實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片,迅速在液氮中研磨成粉末,轉入已準備好的離心管中,劇烈震蕩。4. 混勻,冰浴30min。5. 4℃,12000rpm,10min。6. 上清至另一離心管中加0.4mL氯仿,劇烈震蕩。冰浴放置5min。7. 4℃,12000rpm,10min。8. 棄有機相(下層) 加入0.4mL氯仿和0.4mL酚,室溫放置5min。9. 4℃,12000rpm,10min,棄有機相,加入等體積異丙醇。-20℃放置1h。10. 4℃,12000rpm,10min,沉淀用70%乙醇洗兩次。11. 室溫稍干燥。12. 沉淀加20μLDEPC水溶解(-20℃保存)13. RNA電泳:1%瓊脂糖膠20mL,8μL樣品,......閱讀全文
先進科技 搶先體驗你還在為你的核酸提取發愁嗎?你還在為你的科研經費發愁嗎?東西越貴就一定越好嗎?不!體驗一下BioTeke給你帶來的從核酸提取、PCR、RT-PCR到熒光定量的完美解決方案吧! ¤ 你知道如何保護樣品的RNA不降解嗎?已經有很多人在用了,如果你還不知道,趕快行動吧
實驗材料:小麥 試劑、試劑盒:β-巰基乙醇 &nb
摘 要: RACE是一種快速克隆cDNA末端的方法,目前, 該方法被廣泛應用于未知堿基序列基因的克隆,尤其是SMART RACE技術更為人們所青睞。本文總結了我們實驗室用SMART RACE技術克隆基因的一些心得體會,希望對用RACE方法克隆基因的同行有些幫助。關鍵詞: RACE; RN
實驗概要掌握RNA提取的基本技術,了解RNA提取過程中的各種注意事項。實驗原理RNA提取是分子生物學實驗中難度較大的實驗技術。 RNA提取和DNA提取有類似的地方,因為它們都是核酸,都具有較好的水溶性。提取RNA首先破碎細胞,然后用提取液將RNA溶出,反復抽提去除蛋白質,加入乙醇沉淀RNA
[實驗原理]RNA是一類極易降解的分子,要得到完整的RNA必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。本實驗以小麥為材料,采用異硫氰酸胍—苯酚—氯仿抽提法或CTAB法提取總RNA。異硫氰酸胍是高濃度變性劑,可溶解蛋白質,破壞細胞結構,使蛋白質與核酸分離,失活RNA
3.4 RNA 提取3.4.1 小麥胚乳總 RNA 提取提取方法根據 Chang 等 [ 11 ] 改編而來。( 1 ) 用預冷的研缽和杵(-70°C ) 在液氮里將 2~3 g 組織磨成粉末(見注 8 ) 。( 2 ) 室溫下迅速將磨碎組織轉移到有 15 ml 提取緩沖液(加入 300 μl β-
3.9 芯片數據介紹對簡單的實質等同性實驗來說,一個比較轉基因系與對照之間基因表達的散點圖就已足夠了。文獻 [ 5 ] 中參與兩個實驗的樣品都標注在圖15. 2中。結果用 GeneSpring 軟件包顯示,繪制了每組比較小麥系之間每個基因成對的平均強度,并突出顯示少數感興趣的基因(統計上顯著
3.9 芯片數據介紹對簡單的實質等同性實驗來說,一個比較轉基因系與對照之間基因表達的散點圖就已足夠了。文獻 [ 5 ] 中參與兩個實驗的樣品都標注在圖15. 2中。結果用 GeneSpring 軟件包顯示,繪制了每組比較小麥系之間每個基因成對的平均強度,并突出顯示少數感興趣的基因(統計上顯著差異表達
