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  • 全血基因組提取操作步驟

    操作步驟((200ul全血))* 第一次使用前請先在15ml漂洗液WB中加入60ml無水乙醇! 1. 取200ul新鮮、冷凍或加入各種抗凝劑的血液,放入1.5ml離心管。對如果全血起始量小于200μl,則用緩沖液BB補足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之間,則后續操作需要按照比例增加試劑用量。如果起始量介于300μl-1毫升之間,則需要先進行紅細胞裂解操作(見本說明書后附錄)。2. 加入200μl 結合液CB,立刻劇烈顛倒輕搖,充分混勻,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,顛倒輕搖充分混勻,70℃放置10分鐘,溶液應變清亮(但顏色偏黑色)。3. 加入100μl 異丙醇,劇烈顛倒輕搖,充分混勻,此時可能會出現絮狀沉淀。上述各操作步驟中適當力度充分混勻非常重要,混勻不充分嚴重降低產量,必要時如樣品粘稠不易混勻時可以渦旋振蕩15秒混勻,但不可用手劇烈振蕩,以免剪切DNA。4. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都......閱讀全文

    全血基因組提取操作步驟

    操作步驟((200ul全血))* 第一次使用前請先在15ml漂洗液WB中加入60ml無水乙醇! 1. 取200ul新鮮、冷凍或加入各種抗凝劑的血液,放入1.5ml離心管。對如果全血起始量小于200μl,則用緩沖液BB補足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之間,則后續操作需要按照比例增

    全血RNA提取

    摘要:?RNA提取應該說已經成為了一種常見的分子生物學操作步驟了,但是不少科研人員仍然煩惱著如何尋找一種最好的方法,或者找到一種適合于特殊用途方法。比如說傳統的血液標本表達譜芯片實驗需要先把有核細胞從全血中分離出來,加白細胞分離液、離心等步驟,比較繁瑣,如果能進行全血的提取,那就再好不過。RNA提取

    全血RNA提取實驗

    實驗材料 鮮血液試劑、試劑盒 抗凝劑紅細胞裂解液RLB去蛋白液RW1乙醇漂洗液RW儀器、耗材 制冰機離心機離心管移液槍移液管針頭注射器水浴鍋實驗步驟 一、在適合大小的RNase free離心管中加入1體積(

    全血RNA快速提取

    操作步驟:(實驗前請先閱讀注意事項)提示:??第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇!??使用前將10X紅細胞裂解液RLB用DEPC處理水稀釋到1X。??操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巰基乙醇。此裂解液最好現用現

    全血RNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂

    全血RNA提取實驗

    全血RNA的提取可用于:(1)研究RNA干擾機制等;(2)用作反轉錄模板;(3)分子生物學其他研究。實驗方法原理紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快

    小量全血DNA提取方法

    1 RNAi 慢病毒介導)服務2 篩選穩定細胞系方法3DNA提取試劑盒4RNA提取試劑盒5PCR相關產品6DNA Marker 產品7TA克隆產品8蛋白研究產品 儲存事項: 1. 結合液CB或者抑制物去除液IR低溫時可能出現析出和沉淀,可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,恢復澄清透明后冷卻到室溫即可

    從全血和體液中提取基因組DNA的操作步驟

    提取DNA需要的儀器和試劑: ⑴ 1.5ml 離心管⑵ 移液管: 1000μl, 200μl, 40μl 各一支和移液管尖頭: 100-1000μl, 1-200μl 各一盒⑶ 微型濾柱(備用)⑷ 小型旋轉混合器一臺⑸ 小型離心機: 可放入1.5ml 離心管和2ml收集管.⑹ 恒溫水浴⑺ 電冰箱:

    血基因組DNA提取實驗——血基因組DNA-試劑盒提取法

    血基因組DNA提取可用于:(1)從凍全血、血漿、血清、骨髓、其他體液、淋巴細胞、培養細胞、病毒和線粒體中提取DNA;(2)用于后續測序、遺傳信息學等研究。實驗方法原理采用特殊的細胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)從抗凝全血中得到基因組DNA。實驗材料抗凝全血試劑、試劑盒血基因組DNA 試劑盒儀

    血基因組DNA提取實驗

    實驗方法原理 本試劑盒采用特殊的細胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)從抗凝全血中得到基因組DNA。適用于從凍全血、血漿、血清、骨髓、其他體液、淋巴細胞、培養細胞、病毒和線粒體中提取DNA。實驗材料 抗凝全血試劑、試劑盒 血基因組DNA 試劑盒儀器、耗材 96孔深孔板96圓孔板96孔DNA制備板

    血基因組DNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用特殊的細胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)從抗凝全血中得到基因組DNA。 實驗材料 抗凝全血

    血基因組DNA提取實驗——血基因組DNA大量試劑盒提取法

    實驗方法原理本試劑盒采用獨特的兩相分離技術,結合DNA 制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DN的目的。適合從5 ml 的抗凝人或哺乳動物全血,或500 ul 抗凝鳥類或兩棲動物全血中獲得多至250 ug 的基因組DNA。實驗材料抗凝全血試劑、試劑盒血基因組DNA大量試劑盒儀器、耗材DNA

    全血基因組DNA提取試劑盒(50次)使用說明

    全血基因組DNA提取試劑盒(50次)試劑盒組成:1.溶液A 25ml 5×STMT(用時按體積比1:4 用滅菌雙蒸水稀釋)2.溶液B 17ml3. 溶液C 0.6ml RNase A4.溶液D 44ml5. 溶液E 1.25ml Resin(用時充分混勻)6. 溶液F 30ml 洗液(用時加入40m

    昆蟲全基因組DNA的提取

    實驗概要利用改進的CTAB 法提取昆蟲全基因組DNA。主要試劑1. 蛋白酶K[美國Merck公司]2. 三羥甲基氨基甲烷(Tris)[美國Amresco公司]3. Taq DNA聚合酶及dNTP[NEB公司]4. 瓊脂糖及溴化乙錠(EB)[美國Amresco公司生產]5. 乙二胺四乙酸鈉(Na2ED

    全血基因組DNA提取試劑盒的作用原理是怎樣的

    保證核酸一級結構的完整性,核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子,其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度,其他核酸分子,如RNA,也應盡量去除。全血基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)作用原來具體是這樣的:獨特的結合液,蛋白酶K迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸

    禽類全血基因組DNA-提取試劑盒(50-次)使用說明

    禽類全血基因組DNA 提取試劑盒(50 次)試劑盒組成:溶液A: 30ml溶液B: 0.6ml RNase A溶液C: 50ml溶液D: 2ml Resin(用時充分混勻)溶液E: 30ml 洗液(注:用時加入35ml 無水酒精)溶液F: 10ml TE 緩沖液實驗步驟:1. 取300μl 抗凝血,

    如何選擇最佳的全血DNA、RNA提取方法?

    從全血中提取DNA和RNA應該說是最基本的工作了,提取的DNA和RNA質量的好壞直接影響了下游的實驗和分析,可供選擇的方法非常多,亂花漸欲迷人眼,如何選擇最適合的方法,成了很多人實驗開始前最難以抉擇的事情。我們從兩個方面,層層剝繭,分析最佳的實驗方法。 1、全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝

    關于全血的保存DNA提取pcr個人經驗

    做了好多DNA提取保存,吃了很多虧給大家點建議吧:(有疑問可以回帖,有時間我會回答如果我知道)。 血液保存: EDTA抗凝最好,肝素也可以不過經常會影響后續試驗,一般可以保存在-20和-80保存3-5年沒有問題——保存時間越長似乎dna提取越少,再長時間我也沒有試過,注意解凍一次大概損失20%左右(

    從全血中提取基因組DNA用到各試劑的作用

    全血基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)作用原來具體是這樣的:獨特的結合液/蛋白酶K迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶,然后基因組DNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,抑制物去除液和漂洗液將細胞代謝物,蛋白等雜質去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA

    哪些受血者不宜應用全血?

