實驗方法原理 從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 的標準方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介紹的“壓碎與浸泡”技術。洗脫下來的 DNA 通常不含有酶抑制物及對細胞轉染或微量注射有毒害的污染物。此方法所需時間長,但是工作量小。回收率少于30%~90%,視 DNA 片段大小而定。實驗材料 DNA 標準參照物DNA 樣品試劑、試劑盒 丙烯酰胺凝膠洗脫緩沖液氯仿乙醇凝膠載樣緩沖液酚氯仿乙酸鈉TE儀器、耗材 聚丙烯酰胺凝膠一次性使用的塑料層析柱轉輪或旋轉平臺紫外燈實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液丙烯酰胺凝膠洗脫緩沖液(0.5 mol/L 乙酸鎂,10 mmol/L 四水乙酸鎂,1 mmol/L EDTA (pH 8.0),0.1%(m/V)SDS(可選或不選))氯仿乙醇6X 凝膠載樣緩沖液酚:氯仿(1:1, V/V)乙酸鈉(3 mol/L, pH 5.2)TE (pH 8.0)2. 凝膠聚丙烯酰胺凝膠適宜......閱讀全文
實驗方法原理 從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 的標準方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介紹的“壓碎與浸泡”技術。洗脫下來的 DNA 通常不含有酶抑制物及
實驗方法原理 從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 的標準方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介紹的“壓碎與浸泡”技術。洗脫下來的 DNA 通常不含有酶抑制物及對細胞轉染或微量注射有毒害的污染物。此方法所需時間長,但是工作量小。回收率少于30%~90%,視 DNA 片段大小
試劑、試劑盒 溴化乙錠 洗脫緩沖液 儲存液 8mol LLiCl 溶液
試劑、試劑盒 溴化乙錠 洗脫緩沖液 儲存液 8mol LLiCl 溶液 異丙醇 70% 乙醇 1XTBE 緩沖液儀器、耗材 聚丙烯酰胺凝膠電泳槽 金屬小鏟 Whatman3 MM 濾紙 玻璃棒 表面皿 保鮮膜 透射紫外燈 刀片 Texta 筆 射線膠片實驗步驟 一材料與設備1) 溴化乙錠:10 mg
實驗方法原理 與瓊脂糖凝膠不同,聚丙烯酰胺凝膠灌制時不能加入溴化乙錠,因為此染料會影響丙烯酰胺的聚合。然而,電泳后可用溴化乙錠進行聚丙烯酰胺凝膠的染色。由于聚 丙烯酰胺會猝滅溴化
實驗方法原理 與瓊脂糖凝膠不同,聚丙烯酰胺凝膠灌制時不能加入溴化乙錠,因為此染料會影響丙烯酰胺的聚合。然而,電泳后可用溴化乙錠進行聚丙烯酰胺凝膠的染色。由于聚 丙烯酰胺會猝滅溴化乙錠的熒光,所以檢測 DNA 的靈敏度降低。電泳后也可用核酸染料SYBR Gold ( Molecular Probe
【實驗目的】 1.掌握盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理。 2.學習盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的操作技術,用于分離蛋白質。 【實驗原理】 聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺作為支持物的一種電泳形式。單體-丙烯酰胺和交聯劑-甲叉雙丙烯酰胺相互作用可形成聚
【實驗目的】 1.掌握盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理。 2.學習盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的操作技術,用于分離蛋白質。 【實驗原理】 聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺作為支持物的一種電泳形式。單體-丙烯酰胺和交聯劑-甲叉雙丙烯酰胺相互作用可形成聚丙烯酰胺,
1.儀器裝置通常由穩流電泳儀和圓盤或平板電泳槽組成。其電泳室有上、下兩槽,每個槽中都有固定的鉑電極,鉑電極經隔離電線接于電泳儀穩流擋上。2.試劑 (1)溶液A 取三羥甲基氨基甲烷36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L鹽酸溶液48ml,再加水溶解并稀釋至100ml,置棕色瓶內,在
polyacrylamide gel 跑的話一般160V2塊gel要4-5個小時,等溴酚藍指示劑快要出去的時候就可以染色了,如果有4度跑的話可以放到250-380V,1.5個小時就夠了,可以自己試著去摸索一下條件的。各個實驗室是有差異的。