實驗材料小麥試劑、試劑盒β-巰基乙醇氯仿異戊醇SSTE 緩沖液儀器、耗材SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗步驟3.1 芯片背景我們使用了 19846 個點,包含 9246 個 Unigene 序列的小麥 cDNA 芯片(http://www . cerealsdb. uk. net/index. htm
環狀RNA“一站式”服務一直以來是云序生物的主打產品,嚴格的質控把關、嚴謹的實驗設計、出色的生信分析以及貼心的售后服務造就了多項世界首篇環狀RNA研究文章,受到了廣大客戶的一致好評。迄今為止,云序已經積累了超過10000例環狀RNA測序的經驗,樣本覆蓋20多個物種以及50多種疾病,客戶發表文章達
種子DNA提取儀也就是我們常說的組織研磨儀,顧名思義,它可以進行細胞破碎和DNA提取,是實驗室樣品制備常用儀器,主要用于樣本的粉碎、混合、均化等,可以對硬性、軟性、彈性等樣品進行快速粉碎與均相化處理。 為了研究DNA分子在生命
作為最新的明星分子,環狀RNA的熱度與日俱增。環狀RNA到底火到了什么程度?從云序客戶捷報頻傳﹑研究成果不斷就可見一斑:上期我們剛剛介紹云序客戶發表了世界首個小鼠腦創傷模型外泌體環狀RNA的研究,整合了外泌體和環狀RNA兩大科研熱點。在探索新物種的環狀RNA研究上,云序客戶此前更是先后發表了全世
作為最新的明星分子,環狀RNA的熱度與日俱增。環狀RNA到底火到了什么程度?從云序客戶捷報頻傳﹑研究成果不斷就可見一斑:上期我們剛剛介紹云序客戶發表了世界首個小鼠腦創傷模型外泌體環狀RNA的研究,整合了外泌體和環狀RNA兩大科研熱點。在探索新物種的環狀RNA研究上,云序客戶此前更是先后發表了全世
一、實驗目的掌握植物總RNA提取的原理和方法二、實驗原理RNA的提取:破壞細胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去鹽離子。RNase是一類生物活性極其穩定的酶類,能耐高溫、耐酸、耐堿,高壓滅菌處理也不能使其完全失活。在提取RNA實驗中,要盡量抑制RNase的活性。?DEPC(焦磷酸二乙酯)是很強的RNas
作為最新的明星分子,環狀RNA的熱度與日俱增。環狀RNA到底火到了什么程度?從云序客戶捷報頻傳﹑研究成果不斷就可見一斑:上期我們剛剛介紹云序客戶發表了世界首個小鼠腦創傷模型外泌體環狀RNA的研究,整合了外泌體和環狀RNA兩大科研熱點。在探索新物種的環狀RNA研究上,云序客戶此前更是先后發表了全世界第
高通量植物(轉)基因檢測的利器---植物材料直接PCR技術 摘要: 北京百泰克生物技術有限公司暨推出通用植物總RNA提取試劑盒(RP3301)成功解決了各種難提植物RNA的問題后,新近又針對高通量植物DNA的提取擴增推出了最新產品——植物直接PCR試劑盒(PR7501),該試劑盒不需要
種子DNA提取儀也 叫高通量組織研磨儀,是一種專用于樣品研磨的儀器,近年來,該儀器在現代農業科研中的應用,越來越廣泛,這是因為隨著實驗室科研進度的日益加快,手動研磨 已無法滿足科研工作需要的情況下,而種子DNA提取儀可以作為很好的替代產品解決種子研磨的問題。應用種子DNA提取儀研磨破碎經濟作物種子,
實驗概要從黃化小麥苗中提取總RNA,可以為cDNA文庫的構建做好準備。實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃
背景介紹 RNA沉默是真核生物中調控基因表達的一種保守機制,它在植物生長發育和抗病毒中發揮著重要的作用。RNA病毒進入寄主植物細胞后,其復制中間復合體和單鏈基因組RNA的高級結構形成的雙鏈RNA可以被寄主植物DCL蛋白識別,加工產生21-24-nt的初級來源于病毒的siRNA(vsiRNA
RNA沉默是真核生物中調控基因表達的一種保守機制,它在植物生長發育和抗病毒中發揮著重要的作用。RNA病毒進入寄主植物細胞后,其復制中間復合體和單鏈基因組RNA的高級結構形成的雙鏈RNA可以被寄主植物DCL蛋白識別,加工產生21-24-nt的初級來源于病毒的siRNA(vsiRNA)。初級vsiR
背景介紹RNA沉默是真核生物中調控基因表達的一種保守機制,它在植物生長發育和抗病毒中發揮著重要的作用。RNA病毒進入寄主植物細胞后,其復制中間復合體和單鏈基因組RNA的高級結構形成的雙鏈RNA可以被寄主植物DCL蛋白識別,加工產生21-24-nt的初級來源于病毒的siRNA(vsiRNA)。初級vs
基因組編輯技術CRISPR/Cas9被《科學》雜志列為2013年年度十大科技進展之一,受到人們的高度重視。CRISPR是規律間隔性成簇短回文重復序列的簡稱,Cas是CRISPR相關蛋白的簡稱。CRISPR/Cas最初是在細菌體內發現的,是細菌用來識別和摧毀抗噬菌體和其他病原體入侵的防御系統。圖片
實驗材料 白蛋白球蛋白試劑、試劑盒 提取液漂洗液溶解液燒化劑甘油溶液實驗步驟 3.1 種子總蛋白提取的普適方法使用普適方法的目的在于從研磨好的種子中提取總蛋白質,不考慮具體的蛋白質種類 。此方法由 Damerval 等 [ 9] 及 Granier [ 10 ] 提出,它可以用于所有的種子,參見第
實驗材料白蛋白 &n
實驗材料白蛋白球蛋白試劑、試劑盒提取液漂洗液溶解液燒化劑甘油溶液實驗步驟3.1 種子總蛋白提取的普適方法使用普適方法的目的在于從研磨好的種子中提取總蛋白質,不考慮具體的蛋白質種類 。此方法由 Damerval 等 [ 9] 及 Granier [ 10 ] 提出,它可以用于所有的種子,參見第 1 章
1.1.2.2 降落PCRTD-PCR是一種在一個反應管或少數幾個反應管中通過一系列退火溫度逐漸降低的反應循環來達到最佳擴增目的基因的PCR方案。它通過體系自身的代償功能彌補以反應體系和并非完美的循環參數所造成的不足。此策略保證了最初形成的引物模板雜交體具最強的特異性。盡管最后一些循環采
種子單粒粉碎器和種子研磨儀雖然都是樣品粉碎設備,但在功能、應用方面還是有所區別的。 種子單粒粉碎器一次只能粉碎單粒種子,主要用作種子蛋白電泳測純樣品的粉碎。 該儀器功能特點有:1、適用于種子
TL系列植物組織破碎儀具有對稱的一對高速大振幅的搖臂,通過研磨珠在樣品管內來回不規則撞擊及摩擦,在幾秒到幾分鐘內輕松實現樣品的研磨、粉碎、混合及細胞破壁。精細的研磨,最細可以達到5微米。對于不同的的樣品,TL系列植物組織破碎儀需要用不同的條件來處理,這里面主要涉及研磨速度、研磨時間、研磨溫度和研磨珠
中國農科院棉花研究所針對 20 多個棉花品種,成功建立了高效、穩定的規模化轉化體系,以流水線的操作方式,建立了高效、工廠化的棉花轉基因技術體系。本文援引中國農業科學院棉花研究所的發明專利內容,以制備轉 GAPDH 基因棉花的具體方法為例,以應用實例演示棉花轉基因技術的具體應用案例。土壤鹽漬化是一個全
實驗概要掌握植物基因組DNA提取的一般方法及注意事項。大分子量DNA分子的酶切分析。實驗原理十六烷基三乙基溴化胺(CTAB)是一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復合物,在高鹽溶液中(0.7mol/L NaCl)是可溶的,當降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L N