低豐度核酸反轉錄及擴增實驗
實驗材料 核酸試劑、試劑盒 dNTPMnCl2MgCl2BSArTth DNA聚合酶儀器、耗材 水浴鍋培養箱實驗步驟 1. 用過氧化物酶，蛋白酶K和DNA酶預處理載玻片。2. 配置如下一步反應體系（總體積100 μl）（1）0.5 μl 100 μmol/l 正向引物（終濃度0.5 μmol/l）（2）0.5 μl 100 μmol/l 反向引物（終濃度0.5 μmol/l）（3）6 μl 3 mmol/l 4dNTP混合物（終濃度0.12 mmol/l）（4）2 μl 10 mmol/l MnCl2（終濃度0.2 mmol/l）（5）10 μl 25 mmol/l MgCl2（終濃度2.5 mmol/l）（6）2 μl 10×rTth 轉錄緩沖液（終濃度0.2×）（7）8 μl 10×螯合緩沖液（終濃度0.8×）（8）10 μl 1.7 mg/ml BSA（終濃度0.17 mg/ml）（9）2 μl 2......閱讀全文
低豐度核酸反轉錄及擴增實驗
實驗材料 核酸試劑、試劑盒 dNTPMnCl2MgCl2BSArTth DNA聚合酶儀器、耗材 水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?用過氧化物酶，蛋白酶K和DNA酶預處理載玻片。2. ?配置如下一步反應體系（總體積100 μl）（1）0.5 μl 100 μmol/l 正向引物（終濃度0.5 μmol/l
低豐度核酸反轉錄及擴增實驗——一步法
實驗材料核酸試劑、試劑盒dNTPMnCl2MgCl2BSArTth DNA聚合酶儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟1. ?用過氧化物酶，蛋白酶K和DNA酶預處理載玻片。2. ?配置如下一步反應體系（總體積100 μl）（1）0.5 μl 100 μmol/l 正向引物（終濃度0.5 μmol/l）（2）
低豐度核酸定量試劑盒介紹
從不同的生物或臨床樣本中可以提取的DNA或RNA數量差異很大。例如，雖然少量的DNA或RNA可以很容易地從過量的組織和細胞中純化（例如從幾毫克的組織中），但許多液體活檢樣本可能會產生極少量的DNA或RNA。事實上，每100μL的尿液或血漿等樣品可能產生1-100 ng或更少的DNA或RNA。測得
核酸擴增—轉錄介導的擴增技術(TMA)
TMA是一種利用RNA聚合酶和逆轉錄酶在約42℃等溫條件下來擴增RNA或DNA的技術，其原理是帶有T7 RNA聚合酶識別的啟動子序列的啟動子引物與模板退火經反轉錄形成RNA-DNA雜交分子，被反轉錄酶的RNase H活性水解形成單鏈RNA，然后與引物2退火，通過反轉錄合成雙鏈DNA，在T7 RN
探索低豐度蛋白質
生物樣品中由于高豐度蛋白質（例如，血清或血漿中的白蛋白或免疫球蛋白）的存在，而會使低豐度蛋白質的檢測變得極具挑戰性。ProteoMiner ?低豐度蛋白富集系統是一種新型的樣品制備手段，它能極為有效地減少復雜生物樣品中蛋白濃度的動態范圍。ProteoMiner 系統： ? 采用了組合的六肽文庫方法，
低豐度靶標染色神器：TSA與PSA的使用方法
今天，百螢為大家帶來的是用于細胞和組織中低豐度靶標的高分辨率成像技術。TSA/PSA是一種成熟的細胞信號放大技術，當TSA/PSA與我們光穩定性、水溶性卓越的iFluor染料結合后，產生的熒光信號具有比傳統免疫組織化學、免疫細胞化學和免疫熒光方法產生的信號更高的精確度和靈敏度。PSA是美國AAT B
元素豐度組成
（1）克拉克值：是地殼中元素的重量百分數的豐度單位。（2）區域克拉克值：是指地殼不同構造單元中元素的豐度值，如克拉通地殼元素豐度值。（3）豐度系數?[1]??：是指某一自然體的元素豐度與另一個可作為背景的自然體的元素豐度的比值。例：以地球豐度為背境，則地殼中該元素的豐度系數定義為：K=地殼豐度/地球
豐度怎么算
豐度，是指一種化學元素在某個自然體中的重量占這個自然體總重量的相對份額（如百分數）。豐度表示方法主要分為重量豐度、原子豐度和相對豐度。絕對豐度：指某一種同位素在所有穩定同位素總量中的相對份額，常以該同位素與1H(取1H=1012)或28Si(28Si=106)的比值表示。這種豐度一般是由太陽光譜和隕
