實驗試劑HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L無水Na2PO4 47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟1. 將1~2天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠,流水徹底沖洗,然后用70%乙醇洗兩次。小鼠應立即使用,若待處理的小鼠數量較多,可置冰上30min。2. 去除小鼠的四肢和尾巴。3. 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口,用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下,用一把鑷子夾住身體,另一把鑷子拉開皮膚。4. 將剝下的皮膚組織置于放在冰上的無菌培養皿表面,直至所有的皮膚收集完畢。5. 用2把大鼠牙齒鉗夾住皮膚組織,在含2.5%胰蛋白酶的HBSS無菌培養皿中漂洗皮膚組織(組織在下),然后置4oC過。表皮不應淹沒在胰蛋白酶液中。6. 從胰蛋白酶處理液中取出組......閱讀全文
實驗概要本實驗是根據Hennings等(1980)的方法改進而來的。該方案也適用于原代大鼠角質細胞的分離。主要試劑HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 無水Na2PO4 47.86mg/L 無水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L實驗
摘要: 郎格漢斯細胞作為皮膚內的主要抗原呈遞細胞越來越受到人們的關注,半抗原可誘導郎格漢斯細胞遷移、分化、成熟、郎格漢斯細胞通過表達細胞因子受體、神經介質的受體、粘附分子和可誘導的一氧化氮化合成酶參與接觸超敏反應。外界因素可損傷或改變郎格漢斯細胞表面分子的表達,影響接觸超敏反應的誘發。 接觸超敏反
細胞的繼代--吸取細胞培養基,用DPBS(無Ca++/Mg++)洗細胞一次。--用足夠體積的AccutaseTM溶液浸沒細胞層并在37℃孵育5min。如必要可通過輕輕地拍打細胞培養器皿的側面分散細胞。--加入完全培養基稀釋細胞消化溶液(至少加兩倍體積的AccutaseTM)--轉移細胞懸浮液到離心管
美國索爾克研究所開發出一種新技術,能夠將開放性傷口處的間充質細胞直接轉化為新的皮膚細胞,以治愈皮膚損傷。實驗中,他們成功重生了小鼠傷口處的皮膚。研究人員5日在《自然》雜志上發表論文稱,這一新技術或可使治療大面積皮膚潰瘍不再依靠復雜的整形手術。 皮膚創傷恢復的關鍵是基底角質形成細胞,這些干細
美國索爾克研究所開發出一種新技術,能夠將開放性傷口處的間充質細胞直接轉化為新的皮膚細胞,以治愈皮膚損傷。實驗中,他們成功重生了小鼠傷口處的皮膚。研究人員5日在《自然》雜志上發表論文稱,這一新技術或可使治療大面積皮膚潰瘍不再依靠復雜的整形手術。 皮膚創傷恢復的關鍵是基底角質形成細胞,這些干細胞樣細胞
美國索爾克研究所開發出一種新技術,能夠將開放性傷口處的間充質細胞直接轉化為新的皮膚細胞,以治愈皮膚損傷。實驗中,他們成功重生了小鼠傷口處的皮膚。研究人員5日在《自然》雜志上發表論文稱,這一新技術或可使治療大面積皮膚潰瘍不再依靠復雜的整形手術。 皮膚創傷恢復的關鍵是基底角質形成細胞,這些干細胞樣
《超人》里有個經常被效仿的經典情節,超人偽裝成凡人克拉克·肯特,在被火燒到后,燒傷的傷口會瞬間愈合,險些讓他的朋友識破他就是超人。 劃了個小創口,皮膚愈合稀松平常,但如果創口過大,瞬間修復就成為超能力。近日,《自然》發表了美國等國科學家的一項研究,挖掘出皮膚愈合的“超能力”:通過病毒載體,
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7~8d小鼠的生殖細胞懸液;用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%;平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞;精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7~8d小鼠的生殖細胞懸液;用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%;平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞;精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7~8d小鼠的生殖細胞懸液;用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%;平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞;精原細胞主要分布
培養的表皮角質形成細胞可用作:(1)分化模型、器官型培養的理想組織構建物和細胞間相互作用的研究;(2)燒傷或外傷修復的移植物。實驗方法原理用酶消化法將表皮與真皮分開,然后分離角質形成細胞,用無血清培養液培養或在生長停止的飼養層細胞上培養。 實驗材料皮膚組織試劑、試劑盒熱解素胰蛋白酶SKDM
