通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ儀器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 轉子或相當型號離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0 )甘油（5% 和 40%，V/V ) 于 SM 中SM2. 酶和緩沖液胰 DNase Ⅰ (1 mg/ml)胰 RNase 于 TE 中（1 mg/ml，pH 7.6)3. 離心機和轉子Beckman SW41 或 SW28 轉子或相當型號，配有清亮的離心管（如 Beckman 超亮離心管）4. 載體和菌株λ 噬菌體顆粒懸浮液二、方法1. 在 Beckman SW41 聚碳酸酯離心管（或相應離心管）中制備甘油分級梯度（每管加 5 ml 噬菌體懸浮液）：(1) 取 3 ml 含 40% 甘油......閱讀全文
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒ED
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。 實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ儀器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 轉子或相當型號離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液E
通過CsCl－等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 CsCl 等密度梯度離心用于制備最高純度的感染性 λ 噬菌體顆粒，它沒有任何細菌核酸的污染。從這種噬菌體顆粒中提取的 DNA 可用作 DNA 測序的模板、亞克隆至質粒載體和產生用于原位雜交的探針。這種方法第二個優點是，由它所
通過CsCl－等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
CsCl 等密度梯度離心用于制備最高純度的感染性 λ 噬菌體顆粒，它沒有任何細菌核酸的污染。從這種噬菌體顆粒中提取的 DNA 可用作 DNA 測序的模板、亞克隆至質粒載體和產生用于原位雜交的探針。這種方法第二個優點是，由它所獲得的噬菌體原種是高度濃縮的（大于 1011?cfu/ml)，在 4℃ 保存
通過CsCl－等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 CsCl 等密度梯度離心用于制備最高純度的感染性 λ 噬菌體顆粒，它沒有任何細菌核酸的污染。從這種噬菌體顆粒中提取的 DNA 可用作 DNA 測序的模板、亞克隆至質粒載體和產生用于原位雜交的探針。這種方法第二個優點是，由它所獲得的噬菌體原種是高度濃縮的（大于 1011 cf
λ噬菌體臂的純化（通過蔗糖密度梯度離心）實驗
與插入型載體不同，置換型載體的基因組含有中部的填充片段，為了容納外源 DNA 片段，填充片段必須被去除。該過程一般被稱為“λ臂的制備”，包括用限制酶消化 λDNA 使兩臂與填充片段分開以及隨后的臂的純化。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理與插入型載體不同，置換型載體的基因組
λ噬菌體臂的純化（通過蔗糖密度梯度離心）實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 與插入型載體不同，置換型載體的基因組含有中部的填充片段，為了容納外源 DNA 片段，填充片段必須被去除。該過程一般被稱為“λ 臂的制備”，包括用限制酶消化 λDNA 使兩臂與填充片段分開以及隨后的臂的純化。
λ噬菌體臂的純化（通過蔗糖密度梯度離心）實驗
實驗方法原理 與插入型載體不同，置換型載體的基因組含有中部的填充片段，為了容納外源 DNA 片段，填充片段必須被去除。該過程一般被稱為“λ 臂的制備”，包括用限制酶消化 λDNA 使兩臂與填充片段分開以及隨后的臂的純化。實驗材料 λ 噬菌體 DNA試劑、試劑盒 EDTA乙醇正丁醇乙酸鈉蔗糖凝膠上樣緩
甘油梯度法染色實驗
實驗材料：染色質試劑、試劑盒：甘油、染色質、分離緩沖液溶液儀器、耗材：JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟：準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度
超速離心法純化病毒實驗——密度梯度離心
實驗方法原理病毒的密度與細胞碎片不同，用梯度制備儀制成適宜的介質梯度如蔗糖梯度或?CsCl?密度梯度，將病毒懸液加到密度梯度的上層，進行超速離心，離心管內病毒懸液中的病毒和細胞碎片隨其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯層中，吸出含有病毒的沉淀帶，即可得到相當純凈的病毒。實驗材料待純化的病毒試劑、
超速離心法純化病毒實驗——等密度梯度離心
實驗方法原理離心過程中?CsCl?隨離心力而下沉，形成連續梯度，上部密度小而下部密度大，離心管內病毒懸液中的病毒和細胞碎片隨其密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯層中實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒CsCl儀器、耗材離心機實驗步驟在每毫升病毒懸液中，加入?CsCl?約?1 g,?混勻，4℃以?40 0
蔗糖梯度純化法實驗
實驗材料：染色質粗品試劑、試劑盒：聚碳酸酯離心管儀器、耗材：Dounce 勻漿器實驗步驟：準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗
實驗方法原理 用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于與線狀 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。實驗材料 粗制質粒試劑、試劑盒 CsCl CsCl 再分帶溶液乙醇溴化乙錠 石蠟油儀器、耗材 皮下注射針頭折光儀一次性注射器實驗步驟 一、材料1.