核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術，采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中，該探針被摻入到雙鏈擴增產物中，由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開，從而釋放熒光，用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率，耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內
核酸擴增—多重PCR
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術，是在同一PCR體系中加入多對特異性引物，一次擴增多個DNA片斷，實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本，減少了工作量，提高了檢測效率，并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯，檢出率低等問題。淋病患者往往
豐度的發現歷史
自從1889年F.W.克拉克發表元素在地殼中的平均含量的資料以來，人們已經積累了大量有關隕石、太陽、恒星、星云等各種天體中元素及其同位素分布的資料。1937年，戈爾德施米特首次繪制出太陽系的元素豐度曲線。1956年，修斯和尤里根據地球、隕石和太陽的資料繪制出更詳細、更準確的元素豐度曲線。1957年，
豐度的表示法
重量豐度重量豐度??：以重量單位表示的元素豐度。重量百分數（wt%）用于常量元素克/噸（g/t）或ppm用于微量元素毫克/噸（mg/t）或ppb常用于超微量元素微克/噸（μg/t）或pptPPm：(partsper million，10-6）；PPb：(partsper billion，10-9）；
核酸擴增—環介導的等溫擴增法
2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術，即環介導等溫擴增技術，英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了
數字PCR在低豐度DNA模板分子的精確定量的應用
由于絕大部分微液滴中只含單個或不含模板分子，使得低豐度DNA模板分子的擴增不受高豐度模板分子擴增的競爭抑制：與此同時，樣品中可能存在的抑制劑也在分配到微液滴的過程中進行了相對稀釋，作用于單個微液滴內模板擴增的抑制劑數量大幅降低，從而提高PCR擴增對抑制劑的耐受程度，因此可應用于諸多臨床樣品（如血液、
安捷倫推出XF分析新方案－助力低豐度免疫細胞代謝分析
2021年2月17日，北京——安捷倫科技公司（紐約證交所：A）今日推出專為安捷倫Seahorse XF HS Mini分析儀設計的安捷倫Seahorse XF HS迷你板，可用于提高免疫細胞代謝分析。 免疫學和疾病研究人員越來越多地使用稀有的體外基因工程細胞來建立更好的疾病模型。然而，此類細胞
史無前例!Western成像技術最新突破,讓低豐度蛋白無處可藏
????? 2019年底，一項全新的Western blot成像技術—e-BLOT接觸式成像，在中國的上海醫谷創新面世。這項技術完美解決了傳統Western blot 成像儀器的靈敏度不夠、定量范圍窄、成像時間太長以及占地面積太大的問題；相對于冷CCD成像技術，e-BLOT接觸式成像將成像靈敏度提升
關于單純皰疹病毒的核酸擴增實驗介紹
單純皰疹病毒的核酸擴增實驗法（NAATs），已成為確認皰疹感染的高靈敏度方法，臨床標本包括生殖器潰瘍、黏膜表皮部位及腦脊髓液等標本。PCR方法對無癥狀HSV病毒播散的檢測特別有用。HSV NAATs擴增檢測最大的限制是檢驗的費用。此類特別的樣本要用滌綸（Dacron）擦拭棒收取并置于病毒傳送培養
核酸擴增—實時熒光PCR
實時熒光PCR，即在常規PCR擴增時加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時，探針結合在DNA任意一條單鏈上；PCR擴增時，Taq酶的5'-3'端外切
