在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。 病毒誘導融合 病毒是最早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內酯滅活,使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性。用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合的優點:融合率較高,對各種動物細胞都適宜,且仙臺病毒能在雞胚中大量繁殖,容易培養;缺點:仙臺病毒不穩定,在保存過程中融合活性會降低,并且制備過程比較煩瑣。此外,病毒引進細胞后,可能會對細胞的生命活動產生干擾。 聚乙二醇PEG誘導融合 聚乙二醇PEG具有強烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白質的作用,能夠有效地促進植物原生質體和動物細胞的融合。在不同種類的動物細胞混合液中加入聚乙二醇,就會發生細胞凝集作用;在稀釋和除去聚乙二醇......閱讀全文
為什么滅活的仙臺病毒能作細胞融合的誘導劑? 問題的提出 在新冠肺炎疫情下,科研人員加緊在研究新冠病毒(SARS-CoV-2),不斷有新的研究成果產生,如要徹底了解該病毒的結構和侵染機理,還需要一段時間,甚至可能要較長的時間。要知道,人類與病毒的斗爭看不到盡頭,僅僅是認識第一個病毒-煙草花葉病
細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)是指真核細胞通過介導和培養,兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程。人工的細胞融合開始于20世紀50年代, 60年代到70代作為一門新興的技術, 發展非常快, 應用范圍也極為廣泛, 除了同種類細胞間可以
由于對新生物資源需要、淋巴細胞雜交瘤和單克隆抗體的制備,以及尋求遠緣物種間的遺傳物質交換的新途徑,細胞融合技術現在已經成為生命科學里最熱的話題之一,那么,細胞融合的方法就是細胞融合的關鍵。細胞融合的概念 細胞融合(cell fusion):又稱somatic hybridization or c
誘導動物細胞融合的方法在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。病毒誘導融合 病毒是zui早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病
細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)是指真核細胞通過介導和培養,兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程。人工的細胞融合開始于20世紀50年代, 60年代到70代作為一門新興的技術, 發展非常快, 應用范圍也極為廣泛, 除了同種類細胞間可以融合,
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Insti
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
絕大多數腫瘤缺乏特異性抗原,而且腫瘤組織中抗原提呈細胞數量減少、功能低下或缺如。因此應用細胞融合技術將腫瘤細胞和DC融合,融合細胞即包含腫瘤細胞表面的所有抗原,又具有DC的強大的抗原提呈能力和刺激效應細胞免疫能力[1-2]。 轉化生長因子-β(TGF-β)超家族生長分化因子是一種具有多
動物細胞融合也稱細胞雜交(cell hybridization),是指兩個或多個動物細胞融合成一個細胞的過程,融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞,稱為雜交細胞(hybrid cell)。 誘導細胞融合的方法有三種:生物方法(病毒)、化學方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(離心,
廣義的細胞工程(cell engineering)指所有應用于生物學和醫學的、以細胞為操作對象的技術手段,其中也包括細胞培養。一般地說,細胞工程主要指應用各種手段對細胞不同結構層次(整體、細胞器、核、基因等)進行改造,如進行細胞融合、核移植、基因轉移等,以獲得具有特定生物學特性的細胞。一.細胞融
植物細胞轉化 (系統:ECM630/830) 對植物原生質(玉米、煙草等)及完整植物的電穿孔可以用于產生對農業/園藝有用的轉基因作物。植物細胞轉化的一個主要目的是對植物細胞進行穩定轉化以產生具有優良品
3 免疫策略不同實驗室使用的免疫策略是不同的,很多免疫策略都同樣有效。 目的是擴大宿主體內抗原反應性 B 細胞的數量。體內每次接觸到蛋白質抗原,都會增加抗原反應性B 細胞的數量。在對抗原的再次應答中,產生的抗體量會增加,總的免疫球蛋白類別會從以IgM 為主轉變為以IgG 為主,特異性抗體
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并,稱自發融合;異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合,稱誘發融合。仙臺病毒法融合①兩種細胞在一起培養,加入病毒,在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝聚;②在37℃中,病毒與細胞膜發生反應,細胞膜受到破環,此時需要Ca2+和Mg2+,zui適PH為8
活體動物體內光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混
微生物細胞培養,簡稱微生物培養,包括原核細胞培養(細菌培養)和真核細胞培養(霉菌培養和酵母培養)。這些細胞小、且具有細胞壁,細胞周期非常短,如細菌每20-30min增殖1次。植物細胞培養指原生質體培養。未考慮分離出原生質體的植物細胞培養,無論是游離的單細胞或組織塊,都稱作植物組織培養。動物組織細胞培
27. 翻轉擴散(transverse diffusion)又稱為翻轉(flip-flop)。它是指脂分子從脂雙層的一個層面翻轉至另一個層面的運動。磷脂發生翻轉運動時,磷脂的親水頭部基團必須克服內部疏水區的阻力,這在熱力學上是不利的。但是有些細胞含有翻轉酶(flipase)能夠促使某些磷脂從膜脂的一
(一)概況 哺乳動物核移植是指將胚胎單個卵裂球或體細胞核(核供體)移入去核的成熟卵母細胞或受精卵(核受體)中,采用一定的方法激活卵母細胞,使核供體和核受體融合為重構胚,經移植后發育成新個體的技術。通過核移植,可以不經過有性繁殖過程,連續不斷地復制遺傳上相同的胚胎,再借用胚胎移植技術,生
在我們生存的自然界里,除了單細胞生物、少數低等生物,絕大多數的生物從小到大都遵循著一個相同的規律——由一個受精卵發育形成。 就像是父母的精卵結合,產生了受精卵,受精卵開始快速的生長分裂,經歷四細胞期、八細胞期后形成桑椹胚,直到胚胎干細胞有了明顯的分化進而發育成囊胚,原腸胚,最后發育成一個各器官
多細胞生物個體的分化細胞均通過一系列動態調控機制維持其穩態, 不同類型分化細胞之間的轉化在自然條件下不會自發發生. 通過實驗手段可以逆轉細胞分化的進程使之改變狀態, 從一種基因表達譜轉換成另一套表達譜, 從而實現細胞類型的轉化也即重編程. 目前已知可以通過4種不同途徑, 即核移植、細胞融合、胞
一、克隆的早期研究 克隆一詞是英文單詞clone的音譯,作為名詞,c1one通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內所有成員的遺傳構成是完全相同的,例外僅見于有突變發生時。自然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆,例如:同卵雙胞胎實際上就是一種克隆。然而,天然的哺乳動物克隆
動物細胞融合 細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下,體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50 年,現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫,腫瘤及細胞工程的重要手段。在誘導物(如仙臺病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的細
小動物活體成像 主要采用生物發光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進行標記。利用一套非常靈敏的光學
抗體的概念 動物機體受到抗原物質的刺激后, 由B淋巴細胞轉化為漿細胞產生的, 能與相應抗原發生特異性結合反應的免疫球蛋白, 這類免疫球蛋白稱為抗體(Antibody,簡稱 Ab)。 免疫球蛋白 免疫球蛋白(Immunogolobulin, 簡稱Ig) 是指存在于人和動物血液(
小動物活體成像主要采用生物發光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進行標記。利用一套非常靈敏的光學檢測儀器,讓研究人員能夠直
近期爆發的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19,對應的病毒為SARS-CoV-2)突出了開發有效治療方法的重要性。在近期的公眾號中,我們向大家介紹了“人民的希望”瑞德西韋的工作機制[1],在此,我們結合疫苗、血清、多肽和單抗的研究案例,向大家繼續介紹靶向病毒的大分子治療和我們的解決方案是如何推動下
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantib
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibod