DNA結合蛋白測定實驗
實驗材料 質粒DNA試劑、試劑盒 dNTPDNA聚合酶Klenow酶TETAE溴化乙錠TEMED過硫酸銨BSA儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. 用一種或多種限制性內切酶在100 μl 體積中消化10 μg 質粒人，產生25~100 bp 的含有結合位點的DNA片段，并至少有一端是5’突出的。2. 加100 μCi［α-32P］dNTP，4μl 5 mmol/l 3種NTP的混合液，2.5U Klenow酶。室溫溫育20 min。 3. 加4 μl 含有5 mmol/l 與被標記的相同的dNTP溶液，室溫溫育5 min。4. 沉淀DNA，溶解于TE中。 5. 加10×加樣緩沖液，用2%小型瓊脂凝膠（含溴化乙錠5 μg/ml）在TAE或TBE緩沖液中進行電泳。 6. 在長波透射紫外燈下觀察電泳帶。在帶的下游切一平行......閱讀全文
吲哚與牛血清白蛋白的結合測定實驗
實驗方法原理平衡滲透的原理可以通過經典的實驗來驗證。牛血清白蛋白（BSA）是一種比較廉價的大分子物質，可以大量獲得。因此可以用不太靈敏的方法來測定，而無需化學轉化或放射性同位素標記。結合常數 Kd 和每個白蛋白分子上的結合位點數 n 都能有效精確地獲得。然而由于這種實驗方法的原因可能引起誤差，實驗時
DNA的主要功能結合DNA的蛋白質
結構蛋白可與DNA結合，是非專一性DNA-蛋白質交互作用的常見例子。染色體中的結構蛋白與DNA組合成復合物，使DNA組織成緊密結實的染色質構造。對真核生物來說，染色質是由脫DNA與一種稱為組織蛋白的小型堿性蛋白質所組合而成；而原核生物體內的此種結構，則摻雜了多種類型的蛋白質。DNA可在組織蛋白的表面
編碼DNA結合蛋白的cDNA克隆的檢測、純化和鑒定實驗1
一個DNA位點識別探針被用來從表達文庫中檢測合適的重組克隆，并對 之進行純化，證明其中編碼了具有一定序列特異性的DNA結合域。這種策略排除了為 分離其基因而對序列特異性DNA結合蛋白進行純化的過程；只需要一個合適的構建于 λgtll載體中的cDNA文庫和一個DNA識別位點的探針。用位點識別DNA篩選
單鏈DNA結合蛋白的基本內容
單鏈結合蛋白（SSB，single strand DNA-binding protein）：結合于螺旋酶沿復制叉方向向前推進產生的單鏈區，防止新形成的單鏈DNA重新配對形成雙鏈DNA或被核酸酶降解的蛋白質。 螺旋酶沿復制叉方向向前推進產生了一段單鏈區，但是這種單鏈DNA不會長久存在，會很快重新
分子遺傳學詞匯單鏈DNA結合蛋白
中文名稱：單鏈DNA結合蛋白外文名稱：Single-stranded DNA-binding protein定義：單鏈DNA結合蛋白（Single-stranded DNA-binding protein，縮寫SSB或SSBP）又稱單鏈結合蛋白，是專門負責與DNA單鏈區域結合的一種蛋白質，為DNA復
結合DNA的酶
核酸酶和連接酶：核酸酶是能夠切割DNA鏈的酶，因為它們催化磷酸二酯鍵的水解。從位于DNA鏈末端的核苷酸開始水解DNA的核酸酶稱為核酸外切酶。另一方面，直接切入DNA鏈的那些是內切核酸酶。分子生物學中使用最廣泛的核酸酶，稱為限制性內切酶，以切割特定序列的DNA。在自然界中，這種酶通過在進入細菌細胞時消
微量熱法測定血漿蛋白結合率
微量熱法是近年來發展起來的一種研究生物熱化學與生化過程動力學的重要方法，該法對反應體系的溶劑性質、光譜性質和電學性質等沒有任何限制條件，在測定中也不需添加任何試劑，不會干擾生物體系的正常活動與代謝，已被先后用于一些抗腫瘤藥物、生物染料、藥物小分子與DNA或蛋白質的相互作用。
血清結合珠蛋白（Hp）的測定
（1）原理： 在待測血清中加入一定量的血紅蛋白液，使之與待測血清中的結合珠蛋白（Hp）形成Hp-Hb復合物。通過電泳法將結合的Hp-Hb復合物與未結合的Hb分開，測定Hp-Hb復合物的量，從而得到血清中結合珠蛋白的含量。 參考值：0.8～2.7g/L. （2）臨床意義： 增高見于妊娠、慢性感染、惡
血清結合珠蛋白測定的意義
1. 血清結合珠蛋白降低見于： （1）各種溶血性貧血，包括血管內或血管外溶血； （2）肝細胞損害、傳染性單核細胞增多癥、先天性無結合珠蛋白血癥等醫學教|育網搜集整理。 2. 血清結合珠蛋白增高見于感染、組織損傷、肝外阻塞性黃疸、惡性腫瘤等。
什么是非特異性的DNA結合蛋白
為DNA蛋白質之一種，是與單鏈DNA有強的親和性，與DNA復制、遺傳的重組等DNA代謝有關的蛋白質。也稱螺旋不穩定蛋白質（helix destabili－zing protein），又稱解DNA旋卷蛋白質（DNAuntwisting protein）。此蛋白質與單鏈DNA協同（cooperative
菌落的裂解和DNA與濾膜的結合實驗
實驗方法原理 本方案介紹如何從攜帶重組質粒的克隆中釋放出 DNA 并將其固定于硝酸纖維濾膜或尼龍膜的方法，這一方法最初由 Grunstein 和 Hogness 使用。實驗材料 帶有 E.coli 轉化子克隆的濾膜試劑、試劑盒 變性液中和液SDS (10% m V)2X SSPE儀器、耗材 玻璃或塑
菌落的裂解和DNA與濾膜的結合實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案介紹如何從攜帶重組質粒的克隆中釋放出 DNA 并將其固定于硝酸纖維濾膜或尼龍膜的方法，這一方法最初由 Grunstein 和 Hogness 使用。 實驗材料
菌落的裂解和DNA與濾膜的結合實驗
本方案介紹如何從攜帶重組質粒的克隆中釋放出 DNA 并將其固定于硝酸纖維濾膜或尼龍膜的方法，這一方法最初由 Grunstein 和 Hogness 使用。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理本方案介紹如何從攜帶重組質粒的克隆中釋放出 DNA 并將其固定于硝酸纖維濾膜或尼龍膜的
免疫共沉淀確定結合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養基中生長的適宜細胞株 試劑、試劑盒 乙腈 考馬斯亮藍 R-250 EBC 裂解緩沖液
免疫共沉淀確定結合蛋白實驗
實驗材料 培養基中生長的適宜細胞株試劑、試劑盒 乙腈考馬斯亮藍 R-250EBC 裂解緩沖液NETN磷酸鹽緩沖溶液SDS 凝膠加樣緩沖液三氟乙酸胰蛋白酶胰蛋白酶消化緩沖液沉淀靶蛋白的抗體對照抗體不連續的 SDS-PAGE 梯度膠儀器、耗材 沸水浴蛋白質 A-Sepharose平板搖臺實驗步驟 材料緩
免疫共沉淀確定結合蛋白實驗
當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間結合保持下來。這一亊實可被用于檢測和確定生理條件下相關的蛋白質-蛋白質間相互作用。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料培養基中生長的適宜細胞株試劑、試劑盒乙腈考馬斯亮藍
脫氧核糖核酸DNA結合DNA的蛋白質的介紹
結構蛋白可與DNA結合，是非專一性DNA-蛋白質交互作用的常見例子。染色體中的結構蛋白與DNA組合成復合物，使DNA組織成緊密結實的染色質構造。對真核生物來說，染色質是由脫DNA與一種稱為組織蛋白的小型堿性蛋白質所組合而成；而原核生物體內的此種結構，則摻雜了多種類型的蛋白質。 DNA可在組織蛋
清結合珠蛋白測定的注意事項
檢查前 (1) 抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物，避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 (2) 體檢前一天的晚八時以后，應開始禁食12小時，以免影響檢測結果。 (3) 抽血時應放松心情，避免因恐懼造成血管的收縮，增加采血的困難。 檢查后 (1) 抽血后，需在針孔處進行局
血清結合珠蛋白（Hp）測定的原理
（1）原理：在待測血清中加入一定量的血紅蛋白（Hb）液，使之與待測血清中的結合珠蛋白（Hp）形成Hp-Hb復合物。通過電泳法將結合的Hp-Hb復合物與未結合的Hb分開，測定Hp-Hb復合物的量，從而得到血清中結合珠蛋白的含量。
概述超濾法的測定血漿蛋白結合率
超濾法與平衡透析法相似，也是研究蛋白質與小分子結合作用的常用方法。該方法是在壓力差的驅動下，藥物分子擴散透過半透膜。超濾法的最大優點是實現血漿中游離小分子的快速分離、用時短，與平衡透析法相比，大大提高了分離速率。但該方法也同樣存在Gibbs-Donna效應、非特異性的透析設備表面的藥物吸附效應以
血清甲狀腺素結合球蛋白(TBG)測定
