原代細胞甲基綠哌咯寧法顯示DNA和RNA
基本原理:甲基綠(methyl green)和哌咯寧(pyronin)均為堿性染料,因此可與帶負電荷的磷酸根形成鹽。甲基綠分子有2個正電荷,易與雙鏈DNA分子結合使原代細胞核內的DNA呈藍綠色。哌咯寧分子有一個正電荷,易與單鏈RNA分子結合使原代細胞質和核仁內的RNA顯示紅色。也有人認為染色原理與核酸分子的空間構型有關。 配制試劑:1. 0.2mol/L pH4.8的乙酸緩沖液的配制將1.2ml冰乙酸加蒸餾水定容至100ml,在使用時再加2.72g乙酸鈉(NaAc·3H2O),待完全溶解后,即可使用;2. 甲基綠-哌咯寧染色液配制A液:取2g甲基綠加入100ml pH4.8的0.2mol/L的乙酸緩沖液中即可;B液:取1g哌咯寧加入100ml pH4.8的0.2mol/L的......閱讀全文
原代細胞甲基綠哌咯寧法顯示DNA和RNA
基本原理:甲基綠(methyl green)和哌咯寧(pyronin)均為堿性染料,因此可與帶負電荷的磷酸根形成鹽。甲基綠分子有2個正電荷,易與雙鏈DNA分子結合使原代細胞核內的DNA呈藍綠色。哌咯寧分子有一個正電荷,易與單鏈RNA分子結合使原代細胞質和核仁內的RNA顯示紅色。也有人認為染色原理
原代細胞甲基綠哌咯寧法顯示DNA和RNA
基本原理:甲基綠(methyl green)和哌咯寧(pyronin)均為堿性染料,因此可與帶負電荷的磷酸根形成鹽。甲基綠分子有2個正電荷,易與雙鏈DNA分子結合使原代細胞核內的DNA呈藍綠色。哌咯寧分子有一個正電荷,易與單鏈RNA分子結合使原代細胞質和核仁內的RNA顯示紅色。也有人認為染色原理
細胞組分的化學反應實驗
Brachet反應細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示細胞內過氧化物酶的顯示過碘酸雪夫反應(PAS)實驗方法原理細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA
細胞組分的化學反應實驗
實驗方法原理 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量
細胞組分的化學反應實驗——Brachet反應
實驗方法原理細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量分
細胞化學染色方法
實驗原理1. 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對細胞中的 DNA 和 RNA
細胞化學染色方法
實驗原理1. 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對細胞中的 DNA
甲基綠哌洛寧染色法的方法介紹
1899年Pappenheim 首創了甲基綠-哌洛寧(mehtyl-green-pyronim)染色法。1902年Unna對這一方法進行了改良。 1940年Brachet研究證明用甲基綠—哌洛寧對DNA和RNA有選擇性的染色效果。堿性的甲基綠-哌洛寧混合染料處理細胞后,由于DNA、RNA對染料具有的
原代細胞富爾根(Feulgen)反應顯示DNA
原代細胞富爾根(Feulgen)反應顯示DNA?基本原理:顯示DNA的傳統方法是富爾根(Feulgen)反應,切片先用稀鹽酸處理,DNA經弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連接打開,脫氧核糖的一端釋放出醛基,并在原位與Schiff試劑反應生成紫紅
原代細胞富爾根(Feulgen)反應顯示DNA
基本原理:顯示DNA的傳統方法是富爾根(Feulgen)反應,切片先用稀鹽酸處理,DNA經弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連接打開,脫氧核糖的一端釋放出醛基,并在原位與Schiff試劑反應生成紫紅色產物。原理同PAS反應,使細胞核DNA顯紫紅色
DNA酶甲基綠瓊脂(DTA)
成分 DNA 2.0g 植物蛋白胨 5.0g 胰蛋白胨 15.0g 氯化鈉 5.0g 瓊脂(1.5%) 15.0g 蒸餾水 1000mL pH7.3 制法 稱取各成分后,加
細胞組分的化學反應
細胞的組織化學方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究。??? 一、Brachet反應一顯示細胞內的DNA和RNA??? (一)原理??? 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處
光學顯微鏡的使用與細胞化學成分的分析
實驗內容 一、顯微鏡的結構及使用方法 ?1、光學顯微鏡的主要構造機械部分 照明部分 光學部分 ?2、光學顯微鏡的使用方法 對光 → 置片 → 低倍 → 高倍 → 復原 低倍鏡使用 高倍鏡使用 ?3、使用光學顯微鏡的注意事項二、酸性蛋白和堿性蛋白的顯示 1#、2#血涂片→涼干→70%乙醇中固定5分鐘→
原代細胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一種常用熒光染料,吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力,但有一定的特異性,即結合后發不同顏色的熒光,DNA呈亮綠色,而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷,既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