恒溫核酸擴增技術通量
在實際的產業化中，分子診斷儀器的通量往往至關重要。對于qPCR而言，由于引物設計的成熟和熒光通道的多樣性，往往可以比較好的實現高通量檢測。由于恒溫核酸擴增技術引物設計較為困難，單一的反應溫度會造成引物和模板，引物與引物之間的非特異性鏈接和擴增，使得恒溫擴增的檢測通量受到限制。但同時也得益于反應溫
恒溫核酸擴增技術概述
恒溫核酸擴增技術是利用各種酶，引物，脫氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及緩沖液的混合物在同一溫度下溫浴一定時間，讓不同的酶與DNA進行反應，從而達到特定DNA片段的擴增。與傳統的PCR核酸擴增相比，恒溫核酸擴增不需要在不同溫度之間的轉換，只要保持酶反應的最佳溫度，37℃、42℃、56℃或6
核酸擴增熒光定量檢測
如果懷疑有乙肝的情況，那么需要到醫院進行專業的檢查，比如做核酸擴增熒光定量檢測之類的，當然核酸擴增熒光定量檢測還可以測量其他方面的情況，比如測解脲脲原體，接下來我們來了解一下核酸擴增熒光定量檢測的相關情況吧。核酸擴增熒光定量檢測檢查什么核酸方面的檢查有核酸擴增熒光定量檢測檢查，那么核酸擴增熒光定量檢
相對豐度計算公式
相對豐度又稱同位素豐度比(isotopic abundance ratio)，指氣體中輕組分的豐度C與其余組分豐度之和的比值。 在生態中相對豐度：群落內物種數目的多少。不同的群落中物種豐度是不同的，從赤道到南北極，群落的物種豐度逐漸減少。物種豐度（species richness）越大，其結構就越復
RACE的原理、應用和優缺點（一）
一、RACE 的簡介 目前,全長基因的獲得是生物工程及分子生物學研究的一個重點。盡管已經有多種方法可以獲得基因的全長序列，但在很多生物研究中，由于所研究的目的基因豐度較低，從而使得由低豐度mRNA通過轉錄獲得全長cDNA很困難。近年來發展成熟的cDNA末端快速擴增(RACE)技術為從低豐度轉錄快速
什么是轉錄依賴的擴增系統？
轉錄依賴的擴增系統(Transcript-basedamplification system，TAS)，是Kwen等人于1989年研究報道的，主要用于擴增RNA.合成A、B引物，引物A的3‘末端與待擴增RNA互補，其5’端有T7RNA多聚酶的啟動子信息.逆轉錄酶以A引物為起點合成cDNA;引物B與此
擴增效率低原因分析
反應試劑中部分成分特別是熒光染料降解。 反應條件不夠優化：可適當降低退火溫度或改為三步擴增法。 反應體系中有 PCR 反應抑制物：一般是加入模板時所引入，應先把模板適度稀釋，再加入反應體系中，減少抑制物的影響。
三豐粗糙度儀維修及使用方法
蘇州勒豐粗糙度儀維修及銷售粗糙度儀又叫表面粗糙度儀、表面光潔度儀儀、表面粗糙度儀檢測儀、粗糙度測量儀、粗糙度計、粗糙度測試儀等多種名稱，國外先研發生產后來才引進國內。粗糙度儀維修粗糙度儀測量工件表面粗糙度時，將傳感器放在工件被測表面上，由儀器內部的驅動機構帶動傳感器沿被測表面做等速滑行，傳感器通過內
核酸等溫擴增技術及其應用
據微生物學家的估計，采用培養技術，僅有約1%的細菌可以培養。在過去的一個世紀里，以聚合酶鏈反應（PCR）為代表的基于核酸的檢測技術發展迅速，為其他病原體的精確檢測診斷提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis發明的PCR技術是20世紀80年代分子生物學領域的一項革命性突破。也許他本人當時也沒有想
核酸序列擴增法的定義
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點，將結合位點序列與靶序列相連，然后產生靶分子的RNA拷貝，形成反轉錄和RN
EMA－常溫核酸擴增技術介紹
基于分子仿生學的原理，把生物體內(如大腸桿菌，酵母或人體等)多酶介導的核酸復制機理在體外再現，使痕量的核酸靶標在普通生物耐受的條件下(常溫下)進行快速的擴增，同時利用特異性熒光探針結合擴增產物，通過熒光檢測儀實時監測熒光信號，實現核酸靶標的快速擴增和檢測。?常溫核酸擴增技（簡稱EMA技術），是由點晶