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實驗材料 酵母試劑、試劑盒 YPD破菌緩沖液酚氯仿異戊醇LB儀器、耗材 玻璃珠試管搖床培養箱離心機實驗步驟 1. 注盛于一個13 mm×100 mm 無菌玻璃試管中的2 ml 培養基接種含有帶目的基因的質粒的酵母單菌落，在轉動或搖動培養箱中30℃過夜培養到靜止期。2. 將1.5 ml 的過夜培養物轉移到微量離心管中，室溫高速離心5 s，倒掉上清，快速振蕩分散沉淀物。 3. 細胞用200 μl 破菌緩沖液重懸，加0.3 g 玻璃珠（約200 μl 體積）及200 μl 酚/氯仿/異戊醇，在漩渦混合器上高速振蕩2 min，室溫高速離心5 min。4. 取1~2 μl 水相轉化感受態大腸桿菌只HB101或MH1，涂布在帶有合適的抗生素的LB平板上以質粒上的抗藥性標志進行選擇。......閱讀全文
實驗材料 載體和酵母菌 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 SD
實驗方法原理實驗要經過兩次連續大量的酵母菌平板篩選過程。酵母菌含有 LexA 融合探針、報道基因和插入PJG4-5（見圖19.1.6）的 GAL 啟動子控制下的 cDNA 表達文庫。最近，已有可供用于這個系統的文庫。實驗材料攜帶適當質粒組合的酵母菌試劑、試劑盒完全（CM）缺失成分液體培養基含有如下指
實驗材料待轉化的酵母菌株試劑、試劑盒 1 mol L 二硫蘇糖醇（DTT過濾除菌并儲存在-20℃)1 mol L山梨醇山梨醇選擇平板儀器、耗材電穿孔儀：如Bio-Rad公司的帶脈沖控制器的Gene Pulser或GIBCO BRL公司的 Cell-Porator 0. 2 cm間隙的一次性電穿孔槽（
現在較常用的質粒提取方法有三種:堿裂解法、煮沸法和去污劑裂解法，前兩種方法較為劇烈，適用于較小的質粒（＜15Kb），而去污劑裂解法則比較溫合，一般用于分子量較大的質粒（＞15Kb）。 堿裂解法是一種廣泛使用的制備質粒DNA的方法。其原理為：染色體DNA遠遠大于質粒DNA，染色體DNA為線狀
實驗材料 酵母菌試劑、試劑盒 CM培養基乙酸鋰PEGTEDMSO甘油氨芐青霉素儀器、耗材 離心機分光光度計搖床培養箱實驗步驟 1. 為了轉化文庫，將約20 ml 含pSH18-34和pBait 的酵母菌EGY48培養液接種到Glc/CM-Ura-H
相互作用蛋白的捕獲試驗要經過兩次連續大量的酵母菌平板篩選過程。酵母菌含有lexA 融合合探針，報道基因和插入pJG4-5的GAL啟動子控制下的cDNA表達文庫。實驗材料酵母菌試劑、試劑盒CM培養基乙酸鋰PEGTEDMSO甘油氨芐青霉素儀器、耗材離心機分光光度計搖床培養箱實驗步驟1. 為了
基本實驗 實驗材料 酵母菌
基本方案 小載體聚合酶鏈反應 mTn誘變基因產物的表位標記 實驗方法原理
實驗方法原理 實驗材料 誘變轉座子基因組文庫質粒DNA試劑、試劑盒 10×TE緩沖液 pH 8.0無菌 E. coli tets kans (如 DH5c×)14 cm的LB培養基平板培養基中加入3 mg mL的四環素和40μg mL的卡那霉素LB培養基丙三醇無菌NotⅠ非限制性內切核酸酶及
實驗材料誘變轉座子基因組文庫質粒DNA試劑、試劑盒10×TE緩沖液 pH 8.0無菌 E. coli tetskans (如 DH5c×)14 cm的LB培養基平板培養基中加入3 mg mL的四環素和40μg mL的卡那霉素LB培養基丙三醇無菌NotⅠ非限制性內切核酸酶及緩沖液Ura3_酵母菌培養一
技術和方案3 酵母 DNA 分離實驗材料質粒DNA玻璃珠試劑、試劑盒YPD消解酶 100TTris-HClSDS乙酸鉀TE 緩沖液RNaseA 溶液山梨醇無水異丙醇裂解緩沖液儀器、耗材三角瓶離心管實驗步驟一、酵母 DNA 微量制備（40 ml)1.在 125 ml 三角瓶中用 40 mlYPD 培養
試劑1M LiCl <用去離子蒸餾水配制，0.22um濾膜過濾除菌；必要時用消毒去離子水稀釋>50% PEG3350 <Sigma P3640 用去離子蒸餾水配制，0.45um濾膜過濾除菌，用較緊的蓋子的瓶子分裝>(氯化鋰轉化法只能PEG3350,不能用PEG80
