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  • 細胞傳代實驗

    實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640雙抗胰蛋白酶EDTANHClNaHCO3儀器、耗材 凈化工作臺離心機恒溫水浴箱冰箱倒置相差顯微鏡培養箱吸管玻璃瓶培養瓶廢液缸吸頭槍頭膠塞離心管量加樣槍 紅血球計數板實驗步驟 1. 貼壁細胞的消化法傳代:(1)吸除或倒掉瓶內舊培養液。(2)D-Hanks液洗2~3次。 (3)向瓶內加入適量消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使消化液流遍所有細胞表面。(4)然后吸掉或倒掉消化液后再加適量新的消化液,輕輕搖動再倒掉大部分消化液,僅留少許進行消化(也可不采用上述步驟直接加消化液進行消化)。 (5)消化最好在37℃或室溫25......閱讀全文

    細胞傳代實驗

    細胞培養技術 消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長

    細胞傳代實驗

    細胞培養技術 消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長

    細胞傳代實驗

    實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640雙抗胰蛋白酶EDTANHCl

    細胞技術專題:細胞傳代實驗

    根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代

    傳代細胞培養實驗

    實驗方法原理當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒,如果不及時的減少細胞密度,細胞將逐漸衰老死亡。因此需要將培養物按照比例重新接種到新的培養器皿(瓶)內進行

    傳代細胞培養實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒,如果不及時的減少細胞密度,細胞將逐漸衰老死亡

    細胞傳代實驗_消化法

    實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞,用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液:把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精

    傳代細胞培養實驗

    實驗方法原理 當初代培養成功,細胞生長增殖形成單層細胞后,進而擴展匯合,占滿一切空間,此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代,細胞會因增殖過度,培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液

    細胞轉染實驗的實驗步驟細胞傳代

    (1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,觀察到細

    細胞傳代實驗——細胞培養技術

    細胞傳代實驗可用于:(1)醫學研究;(2)提供細胞種。(3)進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、

    細胞傳代培養實驗

    ?體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。二氧化碳培養箱是通過在培養箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環境,培養箱要求穩定的溫度(37°C)、穩定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)

    細胞傳代

    實驗概要去除死細胞和生長狀況不佳的細胞,獲得下一代細胞實驗原理游離期:細胞接種后在培養液中呈懸浮狀態,細胞質回縮,胞體呈圓球形。貼壁期:細胞附著于底物上,游離期結束。血清中有促使細胞貼壁的冷析球蛋白和纖粘素、膠原等糖蛋白,這些帶正電荷的糖蛋白的促貼壁因子吸附于底物,懸浮細胞再與吸附因子附著。潛伏期:

    細胞的傳代培養實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭,將培養的細胞分散,從容器中取出,以1:2

    細胞的傳代培養實驗

    細胞的傳代培養實驗可以用于:(1)擴增細胞數量;(2)擴大細胞培養。內容來源:中國醫科大學實驗指導手冊。實驗方法原理體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭

    細胞的傳代培養實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭,將培養的細胞分散,從容器中取出,以1:2

    懸浮細胞傳代

    實驗方法原理從懸浮細胞培養物中吸取樣品,細胞計數,接種適量的懸浮細胞至新培養瓶的新鮮培養基中,使細胞濃度與開始培養時一致。實驗材料起始培養物儀器、耗材生長培養基吸管離心管培養瓶攪拌瓶移液器吸耳球吸水紙巾吸管桶抗乙醇記號筆血細胞計數板實驗步驟1. 準備好超凈臺,將試劑及材料放于超凈臺上準備開始實驗。2

    懸浮細胞傳代

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 從懸浮細胞培養物中吸取樣品,細胞計數,接種適量的懸浮細胞至新培養瓶的新鮮培養基中,使細胞濃度與開始培養時一致。 實驗材料 起始培養物

    細胞轉染實驗的實驗步驟第二次細胞傳代

    1) 在轉染后24小時,觀察實驗結果并記錄綠色熒光蛋白表達情況。2) 再次進行細胞傳代,按照免疫染色合適的密度0.8X105個細胞/35mm培養皿將細胞重新放入培養皿中。3) 在正常條件下培養24小時后按照染色要求條件固定。

    細胞傳代培養的實驗原理介紹

      一、原理  細胞在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。  傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。為了保持細胞正常的二倍體核型,

    傳代細胞的介紹

      幼年動物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細胞較易培養,而神經細胞則較難培養。原代細胞基礎上通過胰酶等物質消化后繼續用于細胞培養的細胞,它與原代細胞具有相同核型。這類細胞在體外可以無限制分裂。

    傳代細胞的種類

      按照常規的組織學分類方法,脊椎動物和人體細胞類型約有200余種。  這些細胞在人體中呈現有序的空間分布。  細胞是人體的結構和功能單位。共約有40萬--60萬億個,細胞的平均直徑在10--20微米之間。  除成熟的紅血球外,所有細胞都有一個細胞核,是調節細胞作用的中心。  最大的是成熟的卵細胞,

    原代細胞傳代技術

    一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時,棄去消化液,加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打

    傳代細胞的概述

      傳代細胞是適應在體外培養條件下持續傳代培養的細胞。例如幼年動物的腎、肺等組織的細胞是比較容易培養的,而神經細胞非常難培養了。幼年動物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細胞較易培養,而神經細胞則較難培養。原代細胞基礎上通過胰酶等物質消化后繼續用于細胞培養的細胞,它與原代細胞具有相同核型。

    細胞培養傳代培養的實驗原理

    傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行,每一步都需要認真仔細的無菌操作。

    細胞培養傳代培養的實驗步驟

    實驗步驟1.入無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態,確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3.超凈臺臺面應整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉超凈臺的紫外燈,打開抽風機清潔空氣,除去

    病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法

    實驗方法原理從人及動物某些組織,特別是腫瘤組織,經多次傳代可建立傳代細胞系,這種細胞能無限地傳代,某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣,可用作病毒的分離鑒定,如HeLa 細胞,Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞,HeLa 細胞來自子宮頸癌,Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上

    單層細胞的傳代

    實驗方法原理去除培養基,加人胰蛋白酶短暫作用,孵育,以培養基分散細胞,計數,稀釋并再接種。實驗材料A549細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?WI-38 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

    單層細胞的傳代

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 去除培養基,加人胰蛋白酶短暫作用,孵育,以培養基分散細胞,計數,稀釋并再接種。 實驗材料 A549細胞 WI-38

    細胞傳代培養

    實驗概要? ? 細胞生長至高密度時,即須分殖至新的培養瓶中,一般稀釋比例為1:3 至1:6,依細胞種類而異。實驗材料? ? 無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca /Mg free, D-PBS,GibcoBRL 21600-010)??

    單層細胞的傳代

    實驗方法原理 去除培養基,加人胰蛋白酶短暫作用,孵育,以培養基分散細胞,計數,稀釋并再接種。實驗材料 A549細胞WI-38MRC-5胰蛋白酶D-PBS試劑、試劑盒 70%乙醇噴壺儀器、耗材 生長培養基吸管離心管培養瓶移液器吸耳球吸水紙巾吸管桶抗乙醇記號筆血細胞計數板實驗步驟 1. 準備超凈工作臺,

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