實驗方法原理 在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中,真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接,形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中的多聯體。構建在 λ 噬菌體中的文庫以具有感染性的重組噬菌體形式貯存和增殖。實驗材料 T4 噬菌體 DNA 連接酶牛小腸堿性磷酸酶Bam HⅠMboⅠXbaⅠ限制性內切核酸酶試劑、試劑盒 氯仿去磷酸化緩沖液乙醇苯酚氯仿SM醋酸鈉TE儀器、耗材 瓊脂糖凝膠脈沖場凝膠實驗步驟 一、材料1. 緩沖液與溶液氯仿10 X 去磷酸化緩沖液(CIP 緩沖液)乙醇苯酚: 氯仿(1:1, V/V)SM醋酸鈉(3 mol/L, pH 5.2)TE ( pH 8.0)2. 酶與緩沖液T4 噬菌體 DNA 連接酶牛小腸堿性磷酸酶(CIP)限制性內切核酸酶:Bam HⅠ,MboⅠ,XbaⅠ只切割黏粒載體而不切割基因組插入 DNA 的限制性內切核酸酶3. 凝膠0.5 X TBE 配......閱讀全文
基因組DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。 一、分離基因組DNA
基因組DNA文庫用途十分廣泛,如用于人類及動植物基因組學研究,基因表達調控研究,分析、分離特定的基因片段等。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為四大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。一、分離基因組DNA(gDNA) 毫無
基因組DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。一、分離基因組DNA(gDNA)
基因組 DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。 一、分離
基因組DNA文庫用途十分廣泛,如用于人類及動植物基因組學研究,基因表達調控研究,分析、分離特定的基因片段等。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為四大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。一、分離基因組DNA(gDNA) 毫無
基因組DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。 一、分離基因組DNA
BAC文庫的構建 實驗方法原理 BAC是一種裝載DNA大片段的克隆載體系統,用于人、動物和植物基因
BAC (Bacterial Artificial Chromosome,細菌人工染色體)文庫可用于:(1)全基因組測序;(2)構建物理圖譜、染色體步查;(3)基因篩選;(4)基因圖位克隆。實驗方法原理BAC是一種裝載DNA大片段的克隆載體系統,用于人、動物和植物基因組文庫構建。BAC具有插入片段較
實驗材料 大腸桿菌菌株 HB101 質粒 pSPL3 COS-7 細胞 載體 pBluescriptⅡ
1 基因芯片技術分離目的基因生物芯片是高密度固定在固相支持介質上的生物信息分子的微列陣。列陣中每個分子的序列及位置都是已知的,并按預先設定好的順序點陣。基因芯片是生物芯片的一種,其上固定的是核算類物質,主要用于DNA、RNA分析。分為DNA芯片和微點陣兩種。分離目的基因是是指從基因組中發現或找出某個
本方案以哺乳動物穿梭載體 pSPL3 為例,描述了外顯子擴增的方法,內容分為以下五個階段。階段 1: 文庫的構建; 階段 2: 電穿孔法將文庫轉染 COS-7 細胞; 階段 3:mRNA 的提取; 階段 4: 反轉錄 PCR; 階段 5: 克隆分析。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者: