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實驗材料 DNA樣品試劑、試劑盒 瓊脂糖 電泳緩沖液溴化乙錠 上樣緩沖液儀器、耗材 電泳儀電泳漕 透射紫外燈 膠帶紙 紫外成像儀......閱讀全文
分子生物學產品常見問題分析問題原因解決辦法DNA完全沒有被內切酶切割1) 內切酶失活標準底物檢測酶活性2) DNA不純，含有SDS，酚，EDTA等內切酶抑制因子將DNA過柱純化，乙醇沉淀DNA3) 條件不適（試劑、溫度）檢查反應系統是否最佳4) DNA酶切位點上的堿基被甲基化換用對DNA甲基化不敏感
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
酶切基礎知識DNA酶切一般分為質粒直接酶切和PCR產物酶切第一節 DNA酶切及凝膠電泳 一.DNA的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定 DNA、RNA 分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用 DNA 分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA 分
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定 DNA、RNA 分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用 DNA 分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA
實驗原理1、DNA的限制性酶切限制性內切酶特異性地結合于一段被稱為限制酶識別序列的特殊DNA序列之內或其附近的特異位點上，并在此處切割雙鏈DNA。它可分為3類。I類和III類限制酶在同一蛋白質分子中兼有修飾（甲基化）作用和依賴ATP的限制（切割）活性（雙功能酶），II類修飾-限制系統是由兩種酶分子組
第一節 概 述 一. DNA的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上，并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位
一、DNA的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾（甲基化）作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位點不遠處的DNA，
分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術 分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，
電泳法 實驗方法原理 DNA瓊脂糖凝膠電泳的基本原理是利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷
一. DNA的限制性內切酶酶切分析限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位點不遠處的DNA,而Ⅲ類酶
瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度離心法）所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DN
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與
DNA電泳可用于：（1）分離不同大小的DNA片段；（2）鑒定目的DNA片段；（3）純化和回收DNA片段。實驗方法原理DNA瓊脂糖凝膠電泳的基本原理是利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。電荷效應是指DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電，在電場中向正極移動，且相同數量的雙鏈
實驗原理核酸分子雜交技術是分子生物學領域中最常用的具體方法之一。其基本原理是：具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下，可按堿基互補的原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性，綜合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果，便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進一
DNA瓊脂糖凝膠電泳 實驗方法原理 利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。
分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧
準備干凈的配膠板和電泳槽 注意 DNA 酶污染的儀器可能會降解 DNA ，造成條帶信號弱、模糊甚至缺失的現象 選擇電泳方法 一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以；如果需要分辨率高的電泳，特別是
DNA電泳可用于：（1）分離不同大小的DNA片段；（2）鑒定目的DNA片段；（3）純化和回收DNA片段。實驗方法原理利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。電荷效應是指DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電，在電場中向正極移動，且相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷，能以
來自賓夕法尼亞州費城杰佛遜醫學院(Jefferson Medical College）外科系，以及Kimmel腫瘤中心（Kimmel Cancer Center）的研究人員申請到了一項新專利，這項專利也許未來某天會成為DNA分析過程中的關鍵技術，而且這一發現也可以應用于多個領域，比如法醫鑒定，克隆或
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術，并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題。【實驗原理】DNA 分子有線狀的，還有一些非線狀的，如復制叉和重組DNA 結構。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/中性
一、引言 在許多的細胞生命活動中，例如DNA復制、mRNA轉錄與修飾以及病毒的感染等都涉及到DNA與蛋白質之間的相互作用的問題。 重組DNA技術的發展，人們已分離到了許多重要的基因。現在的關鍵問題是需要揭示環境因子及發育信號究竟是如何控制基因的轉錄活性。為此需要： a、鑒定分析
試劑、試劑盒 乙酸銨 ATP 乙醇 甘油 蒸餾水 IPTG Mg
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術,并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題.【實驗原理】DNA 分子有線狀的,還有一些非線狀的,如復制叉和重組DNA 結構.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/
三、線粒體膜勢能的檢測 線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用，多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡，而線粒體跨膜電位DYmt的下降，被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件，它發生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA斷裂）出現之前，一旦線粒體DYmt崩潰，則細胞凋亡不可逆
一、引言在許多的細胞生命活動中，例如DNA復制、mRNA轉錄與修飾以及病毒的感染等都涉及到DNA與蛋白質之間的相互作用的問題。重組DNA技術的發展，人們已分離到了許多重要的基因。現在的關鍵問題是需要揭示環境因子及發育信號究竟是如何控制基因的轉錄活性。為此需要：a、鑒定分析參與基因表達調控的DNA元件
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定 DNA、RNA 分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用 DNA 分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA 分
下面的方案描述了鳥槍法測序的起始步驟，從靶 DNA 的剪切到用 M13 噬菌體載體構建 DNA 片段文庫，也包括斷裂靶 DNA 的兩種方法--超聲法和噴霧法，以及用 DNA 聚合酶修復片段末端的技術要點。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。試劑、
本實驗采取堿裂解法的方法來提取質粒 ，之后經瓊脂糖凝膠電泳來檢測DNA。質粒DNA 的提取與鑒定(一)堿裂解法提取質粒[實驗原理]堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀質粒DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們。在pH值介于12.0~12.5這個狹窄的范圍內,線性的DNA雙螺旋結構解開而被變