原代細胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一種常用熒光染料,吖啶橙與原代細胞內的DNA、RNA都有親和力,但有一定的特異性,即結合后發不同顏色的熒光,DNA呈亮綠色,而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷,既可染活原代細胞又可染固定原代細胞。用于直接染色觀察活原代細胞或固定染色觀
dna甲基化與rna甲基化的區別
DNA甲基化和組蛋白修飾的相同點:都有包含甲基化修飾;不同點:修飾對象不同,一個是對DNA修飾,一個是對蛋白:組蛋白修飾。而RNA干擾是對RNA的降解,與前兩者差異較大。
DNA顯示和細胞有絲分裂相的觀察
核酸是生物最重要的組成成分,核酸分為兩大類,即脫氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它們在細胞內的分布及化學性質均有所不同。DNA主要分布在核的染色質或有絲分裂過程中出現的染色體內。RNA分布在細胞質和核仁內。但在染色質及染色體中也含有少量的RNA,核仁中也有少量的DNA。在線粒體,葉綠體等細
甲基綠的結構功能
甲基綠(methyl green)以兩種形式存在。Ⅰ式:分子式C26H33Cl2N3。分子量458.49。綠色結晶,帶金黃色光澤或淡綠色粉末。能溶于水,微溶于乙醇,不溶于醚。通常為氯化鋅的復鹽。Ⅱ式:分子式C27H35BrClN3。分子量516.98。綠色粉末,能溶于水呈綠藍色。在pH0.2時溶液呈
甲基綠的應用介紹
用于染印織物及生物體染色 。商品通常為鋅復鹽C26H33N3Cl2·ZnCl2(稱C.I.堿性藍20)。用于細菌染色(新鮮標本細胞核染色)甲基綠-鹽酸混合物用于鑒定精子、淋球菌和肥大細胞染色。甲基綠可用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會被染成藍綠色。
甲基綠安全處理措施
1、作業人員防護措施、防護裝備和應急處置程序:2、建議應急處理人員戴攜氣式呼吸器,穿防靜電服,戴橡膠耐油手套。3、禁止接觸或跨越泄漏物。4、作業時使用的所有設備應接地。5、盡可能切斷泄漏源。6、消除所有點火源。7、根據液體流動、蒸汽或粉塵擴散的影響區域劃定警戒區,無關人員從側風、上風向撤離至安全區。
甲基綠的制備方法
由溴乙烷和紫羅蘭反應得到。
慢性多潛能性免疫增生綜合征的病因及發病機制
病因 慢性多潛能性免疫增生綜合征病因未明,有人認為本病與病毒感染有關,部分病人淋巴結中查出EB病毒的DNA(PCR法)。還有人認為由于感染了人工細胞淋巴瘤病毒的亞型,使機體免疫功能異常而導致本病,因病人淋巴結活檢與艾滋病組織學表現相似。 發病機制 慢性多潛能性免疫增生綜合征發病機制還不清楚
TRIzol法提取組織和細胞總RNA
(一)試劑準備1 . TRIzol 試劑。2 .氯仿3 .異丙醇4 . 75% 乙醇( DEPC H2O 配制)5 . DEPC H2O (二)操作步驟 1 . 樣品處理: (1)培養細胞:收獲細胞 1-5×10 7 ,移入 1.5ml 離心管中,加入 1ml Trizol ,混勻,室溫
RNA-和-DNA-提取:洗脫
DNA 提取方案的還剩余IDE步驟步就是從硅膠中釋放純 DNA 或 RNA。對于 DNA 制備,通常使用 pH 值為 8-9 的 10 mM Tris。DNA 在弱堿性 pH 值下更穩定,在緩沖液中溶解得更快。即使對于 DNA 顆粒也是如此。水的 pH 值往往較低,低至 4-5,并且高分子量 DNA
DNA和RNA提取原理
TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化,細胞裂解,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液分為水相和有機相,R
植物組織和細胞顯微化學染色_檢測植物細胞中核酸方法
實驗步驟(1)脫氧核糖核酸:孚爾根染色法是檢定細胞中 DNA 的一種常用方法,主要染色液為希夫試劑。切片材料加入蒸餾水后,在鹽酸 (1 mol/L) 中 60℃下保溫 5-15 min, 轉入室溫的鹽酸中1min, 蒸餾水清洗,希夫試劑染色 1-5 h, 漂洗液中漂洗 3 次,每次 2-10min,
核酸的染色介紹
核酸染色法一般可將凝膠先用三氯乙酸、甲酸—乙酸混合液、氯化高汞、乙酸、乙酸鑭等固定,或者將有關染料與上述溶液配在一起,同時固定與染色。有的染色液同時染DNA及RNA,如stains-all、溴乙錠、掊花青-鉻礬法等,也有RNA、DNA各自特殊的染色法。1.RNA染色法(1)熒光染料溴乙錠(ethid
甲基綠的計算化學數據
1、疏水參數計算參考值(XlogP):無可用2、氫鍵供體數量:03、氫鍵受體數量:34、可旋轉化學鍵數量:55、拓撲分子極性表面積(TPSA):6.36、重原子數量:327、表面電荷:08、復雜度:6459、同位素原子數量:010、確定原子立構中心數量:011、不確定原子立構中心數量:012、確定化
甲基綠災害處理措施
滅火劑1、用水霧、干粉、泡沫或二氧化碳滅火劑滅火。2、避免使用直流水滅火,直流水可能導致可燃性液體的飛濺,使火勢擴散。滅火注意事項及防護措施1、消防人員須佩戴攜氣式呼吸器,穿全身消防服,在上風向滅火。2、盡可能將容器從火場移至空曠處。3、處在火場中的容器若已變色或從安全泄壓裝置中發出聲音,必須馬上撤
甲基綠使用安全措施
1、操作人員應經過專門培訓,嚴格遵守操作規程。2、操作處置應在具備局部通風或全面通風換氣設施的場所進行。3、避免眼和皮膚的接觸,避免吸入蒸汽。4、遠離火種、熱源,工作場所嚴禁吸煙。5、使用防爆型的通風系統和設備。6、如需罐裝,應控制流速,且有接地裝置,防止靜電積聚。7、避免與氧化劑等禁配物接觸。8、