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實驗常見問題解答匯集(一) BSP甲基化擴增得到的PCR產物可否直接測序，為什么需要構建TA克隆后測序？ 由于基因組DNA的每個CG位點甲基化程度各不相同，未發生甲基化的C會被重亞硫酸鹽修飾成為U，而C若發生甲基化則不變，這樣如果進行PCR產物測序就有可能在原有的C位點得到雙峰圖，無法確定甲基化的程度，必需通過回收PCR產物，進行TA克隆，隨機挑選5-10個單克隆測序的方式才能計算獲得每個CG位點的甲基化情況。 如何提高哺乳動物細胞的轉染效率？ 對于生物技術科研實驗，擬將外源基因（或DNA序列）導入到體外培養的細胞中（尤其是各類哺乳動物細胞），讓外源基因在細胞中進行表達甚至翻譯，到達預期目的，那么除了保障攜帶基因的質粒載體上具備高表達元件（啟動子、增強子、終止子等）之外，另外一個重要因素是讓外源基因的轉染效率達到極高值，尤其對于基因干擾研究實驗而言，達到80%以上的轉染效率，是干擾評價實驗順利完成的......閱讀全文
實驗常見問題解答匯集(一) BSP甲基化擴增得到的PCR產物可否直接測序，為什么需要構建TA克隆后測序？ 由于基因組DNA的每個CG位點甲基化程度各不相同，未發生甲基化的C會被重亞硫酸鹽修飾成為U，而C若發生甲基化則不變，這樣如果進行PCR產物測序就有可能在原有的C位點得到雙峰圖，
BSP甲基化擴增得到的PCR產物可否直接測序，為什么需要構建TA克隆后測序？由于基因組DNA的每個CG位點甲基化程度各不相同，未發生甲基化的C會被重亞硫酸鹽修飾成為U，而C若發生甲基化則不變，這樣如果進行PCR產物測序就有可能在原有的C位點得到雙峰圖，無法確定甲基化的程度，必需通過回收PCR產物，進
Q&A 常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗
常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗方法？
1.原代細胞與細胞系有什么區別？ 細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
通常來講，real-time qPCR 的反應程序不需要像常規的 PCR 那樣，要變性、退火、延伸 3 步。由于其產物長度在 80～150 bp 之間，所以只需要變性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷 PC
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對D
1.什么是電壓鉗與膜片鉗，有什么區別？ 答：電壓鉗技術是通過向細胞內注射一定的電流，抵消離子通道開放時所產生的離子流，從而將細胞膜電位固定在某一數值。由于注射電流的大小與離子流的大小相等、方向相反，因此它可以反映離子流的大小和方向。膜片鉗技術鉗制的是“膜片”，是指采用尖端經過處理的微電極與細胞
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對D
PC-ADP（脈沖相干聲學多普勒剖面儀）代表了多普勒剖面技術的技術發展水平。因為它在固件和硬件上與傳統ADP都有所不同，因此，對于這種產品，用戶常有很多疑問。脈沖相干模式到底是什么？在脈沖相干模式下，ADP發送一對脈沖，兩脈沖間通過一個時間的延遲將之分開。然后測量每個脈沖返回信號的相位。被時間分開的