腫瘤細胞的熒光免疫表型和FISH共分析實驗
實驗材料 正常鼠血清鼠單克隆抗地髙辛抗體鼠抗 FITC 抗體AMCA-親和素FITC-親和素生物素化山羊抗親和素抗體Cy3 標記的親和素Cy3 標記的山羊抗鼠抗體Cy3 標記的兔抗山羊抗體Cy3 標記的驢抗兔抗體Cy3 標記的兔抗鼠抗體 地高辛標記的山羊抗鼠抗FITC 標記的驢抗鼠抗體FITC 標記的山羊抗地高辛抗體緩沖液SSC試劑、試劑盒 單克隆鼠抗人抗體人 Cot-1 DNA人胎盤 DNA硫酸葡聚糖Sephadex 050 分離柱超聲破碎的鮭魚精子DNA70% 、85% 和 100% 乙醇橡皮泥去離子甲酰胺DAPI (4 6-二氨基-2-苯基吲哚）DABCO (2 2 2-三乙烯-14-二胺）實驗步驟 一、標本制備同時進行免疫表型和 FISH，可以使用細胞離心制片、涂片、印跡或冰凍切片。適當的操作和保護細胞完整是成功完成這部分實驗的關鍵。一般來說，新鮮制備的標本片應該晾干過夜 再轉入-20°C......閱讀全文
腫瘤細胞培養實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 培養液Hanks胰蛋白酶EDTA膠原酶儀器、耗材 培養瓶離心管實驗步驟 一、成纖維細胞排除法1. ?機械刮除法?是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲），或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為（1）標記鏡下
腫瘤細胞的生理特征
細胞周期失控，就像寄生在細胞內的微生物，不受正常生長調控系統的控制，能持續的分裂與增殖。 具有遷移性，細胞粘著和連接相關的成分（如ECM、CAM）發生變異或缺失，相關信號通路受阻，細胞失去與細胞間和細胞外基質間的聯結，易于從腫瘤上脫落。許多癌細胞具有變形運動能力，并且能產生酶類，使血管基底層和
腫瘤細胞的培養（三）
三、成纖維細胞排除法 1．機械刮除法： 是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲）、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為： （1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位； （2）刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸
腫瘤細胞的形態特征
癌細胞大小形態不一，通常比它的源細胞體積要大，生長速度快，核質比顯著高于正常細胞，可達1：1，正常的分化細胞核質比僅為1:4-6。核形態不一，并可出現巨核、雙核或多核現象。核內染色體呈非整倍態（aneuploidy），某些染色體缺失，而有些染色體數目增加。正常細胞染色體的不正常變化，會啟動細胞凋
細胞分化與腫瘤（一）
腫瘤是細胞在各種致瘤因素的作用下，基因發生改變，失去對其生長的正常調控，導致細胞異常增生。惡性腫瘤又稱為癌癥（cancer），是目前危害人類健康最嚴重的一類疾病。我國城市地區居民死因第一位為惡性腫瘤。腫瘤細胞在很多生物學特性上不同于正常細胞，也有別于修復性增生的細胞，具有明顯的去分化現象。一、腫瘤細
腫瘤細胞的培養（二）
二、培養方法 腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。 1．取材： 人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞
細胞分化與腫瘤（三）
（四）維甲酸對腫瘤的誘導分化作用維甲酸（retinoic acids，RA）又稱視黃酸或維生素A酸，是維生素A的衍生物。它由環己烯環、側鏈和極性基團三部分組成，由于極性基團及側鏈部分不同，維甲酸包括多種同分異構體，其中最重要的是13-順式維甲酸（13-cis-RA）、全反式維甲酸（ATRA）和9
腫瘤細胞培養方法
腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1、取材：人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區，取材時盡量避
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于：（1）研究腫瘤的發生機理；（2）研究生物學行為；（3）研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
細胞分化與腫瘤（二）
二、腫瘤的誘導分化腫瘤的誘導分化就是應用某些化學物質使不成熟的惡性細胞逆轉，向正常細胞分化。這些物質稱為分化誘導劑。在分化誘導劑的作用下，腫瘤細胞的形態特征、生長方式、生長速度和基因表達等表型均向正常細胞接近，甚至完全轉變為正常細胞，這種現象稱為誘導分化（induced differentiat
血流影響腫瘤細胞轉移
本報訊 科學家長期以來認為血流在癌癥轉移中起著重要作用。但是，在斑馬魚和人類中測試這種假說的研究證實，循環血流會影響腫瘤細胞在脈管系統中停滯并排出體內的位置，在那里它們可以形成轉移。 在近日發表于《細胞》雜志的一篇論文中，法國國家健康和醫學研究所（INSERM）研究人員發現，在斑馬魚胚胎模
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗 提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃
腫瘤細胞的培養（四）
四、提高腫瘤細胞培養存活率和生長率措施 根據人們的經驗，腫瘤細胞在體外不易培養，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后，常出現以下幾種情況： 完全無細胞游出或移動； 有細胞移動和游出，但無細胞增殖，細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代； 有細胞增殖，傳若干代后停止生長或衰退死亡
腫瘤細胞的培養方法
腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1．取材：人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區，取材時盡量避
腫瘤細胞的培養（一）
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。 一、組織培養腫瘤細胞生物學特性 腫瘤細胞與體
腫瘤細胞的主要構成
腫瘤組織由實質和間質兩部分構成，腫瘤實質是腫瘤細胞，是腫瘤的主要成分，具有組織來源特異性。腫瘤的間質起支持和營養腫瘤實質的作用，不具特異性，一般由結締組織和血管組成，有時還可有淋巴管。
原代腫瘤細胞的選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選...
原代腫瘤細胞的選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗飼養層技術取決于通過其他接觸抑制細胞形成的單層預防成纖維細胞的過度生長。 飼養層技術并不能選擇性抑制正常上皮細胞， W為正常表皮細胞和正常乳腺上皮都能在 匯合的伺養層上形成克隆。然而，神經膠質瘤研究的結果表明，在同種飼養層上選擇培養等同的正常細胞是
原代腫瘤細胞選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗
實驗方法原理在指數生長中期，用絲裂霉素C處理飼養層細胞，將細胞培養形成匯合的單層。通過膠原蛋白酶消化從活檢標本分離腫瘤細胞，或者用胰蛋白酶消化從原代培養物獲得腫瘤細胞，然后將腫瘤細胞接種到匯合的單層上（圖24.1）。上皮性腫瘤細胞可以在3周至3個月內形成克隆。纖維肉瘤和神經膠質瘤并不總是形成克隆，而
原代腫瘤細胞的選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在指數生長中期，用絲裂霉素C處理飼養層細胞，將細胞培養形成匯合的單層。通過膠原蛋白酶消化從活檢標本分離腫瘤細胞，或者用胰蛋白酶消化從原代培養物獲得腫瘤細胞，然后將腫瘤細胞接種到匯合的單層上（圖24.1）。上皮性腫瘤細胞可以在3
《Cell》:新型腫瘤細胞富集系統，讓循環腫瘤細胞無處可逃
在血流中對循環腫瘤細胞（CTC）進行計數可以預測癌癥患者的預后和存活率。 然而，CTC的稀有性和異質性使它們在作為生物標志物使用時產生巨大的困難。 最近的研究報道了癌癥患者中存在的新型循環非癌性腫瘤衍生細胞， 包括癌癥相關巨噬細胞，腫瘤 ?-內皮簇（TEC）和癌相關成纖維細胞（CAF）。目前的
新觀點|死亡腫瘤細胞或助腫瘤“卷土重來
上海仁濟醫院肝臟外科主任夏強教授團隊的研究提出了腫瘤免疫新觀點，死亡腫瘤細胞可能會協助腫瘤“卷土重來”。 中國專家提出腫瘤免疫新觀點：死亡腫瘤細胞或助腫瘤“卷土重來 腫瘤細胞的死亡是否意味著腫瘤生物學事件的終結？上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院15日披露，該院肝臟外科主任夏強教授團隊的研究提出
如何利用腫瘤組織細胞構建腫瘤類器官？
利用腫瘤組織細胞構建腫瘤類器官通常包括以下步驟：腫瘤組織獲取從患者手術切除的腫瘤組織、活檢樣本或轉移性腫瘤病灶中獲取新鮮的腫瘤組織。組織處理將腫瘤組織進行清洗，去除血液和壞死部分。使用酶消化法（如膠原酶、胰蛋白酶等）或機械解離法將組織分解成單個細胞或小細胞團。細胞篩選與培養通過細胞濾網過濾，去除未消
細胞生物基本方法：腫瘤細胞培養
腫瘤細胞培養特殊之處在于成纖維細胞的排除（成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長，致難以純化腫瘤組織）。有以下一些方法：1．機械刮除法2．反復帖壁法3．消化排除法4．膠原酶消化法?1）??機械刮除法1．標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位。2．刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸入
腫瘤相關巨噬細胞轉化為癌癥殺手，里應外合殺滅腫瘤
上皮腫瘤（如肺癌和胰腺癌的腫瘤）利用ανβ3分子獲得了針對標準抗癌療法的耐藥性，從而成為高轉移性得癌癥。在一篇發表在《Cancer Research》上的最新研究中，來自加州大學圣地亞哥分校（University of California San Diego，UCSD）醫學院的研究人員發現了一
《Cell》子刊揭示腫瘤干細胞如何驅動腫瘤發展
目前對于癌癥干細胞樣細胞（CSCs）如何與其更受限制的后代相互作用知之甚少。 在過去的十年中，越來越多的證據表明，某些腫瘤與其起源組織相似的譜系管控，這些譜系最頂端的細胞群由腫瘤干細胞樣細胞（CSCs）組成。致瘤過程的多種特征與組織正常發育和再生過程相似：CSCs的可塑性和異質性以及它們在特定
“金針”讓腫瘤細胞無處遁形
科技日報合肥4月11日電 記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉，該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊，在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得最新突破。相關研究成果日前發表在國際化學期刊《ACS納米》上，并已申請了國家發明專利。 腫瘤細胞不受控制生長和永生化需要高活性端粒酶的催
Cancer－Res：腫瘤細胞與癌癥？
腫瘤中的細胞并不都是一樣的，這些腫瘤細胞在生長和患者治療的整個階段會產生不同的遺傳突變，同時也會表現出不同的特性，這些差異就使得腫瘤非常難以對付，從而往往會產生因許多惡性腫瘤細胞而導致的腫瘤耐藥性的發生。近日，發表于國際雜志Cancer Research上的研究論文中，來自莫非特癌癥研究中心的研
“金針”讓腫瘤細胞無處遁形
記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉，該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊，在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得最新突破。相關研究成果日前發表在國際化學期刊《ACS納米》上，并已申請了國家發明專利。 腫瘤細胞不受控制生長和永生化需要高活性端粒酶的催化，研究人員以金納米顆粒為載體，
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血
JCB：FAK幫助腫瘤細胞越獄
癌細胞都是越獄的高手，現在加州大學Moores癌癥中心的科學家們揭示了它們的秘訣。研究顯示，一種促進腫瘤生長的關鍵蛋白，可以幫助癌細胞突破組織的囚禁。文章發表在Journal of Cell Biology雜志上。 腫瘤細胞形成之后會受到周圍組織的限制，只有進入血液或者淋巴管，才能轉移