶原的概述
胃蛋白酶原是由主細胞合成的,并以不具有活性的酶原顆粒形式貯存在細胞內。當細胞內充滿酶原顆粒時,它對新的酶原產生負反饋作用。持續的刺激可使主細胞內的顆粒歷釋放而完全消失,便分泌仍繼續進入,說明酶原也可以不經過顆粒的形式直接釋放出來。 分泌入胃腔內的胃蛋白酶原在胃酸的作用下,從分子中分離出一個小分
蛋白酶k的作用
值得注意的是,蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果.EDTA緩沖液可以替代蛋白
胰蛋白酶的作用
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時,胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2