KinExA分子和細胞相互作用儀與SPR的技術對比(二)
四、案例案例一:完整細胞的相互作用檢測<背景>:單克隆抗體XMetA是胰島素受體(IR)變構部分的激動劑,其激活代謝Akt激酶信號通路,而對有絲分裂胞外信號調節激酶(ERK)信號通路幾乎沒有影響。為了研究這種選擇性信號通路的性質,作者驗證了XMetA對CHO細胞中IR,Akt和ERK的特異性磷酸化和活化的影響。<目的>:完整細胞親和力檢測。<方法>:研究者將表達短鏈型(IR-A)及長鏈型(IR-B)胰島素受體的不同濃度CHO細胞分別與XMetA孵育,通過離心獲得游離的XMetA,用KinExA儀器檢測親和力。另外,作者采取同樣的策略,用KinExA儀器檢測胰島素與CHO細胞表面IR-A,IR-B的親和力。<結論>:XMetA與IR-A亞型的親和力為55±16pM,與IR-B亞型的親和力為50±11pM。另外,在對照抗體組,胰島素與IR-A亞型的親和力為156±14pM;在XMetA......閱讀全文
KinExA分子和細胞相互作用儀與SPR的技術對比(二)
四、案例案例一:完整細胞的相互作用檢測:單克隆抗體XMetA是胰島素受體(IR)變構部分的激動劑,其激活代謝Akt激酶信號通路,而對有絲分裂胞外信號調節激酶(ERK)信號通路幾乎沒有影響。為了研究這種選擇性信號通路的性質,作者驗證了XMetA對CHO細胞中IR,Akt和ERK的特異性磷酸化和活化的影
KinExA分子和細胞相互作用儀與SPR的技術對比(一)
一、背景:Sapidyne Instruments Inc.于1995年在美國創立,產品基于獨特的Kinetic Exclusion Assay(KinExA?)專利技術。在公司成立早期,Xavier大學、美國陸軍和環境保護局等研究單位采用KinExA技術開展了大量工作;經過數十年在生物制藥領域、科
KinExA分子與完整細胞相互作用系統的原理與應用(二)
結果表明,CAR-T細胞與抗原的親和力Kd為45.41pM,T細胞表面CAR的表達水平為1.368e+5,Kd與EL的95%置信區間均較窄,數據非常準確可信。 應用二、KinExA在高親和力檢測上應用對于抗腫瘤藥市場,目前精準醫療最為成熟的領域還是以靶向藥物為代表的抗腫瘤藥物。由于單克隆抗體類抗癌藥
KinExA分子與完整細胞相互作用系統的原理與應用(一)
一、KinExA的技術背景: Sapidyne Instruments Inc.于1995年在美國創立,產品基于獨特的Kinetic Exclusion Assay(KinExA)專利技術。在公司成立早期,Xavier大學、美國陸軍和環境保護局等研究單位采用KinExA技術開展了大量工作;經過數
大分子相互作用儀SPR技術原理
表面等離子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一種光學物理傳感技術。如圖1所示,一束P偏振光在一定的角度范圍內入射到棱鏡端面,在棱鏡與金屬薄膜(Au或Ag)的界面將產生表面等離子波。當入射光波的傳播常數與表面等離子波的傳播常數相匹配時,引起金屬膜內自由電子產生共振
大分子相互作用儀SPR技術原理
表面等離子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一種光學物理傳感技術。如圖1所示,一束P偏振光在一定的角度范圍內入射到棱鏡端面,在棱鏡與金屬薄膜(Au或Ag)的界面將產生表面等離子波。當入射光波的傳播常數與表面等離子波的傳播常數相匹配時,引起金屬膜內自由電子產生共振
KinExA分子與完整細胞相互作用系統在CAR-T細胞治療中的...
因多種因素的限制,自體CAR-T細胞治療產品可能在應用于患者前未必能夠進行全部項目的檢定,所以工藝驗證非常重要。工藝研究及驗證必須結合工藝的實際情況設定相應的驗證參數,CAR-T細胞產品工藝研究在不斷發展,到目前為止,業界對何種工藝最好并未達成共識。因此,可以在產品研發過程及早期臨床試驗階段開展不同
實時無標記SPR技術研究分子相互作用的優勢介紹(二)
綜合比較SPR與CO-IP實驗:相同點:(1)測定兩種甚至更多種蛋白質是否在體內結合;(2)鑒定一種特定蛋白質的作用搭檔;(3)分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。SPR檢測優勢: 傳統SPR技術的儀器使用復雜,讓很多老師望而卻步,加拿大Nicoya公司的下一代的LSPR專利技術系統OpenSPR
SPR生物分子相互作用分析儀創新技術優勢大盤點(二)
可與傳統SPR技術媲美的實驗結果精度:用OpenSPR,IBIS,Biacore三款儀器分別對相同的配體M1,M2做檢測,分析結果顯示,三款儀器具有可比的相似的信噪比:?Figure 2. OpenSPR對(M1,M2)偶聯曲線與動力學分析Figure 3. IBIS對(M1,M2)偶聯曲線與動力學
KinExA分子與完整細胞相互作用系統在CAR-T細胞治療中應用
因多種因素的限制,自體CAR-T細胞治療產品可能在應用于患者前未必能夠進行全部項目的檢定,所以工藝驗證非常重要。工藝研究及驗證必須結合工藝的實際情況設定相應的驗證參數,CAR-T細胞產品工藝研究在不斷發展,到目前為止,業界對何種工藝最好并未達成共識。因此,可以在產品研發過程及早期臨床試驗階段開展不同