噬菌體克隆的純化實驗
噬菌體是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的細菌病毒的總稱，作為病毒的一種，噬菌體具有病毒特有的一些特性：個體微小；不具有完整細胞結構；只含有單一核酸。噬菌體基因組含有許多個基因，但所有已知的噬菌體都是在細菌細胞中利用細菌的核糖體、蛋白質合成時所需的各種因子、各種氨基酸和能量產生系統來實現其自身
噬菌體克隆的純化實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 噬菌體 試劑、試劑盒
噬菌體克隆的純化實驗
實驗材料 噬菌體試劑、試劑盒 LB頂層瓊脂糖氯仿SMMgSO4儀器、耗材 培養箱牙簽硝酸纖維素膜實驗步驟 1. ?在直徑82 mm LB平極上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%頂層瓊脂糖，放置10 min。?2. ?通過放射自顯影膠片上的雜交斑點確定陽性噬斑在原平板上的位置，用牙簽輕輕插
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗（一）
用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于與線狀 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。連續梯度法實驗方法原理用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于與線狀 DN
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗（二）
實驗方法原理通過不連續或預先形成的氯化銫（CsCl）梯度離心，可在離心管中獲得含有不同濃度 CsCl 的溶液分層，樣品位于中層（三級梯度法）或底層（兩級梯度法）。實驗材料粗制質粒試劑、試劑盒CsCl溴化乙錠TE儀器、耗材皮下注射針頭折光儀一次性注射器實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液CsCl ( 固
染色體分離實驗——甘油梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒甘油 染色質分離緩沖液溶液儀器、耗材JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟1. 準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度沉降
分級式梯度的概念
中文名稱分級式梯度英文名稱stepwise gradient定 義密度或濃度的變化呈階梯式的不連續遞增。分級式梯度溶液用于離心分離、層析樣品洗脫等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
通過中空纖維洗濾純化納米顆粒
簡介相較于傳統的納米顆粒純化方法，如超速離心、攪拌室過濾、透析或者層析方法，中空纖維洗濾（中空纖維切向流過濾）是一種更加高效、快速的替代方法。中空纖維洗濾可以用于純化多種納米顆粒，包括脂質體、膠乳顆粒、磁珠以及納米管1,2。中空纖維洗濾是一種基于膜分離的技術，膜孔徑的大小決定了大分子或顆粒是被截留還
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA
連續梯度法 不連續梯度法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于與線狀 DNA 和閉環 DN
cDNA的篩選3
免疫學染色1.為了洗去頂層瓊脂上的殘余物和細胞碎片，將硝酸纖維素濾膜一次最多5張轉移放在搖床上的盤子（10×10cm）內，用25ml TBS室溫洗滌10 min 2次。2.然后濾膜用25ml封閉緩沖液（每張90mm直徑的濾膜至少15ml）于室溫溫育 30min，以封閉濾膜上的非特異性結合位點。不斷晃
染色體分離實驗——蔗糖梯度純化法
實驗材料染色質粗品試劑、試劑盒蔗糖分離緩沖液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品溶液輕輕
顆粒分級高速臥螺離心機工作原理
顆粒分級高速臥螺離心機用于兩種比重不同的固體顆粒的分離。分離液的比重大小在待分離的兩種固體顆粒比重之間，待分離的固體顆粒分散在分離液中。轉鼓和螺旋以差速同向高速旋轉，物料經進料管進入螺旋內筒，從進料口進入轉鼓。在離心力作用下，大比重固體顆粒沉積在轉鼓壁上形成沉渣層，小比重固體顆粒形成內層，分離液在沉
顆粒分級高速臥螺離心機工作原理
顆粒分級高速臥螺離心機用于兩種比重不同的固體顆粒的分離。分離液的比重大小在待分離的兩種固體顆粒比重之間，待分離的固體顆粒分散在分離液中。轉鼓和螺旋以差速同向高速旋轉，物料經進料管進入螺旋內筒，從進料口進入轉鼓。在離心力作用下，大比重固體顆粒沉積在轉鼓壁上形成沉渣層，小比重固體顆粒形成內層，分離液在沉
顆粒分級高速臥螺離心機工作原理
顆粒分級高速臥螺離心機用于兩種比重不同的固體顆粒的分離。分離液的比重大小在待分離的兩種固體顆粒比重之間，待分離的固體顆粒分散在分離液中。轉鼓和螺旋以差速同向高速旋轉，物料經進料管進入螺旋內筒，從進料口進入轉鼓。在離心力作用下，大比重固體顆粒沉積在轉鼓壁上形成沉渣層，小比重固體顆粒形成內層，分離液在沉
U系列小核糖核蛋白顆粒的純化實驗
剪接體 ( spliccosome ) 是真核生物中從初級轉錄物中切除內含子的催化單位。剪接體包含 U1、U2、U4/U6、U5 snRNP 等 4 種小核糖核蛋白顆粒（snRNP ) 和大量的非 snRNP 蛋白。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理剪接體 ( splicc
線粒體的分級分離實驗——高速離心法
實驗材料線粒體儀器、耗材離心機實驗步驟1. ?將裝有上清液的高速離心管，從裝有冰塊的燒杯中取出，配平后，以17 000 rpm 離心20分鐘，棄上清，留取沉淀物。2. ?加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化鈣液1 ml，用吸管吹打成懸液，以17 000 rpm 離心20分鐘。