所有形式的親和層析法都需要兩個組分間形成特異性相互作用,通過這種作用可以純化其中一種組分。免疫親和層析即利用抗原和抗體的特異性相互作用,是遵循親和層析原理的一個分類 [綜述見 Subramanian(2002)]。事實上,免疫親和層析是免疫沉淀程序規模放大的拓展應用,不同的部分在于, 層析后需要回收
實驗步驟 一、多羥基反應單克隆抗體 我們最先使用了一類特殊的單克隆抗體, 并將其用于免疫親和層析。這些抗體可以用于溫和的免疫親和層析, 因為洗脫條件只需要聯合使用無離液鹽和低分子質量的多羥基化合物 (多元醇),此條件下蛋白質呈非
實驗方法原理 用酶消化法將表皮與真皮分開,然后分離角質形成細胞,用無血清培養液培養或在生長停止的飼養層細胞上培養。
通過在實驗室小鼠模型中將一種細胞類型(紅色:間充質細胞)轉換成另一種(綠色:基底角質形成細胞)在大面積潰瘍內產生上皮細胞皮膚組織。圖片來源:Salk Institute 眾所周知,大面積的皮膚創傷,包括嚴重燒傷、褥瘡或糖尿病等慢性疾病導致的創傷會給患者帶來極大的痛苦,有時甚至會危及生命。當皮
體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別
香豆素(Coumarin)及其衍生物是從九里香屬植物中提取的一種天然芳香化合物。九里香屬植物(Murraya)是廣泛分布在東亞、澳大利亞和太平洋島嶼的一種開花植物,已被廣泛用作藥材,緩解各種疼痛,如頭痛、風濕病疼痛、牙痛和毒蛇咬傷。然而,它們的鎮痛成分和緩解疼痛的分子機制,仍然還知之甚少。延伸閱
實驗方法原理TIL 是繼LAK 之后的第2 代抗腫瘤效應細胞,是近來實驗研究及臨床應用的熱點之一。目前常規加入IL- 2對TIL 進行培養,但是隨著培養時間的延長,TIL 的增殖活性和抗腫瘤活性都有所降低。實驗材料荷瘤小鼠試劑、試劑盒RPMI 1640 培養液小牛血清儀器、耗材剪刀離心管離心機實驗步
近日,來自杜克-新加坡國立大學醫學院的科學家在Trends in Cell Βiology(Impact Factor: 16.588)上發表了一篇綜述文章,報道了細胞外基質層粘連蛋白(Laminins, LNs)在干細胞分化中的重要作用及最新應用進展。1.Laminin和干細胞微環境細胞內轉錄因子
實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。但屬不繁殖型細胞群,難以長期生存,好的條件下僅能生活2~3 周,因之多用作初代培養。巨噬細胞也能建成無限細胞系;大多來自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW
絕大多數腫瘤缺乏特異性抗原,而且腫瘤組織中抗原提呈細胞數量減少、功能低下或缺如。因此應用細胞融合技術將腫瘤細胞和DC融合,融合細胞即包含腫瘤細胞表面的所有抗原,又具有DC的強大的抗原提呈能力和刺激效應細胞免疫能力[1-2]。 轉化生長因子-β(TGF-β)超家族生長分化因子是一種具有多
一、 實驗準備1. 標本制備:2. zui小化非特異性結合: 二、凋亡1.凋亡的檢測方法:網站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、細胞因子1.激活的細胞因子2.CBA 四、血小板
來自美國威斯康星大學麥迪遜分校的研究人員在《自然-實驗手冊》(Nature Protocols)雜志上發表了題為“Isolation of multipotent neural stem or progenitor cells from both the dentate gyrus and
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混
截至2019年12月23日,中國學者在Cell,Nature及Science在線發表了107篇文章(2019年的Cell ,Nature 及Science 已經全部更新),iNature團隊對于這些文章做了系統的總結: 按雜志來劃分:Cell 發表了31篇,Nature 發表了44篇,Scie
流式細胞儀實驗方法 一、 實驗準備1. 標本制備:2. zui小化非特異性結合: 二、凋亡1.凋亡的檢測方法:和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、細胞因子1.激活的細胞因子2.C
細菌L型是細菌細胞壁缺陷型。每種細菌都有其固定的形態,其形態決定于細菌最外層的細胞壁,細菌細胞壁不同程度缺失導致細菌變成細菌L型。細菌L型最早由Klieneberger發現,他于1935年從念珠狀鏈桿菌的培養物中發現有一種微小的菌落,當時認為是一種支原體,并命名為L1(以他工作的list
眾所周知,大面積的皮膚創傷,包括嚴重燒傷、褥瘡或糖尿病等慢性疾病導致的創傷會給患者帶來極大的痛苦,有時甚至會危及生命。當皮膚表面破裂時,構成皮膚外層的上皮細胞會向傷口處遷移,以努力修復創面并密閉傷口,但這種愈合過程在較大的傷口中會變得非常困難,尤其是對老年人而言。 近日,來自美國Salk研究所
實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤
淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術 實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