[正常參考值]15-34mg/L。[臨床意義]甲狀腺素結合球蛋白(TBG)是T3、T4在血循環中主要的血漿結合蛋白，測定血清總T3、T4的同時測定血清TBG，可進一步提高甲狀腺疾病的診斷符合率。甲狀腺機能亢進時血清TBG水平明顯低于正常，并隨著藥物治療后病情的緩解，可逐漸上升至正常水平。甲狀腺功能低
微透析法測定血漿蛋白結合率
微透析技術是一種活體細胞外液的生化物質采樣分析技術。因其獨有的微創性和取樣的連續性，現已被廣泛應用于腦組織各種病理生理現象的探索性實驗、神經生物化學的檢測和藥物代謝研究 。微透析法用于藥物血漿蛋白結合率測定，基于藥物與大分子蛋白結合后不能穿透具有一定相對分子質量截留值的微透析的半透膜，而游離藥物
TATA結合蛋白
TBP用β-折疊結合到DNA雙螺旋的小溝上，能使TATAbox彎曲80°。主要結合在A、T堿基上，因為這樣有利于扭曲使小溝開放。
血清總膽紅素和結合膽紅素測定實驗
實驗步驟一、實驗試劑；1. 咖啡因一蘋果酸鈉試劑，稱取無水醋酸鈉41.0g（CH3COONa·3H2O6 3.0g）苯甲酸鈉38.0g，乙二胺四乙酸二鈉（EDTA Na2）0.5g，溶于500ml蒸餾水中，再加入咖啡因25.0g攪拌使溶解（加入咖啡因后不發生加熱溶解），用蒸餾水補足1升，混勻
血清總膽紅素和結合膽紅素測定實驗
實驗步驟一、實驗試劑；1. 咖啡因一蘋果酸鈉試劑，稱取無水醋酸鈉41.0g（CH3COONa·3H2O6 3.0g）苯甲酸鈉38.0g，乙二胺四乙酸二鈉（EDTA Na2）0.5g，溶于500ml蒸餾水中，再加入咖啡因25.0g攪拌使溶解（加入咖啡因后不發生加熱溶解），用蒸餾水補足1升，混勻，用濾紙
蛋白質與免疫親和介質結合實驗
儀器、耗材SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠實驗步驟材料與設備SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠（10%)操作程序1) 將溶解、稀釋的 AMS 沉淀物和洗過的免疫親和介質混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取樣 100-ul。2) 立即離心樣品，留上清，供 SDS-PAGE
蛋白質與免疫親和介質結合實驗
儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠 實驗步驟 材料與設備 SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠（10%) 操作程序 1) 將溶解、稀釋的 AMS 沉淀物和洗過的免疫親和介質混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取
蛋白質與免疫親和介質結合實驗
材料與設備SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠（10%)操作程序1) 將溶解、稀釋的 AMS 沉淀物和洗過的免疫親和介質混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取樣 100-ul。2) 立即離心樣品，留上清，供 SDS-PAGE 電泳分析，測
DNA核酸濃度的測定實驗
實驗方法原理 構成核酸的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵，使核苷核和核酸在紫外線光具有特征性的吸收光譜，最大吸收峰為260nm。窄光帶紫外分光光度計，長260nm．，比色杯光徑1cm，1個吸光度值（1A）相當于50ug/ml雙螺DNA，40ug/m1單螺旋DNA或RNA），20ug/ml寡核苷酸實驗材料
DNA核酸濃度的測定實驗
DNA核酸濃度的定量實驗可以用于（1）對純化的PCR產物進行濃度測定；（2）對純化的酶切產物進行濃度測定；（3）對提取的質粒進行濃度測定。實驗方法原理寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA可以定量溶于緩沖液，構成核酸的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵，使核苷核和核酸在紫外線光具有特征性的吸收光譜，最大吸收