    (1)血容量正常的慢性貧血受血者。(2)低血容量已被糾正的急性貧血受血者。(3)貧血伴有心功能不全或心力衰竭的受血者。(4)年老體弱、嬰幼兒需輸血的受血者。(5)輸血或多次妊娠已產生白細胞或血小板凝集素(抗體)的受血者(6)因血漿蛋白過敏引起蕁麻疹反應,甚至重度過敏反應的受血者(7)可能實施造血干細

    核酸提取-基因組DNA的提取

    ?? DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象,因此DNA的提取也應是分子生物學實驗技術中的最重要、最基本的操作,如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本談不上進行分子生物學方面的實驗。在DNA提取過程中應做到1,根據不同研究需要,保證結構的相應完整性;2,盡

    全血錳的概述

      人體內含錳12-18mg。錳主要在腸道吸收,通過肝臟隨膽汁排入糞便,少量可由腸道再吸收。經尿排泄的錳尚不到總排出量的10%。骨骼中錳積蓄量約占全身總量43%。由于錳參與多種酶的組成和激活作用,既與蛋白質合成有關,又可改善動脈粥樣硬化者的脂質代謝。錳還能促進鐵吸收和利用,參與黏多糖合成(黏多糖是軟

    全血輸血的應用

    全血是指血液的全部成分,包括各種血細胞及血漿中各種成分,還有抗凝劑及保存液。全血有保存全血及新鮮全血之分,常用的是保存4±2攝氏度的全血。新鮮全血定義難以統一規定,要依輸血的目的而定,為了補充新鮮的紅細胞,可用保存5天的ACD全血或10天的CPD全血;如同時還要補充血小板或白細胞,則應分別用保存1天

    什么是新鮮全血?

    新鮮全血的新鮮度很難下定義,目前尚缺乏公認標準。目的不同,新鮮全血的含義就不一樣:輸血目的為了補充紅細胞,保存期內全血可視為新鮮血。例如,補充粒細胞,8小時之內的血視為新鮮血;補充血小板,12小時之內的血視為新鮮血;補充凝血因子,24小時之內的血視為新鮮血。

    為何全血并不全?

      1. 血液離開血循環,發生“保存損害”;  2. 保存液是針對紅細胞設計的,只對紅細胞有保存作用;  3. 血小板需要在22±2℃振蕩條件下保存,4±2℃保存有害;  4. 白細胞中的粒細胞是短命細胞,很難保存;  5. 凝血因子Ⅷ和Ⅴ不穩定,保存1-3天活性喪失50%.

    OPGEN全基因組圖譜應用系列——鞭蟲全基因組測序

    鞭蟲是一種常見的土壤傳播寄生蟲,地理分布廣,感染率高,寄生于人體盲腸,導致人體慢性感染,對人類危害巨大。鞭蟲的全基因組測序研究由著名的桑格研究院(Wellcome Trust Sanger Institute)完成,發表在世界頂級期刊《Nature Genetics》上。該研究通過對2種不同

    全血有哪些主要缺點?

      1. 大量輸全血可使循環超負荷,因為全血中的血漿可擴充血容量,所以血容量正常的病人輸血量過大或速度過快可發生急性肺水腫;  2. 由于全血中細胞碎片多,全血的血漿內乳酸、鈉、鉀、氨等成分含量高,故全血輸入越多,病人的代謝負擔越重;  3. 輸全血比任何血液成分更容易產生同種免疫,不良反應多,因為

    O-型全血是萬能血嗎?

    原則上,血液應該 ABO 同型輸注。除非在十分緊急而又缺乏 ABO 同型血液時(多見于戰場),可適量選擇 O 型紅細胞輸注。同型輸血的原因,是為了避免受血者血液中的抗體與輸注的血細胞上的抗原反應,而破壞紅細胞。雖然 O 型紅細胞上不存在 A 抗原和 B 抗原,但在 O 型全血的血漿中存在大量的抗 A

    基因組DNA的提取

    基因組DNA的提取概 述?  基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分

    基因組DNA的提取

    第一節 概 述DNA的提取通常用于構建文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中,可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部,

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