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    限制性片段長度多態性(RFLP)分析

    限制性片段長度多態性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析技術是分子生物學的重要分析方法之一,用于檢測DNA序列多態性。PCR-RFLP 是將PCR 技術、RFLP 分析與電泳方法聯合應用,先將待測的靶DNA 片段進行復制擴增,然后應用DNA 限制性內切酶對擴增產物進行酶切,最后經電泳分析靶DNA 片段是否被切割而分型。本實驗將應用RFLP 分析技術檢測NMDA 受體中的GRIN2A 亞基基因3 號內含子中的2 個SNP 位點rs17750303(A→C)和rs837690(A→G)。[實驗原理]DNA 限制性內切酶具有識別特定的DNA 序列并在特定的部位切斷DNA 雙鏈的活性功能,DNA 分子由于突變(核苷酸的置換、插入或缺失)改變(或形成)了限制性內切酶識別序列,使DNA 限制性內切酶不能(或可以)將靶DNA 片段切斷,電泳檢測時,存在相應DNA 限制性內切......閱讀全文

    法醫DNA檢測技術的現狀及展望

    法醫DNA檢測技術的現狀及展望龐曉東 陳學亮 榮海博 俞麗娟 管樺 張濤公安部第一研究所DNA檢測技術的應用,為法醫學帶來了一場技術革命。通過對遺傳物質DNA的序列多態性及長度多態性的檢驗,即可實現個體識別及親權鑒定,該技術正在成為當前法醫物證鑒定最

    基因多態性的檢測方法概述

    多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性

    分子標記

    內容:一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如

    分子生物學常用實驗技術(page 2)

    一、RNA 制備   模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人

    基因診斷的原理(二)

       末端的DNA片段在DNA連接酶的作用下很容易共價連接,因此被廣泛地應用于重組DNA操作中。具有相同平齊末端的DNA片段也可以連接,但連接效率只有粘性末端連接效率的1%。  限制酶的上述特性在基因工程和基因診斷中具有重要用途:①首先不論DNA的來源如何,用同一種內切酶切割后產

    菌種保藏中的細菌鑒定方法

    作為科研生產中最重要的基礎性資源—菌毒種,其收集、保藏及相關的研究工作在我國正處于整理、整合以及全方面逐步正規化階段.2003年7月23日,科技部在北京召開了“國家科技基礎條件平臺建設”部際聯席會和專家顧問組成立大會,正式啟動了國家科技基礎條件平臺建設工作.國家自然科技資源共享平臺建設作為其中的一個

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    遺傳病與腫瘤的基因診斷

    從DNA水平上尋找確診遺傳病的指標或探討遺傳病和腫瘤的病因等方面,已取得很大成績,對產前診斷,早期確診和突變基因攜帶者的檢出等都有重要意義。所用的方法大體有以下幾種。 一、分離基因進行結構分析 利用DNA離體轉化,制備探針,制備基因文庫進行篩檢,最后鑒定載體中插入DNA片段的特性等一系

    基因芯片與SNP分析

    基因芯片技術作為一種新興的生物技術,近年來得到迅速發展,其應用具有巨大的潛力。單核苷酸多態性(SNP)作為新的遺傳標記對基因定位及相關疾病研究的意義亦非常重大。本文主要介紹了DNA 芯片技術的原理和分類、單核苷酸多態性檢測方法及DNA 芯片技術在單核苷酸多態性檢測方面的應用。生物芯片技術是90

    限制性片段長度多態性(RFLP)分析

    限制性片段長度多態性(restriction fragment lengthpolymorphism,RFLP)分析技術是分子生物學的重要分析方法之一,用于檢測DNA序列多態性。PCR-RFLP 是將PCR技術、RFLP 分析與電泳方法聯合應用,先將待測的靶DNA 片段進行復制擴增,然后

    HLA分型技術(一)

      HLA分型并不只是一種應用性的臨床檢測指標,免疫遺傳學研究的發展,很大程度上依賴于以分型為主要手段的HLA多態性分析。60年代建立的并不斷完善的血清學及細胞學分型技術主要側重于分析HLA產物特異性;80年代起建立的DNA分型方法則側重于基因的分型。  一、血清學分型技術  (一)HLA

    遺傳病與腫瘤的基因診斷

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    RAPD分析的原理及操作技術

    1 目的分子標記是一類建立在分子水平上的遺傳標記,它同樣具有遺傳標記的兩個特點,即可遺傳性和可識別性。廣義的分子標記包括同工酶和DNA分子標記兩類,狹義的分子標記則僅指后者。DNA分子標記通常是一些小分子量的DNA片段(幾十到2000bp左右),它們大量存在于真核生物的基因組內,能夠通過特定的技術和

    限制性片段長度多態性(RFLP)分析

    限制性片段長度多態性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析技術是分子生物學的重要分析方法之一 ,主要用于(1)檢測DNA序列多態性,(2)探索基因的多樣性。實驗方法原理1. DNA 限制性內切酶具有識別特定的DNA 序列并在特定的部位切斷D

    農作物種子純度鑒定方法綜述4

    4.2 SSR(Simple sequence repeat,簡單序列重復標記)由Moore等于1991年創立。SSR即微衛星DNA,是一類由幾個(多為1~5個)堿基組成的基序(motif)串聯重復而成的DNA串聯重復序列,其長度一般較短,廣泛分布于基因組的不同位置,如(cA)n、(AT)n、(GG

    3萬聾人背后的科研與思量

      傳統檢測手段的缺憾,催生了基因芯片診療的誕生與廣泛應用,它有望成為新一代的集成化基因工具,在耳聾的大規模篩查和預防中大放異彩  3萬人,這是第一次全國殘疾人抽樣調查給出的中國每年新增聾兒的估算數量。  “這還只是出生時就已經是聾兒的數量,加上后天藥物的使用等外界因素影響,實際數字應該在

    用PCR進行基因分型

    與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)時覺得見效很快,不再需要等幾天才能看到結果,不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步,RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化,甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白

    用PCR進行基因分型-1

    與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)時覺得見效很快,不再需要等幾天才能看到結果,不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步,RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化,甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白

    毛細管電泳法檢測肺癌p53基因第七外顯子的突變

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    DNA分子標記技術研究進展(一)

    遺傳標記在遺傳學的建立和發展過程中有著舉足輕重的作用,隨著遺傳學的進一步發展和分子生物學的異軍突起,遺傳標記先后相應地經歷了形態標記、細胞學標記、生化標記和DNA分子標記四個發展階段。前三種標記都是以基因表達的結果為基礎的,是對基因的間接反映;而DNA分子標記則是DNA水平遺傳變異的直接反映,它具有

    DNA指紋圖譜分析(圖)

    一. 實驗目的1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術,學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA片段的長度,并能對實驗結果進行分析。二. 實驗原理1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者首次將分離的

    DNA指紋圖譜分析[DNA Fingerprinting ]

    一. 實驗目的1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術,學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA片段的長度,并能對實驗結果進行分析。二. 實驗原理1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者首次將分離的

    分子生物學實驗診斷技術

    一、酸雜交技術檢驗方法建立的基本要素是特異性和靈敏度,在復雜的物體中,使無法感覺的特定物質進入人類的觀察范圍。核酸雜交檢測技術就是利用核酸堿基嚴格配對的特異性,核酸標記物的靈敏度而建立的檢測核酸結構與功能的方法。該法建立以來已有二十年,目前研究實驗室用得多,臨床實驗室用得較少,除成本高外,關鍵是操作

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    HLA抗原的檢測(二)

      (四)HLA-DP抗原的檢測  HLA-DP抗原的檢測可采用預處理淋巴細胞分型試驗(primed lymphocyte typing test,PLT)基本步驟是首先取有一個單倍體相同的兩個個體的淋巴細胞進行混合培養,這在雙親與子女間很容易找到,如親代a/b,子代a/c。先將a/c

    rflp技術

      前 言  基因的變異類型有多種,對應的分子檢測方法亦有多種,當前資本市場驅動著分子檢測市場,并極力追捧NGS技術,因為其通量高,靈敏度高且性價比高。小編承認NGS是分子檢測的必然發展趨勢,但是短時間內,NGS并不會取代其他分子檢測方法,因為針對不同的需求,都有對應的理想檢測方法,每個檢測平臺都有

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    分子實驗方法7: RFLP和RAPD技術

    第七章 RFLP和RAPD技術第一節 概 述  DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同

    農作物種子純度鑒定方法綜述3

    4分子標記鑒定法廣義的分子標記是指可遺傳的并可檢測的DNA序列或蛋白質。蛋白質標記包括種子貯藏蛋白和同工酶(指由一個以上基因位點編碼的酶的不同分子形式)及等位酶(指由同一基因位點的不同等位基因編碼的酶的不同分子形式)。狹義的分子標記概念只是指DNA標記,而這個界定現在被廣泛采納。由于DNA分子中堿基

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