實驗概要本實驗制備了酵母轉化質粒，快速從轉化酵母菌中分離了用于Southern分析的基因組DNA。主要試劑2％ Triton X－100，1％SDS，100mmol/L NaCl，10mmol/L Tris-HCl(pH8)，1mmol/L Na2EDTA，苯酚：氯仿：已戊醇（25：24：1），YP
酵母DNA分離1）酵母DNA微量制備（40ml）1．在125ml三角瓶中用40ml YPD培養液在30℃條件下培養細胞達最大生長量（過夜）。2．將上述培養物移入螺蓋離心管，用醫用離心機或Sorvall SS－34轉頭以5000r/min離心5分鐘，棄去上清液。3．將細胞懸浮在3ml的0.9mol/L
實驗材料 酵母菌試劑、試劑盒 葡萄糖儀器、耗材 搖床錐形瓶離心機實驗步驟 1. 在30℃，氧氣充足和以葡萄糖作碳源的條件下，野生型釀酒酵母菌生長得十分良好。當酵母菌在試管中培養時，接種酵母菌貯液后應輕輕振蕩培養液以便菌體細胞分散均勻。2. 在作大
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒葡萄糖儀器、耗材搖床錐形瓶離心機實驗步驟1. 在30℃，氧氣充足和以葡萄糖作碳源的條件下，野生型釀酒酵母菌生長得十分良好。當酵母菌在試管中培養時，接種酵母菌貯液后應輕輕振蕩培養液以便菌體細胞分散均勻。2. 在作大體積液體培養時，酵母菌在錐形瓶中生長較
確定各種可能與目標蛋白相互作用的蛋白質，“撒大網”l 雙雜交和其他雙成分系統第一階段：誘餌-LexA融合蛋白的鑒定誘餌-LexA融合蛋白的構建1．將編碼誘餌蛋白的靶DNA克隆到LexA融合載體的多聚接頭處，
一、 疫苗的概念及分類 疫苗，是指一切通過注射或黏膜途徑接種，可以誘導機體產生針對特定致病原的特異性抗體或細胞免疫，從而使機體獲得保護或消滅該致病原的生物制品，包括蛋白質、多糖、核酸活載體，感染因子等。在我國，疫苗分為一類疫苗和二類疫苗。 一類疫苗，是指政府免費向公民提供，公民應當依照政府的
由比利時 Diagenode 公司開發生產的 Bioruptor 非接觸式全自動超聲破碎儀可獲得傳統超聲方法無可比擬的質量、效率和安全性。這一創新已在歐美廣泛應用，被上百篇權威雜志引用，目前最暢銷的有兩款，Bioruptor Plus和Bioruptor Pico。Bioruptor P
乙酸鋰轉化 電穿孔轉化 單鏈高分子質量載體DNA的制備 實驗方法原理
基本方案 制備YAC DNA進行Southern印跡分析 實驗材料
10月24-26日，首屆“中國生物工業投資大會”在天津拉開序幕。大會以“創新驅動綠色發展”為主題，以資本推動產業創新為核心，內容以項目路演與推介為主，圍繞生物工業全產業鏈條，向投資者全方位立體展示行業發展狀況，追求務實合作，樹立我國生物工業領域投資風向標。 與會者熱議會議成果 中國科學院“
（一）原蟲
一、核酸提取技術的改進進行分子生物學研究的前提是取得高數量和高質量的核酸，即DNA和RNA。由于隱球菌細胞壁外有一層厚厚的莢膜，為破除真菌細胞壁造成很大困難。可靠地提取隱球菌DNA的方法建立于20世紀80年代后期，研究者先后建立了玻璃珠方法、超聲粉碎、液氮冷凍研磨等破壁技術。后來，發展酶學方法取代物
定位突變質粒缺口修復技術和等位基因修復技術實驗材料酵母菌株試劑、試劑盒帶選擇標記的YRp或YCp質粒適當的限制性內切核酸酶相應選擇標記突變的酵母菌質粒標記的選擇培養基平板儀器、耗材培養皿實驗步驟1）將目的基因亞克隆到帶恰當的選擇標記的YRp或YCp質粒上。2) 在基因內部的兩個限制酶酶切位點上切割以
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
主要用途真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑是一種旨在使用生物、化學和物理方法相結合，有效去除真菌/酵母菌細胞壁，進一步快速且充分裂解真菌/酵母菌細胞，從而分離出完整而純化的線粒體細胞器，然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒體DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各
實驗概要本文介紹了畢赤酵母PEG1000轉化方法。據稱PEG比LiCl 方法好，但不如去壁細胞及電轉化法，但對沒有電轉裝置的人來說，更方便，效率為102-103/ugDNA。主要試劑Buffer A：1M山梨醇，10mM bicine(N－二(羥乙基)甘氨酸)pH8.35，3%(v/v)乙二醇Buf