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    聚合酶鏈式反應(PCR)技術

    原理聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction PCR)是一種體外擴增特異性DNA片段的技術。它可以在體外特異地對目的基因進行大量擴增,其巧妙之處在預先設計合成二段分別與待測目的基因二端互補的引物,以起到指向定點的作用;再借助于DNA聚合酶催化的若干次擴增反應后,即可使特定的基因片段成百萬倍的擴增。擴增反應分三步:①變性:當通過加熱使DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,雙鏈解離形成單鏈DNA。②褪火:當溫度突然降低時由于模板分子結構較引物要復雜得多,而且反應體系中引物DNA量大大多于模板DNA,使引物和其互補的模板在局部形成雜交鏈,而模板DNA雙鏈之間互補的機會較少。③延伸:在DNA聚合酶和4種脫氧核糖核苷三磷酸底物,以及Mg2+存在的條件下,以引物為起始點,從5′→3′催化的DNA鏈延伸反應。以上3步為一個循環,每一循環的產物可以作為下一循環的模板,若干次循環之后,介于兩個引物之間的特異性DNA片段就得到了大量......閱讀全文

    關于PCR,你知道多少?(四)----Taq DNA聚合酶

    在PCR反應中,毫無疑問的DNA聚合酶是最關鍵的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大腸桿菌DNA聚合酶 I的Klenow片段。但該酶存在很多缺陷,使之不能廣為應用,比如:熱穩定性差,每次DNA熱變性后大部分酶都被滅活,需要重新加入,每個循環都要重新加入;Klenow酶反應溫度較低,引物和模板容易形

    什么是PCR?

     定義  聚合酶鏈式反應簡稱PCR(英文全稱:Polymerase Chain Reaction),  聚合酶鏈式反應具體內容點擊: 聚合酶鏈式反應,簡稱PCR。聚合酶鏈式反應,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異

    PCR技術 PCR技術的應用

    一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合

    分子生物學常用實驗技術(page 2)

    一、RNA 制備   模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人

    聚合酶鏈式反應PCR原理是什么?

    PCR(聚合酶鏈式反應)技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性→退火→延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合

    多聚酶鏈式反應技術(PCR技術)

    多聚酶鏈式反應即PCR(polymerase chain reaction)技術,應用這一技術可以將微量目的基因(DNA片段)擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義,它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最

    多聚酶鏈式反應技術(PCR技術)

    多聚酶鏈式反應即PCR(polymerase chain reaction)技術,應用這一技術可以將微量目的基因(DNA片段)擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義,它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最

    聚合酶的進化,為特殊需求量身定制生物酶

      分析測試百科網訊 近日,Roche旗下Kapa Biosystems開發出了“直接進化專利技術平臺”(directed evolution technology platform)。這個平臺運用遺傳,基因工程,生物信息學等分子水平上的技術,基因經過多輪的突變,篩選和擴增,獲得高品質的生物酶,而且

    PCR快速檢測技術及其在食品中的應用

       [摘 要] 微生物食品安全是當前消費者與食品工業共同關注的話題,食品中致病菌的快速、準確、簡便檢測,對于食品安全質量控制以及食品鏈中致病性細菌的溯源追蹤具有重要作用。在選用微生物的快速檢測方法時,應該考慮到方法的預期目標的精確性、檢測時間、經濟性、可接受性、操作簡便性、技術服務等因素。介紹了P

    聚合酶鏈式反應(PCR)技術概述

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術是基因擴增技術的一次重大革新,是分子生物學發展史中的一個重要里程碑。使用PCR擴增技術,可以將極微量的靶DNA片段特異地擴增上百萬倍,大大提高了對DNA分子的分析和檢測能力。PCR技術具有敏感度高、特異性強、快速簡便等優

    PCR技術概述

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術是基因擴增技術的一次重大革新,是分子生物學發展史中的一個重要里程碑。使用PCR擴增技術,可以將極微量的靶DNA片段特異地擴增上百萬倍,大大提高了對DNA分子的分析和檢測能力。PCR技術具有敏感度高、特異性強、快速簡便等優

    PCR實驗技術

                                    PCR實驗技術 PCR(聚合酶鏈式反應) 【原理】&nb

    熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用

    劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術,該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針,具有可實時監測,高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,極大地克服了原有PCR儀技術的不足,擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr;熒光;基因Flu

    略談食品檢驗中的生物檢測技術應用

      摘要:近年來,關于食品安全的報導引發了人們對食品安全問題的關注,國家也出臺了相應的法律法規,以保障食品的質量安全。同時在食品檢驗過程中,一些科學的、先進的檢測技術不斷得到應用,其中生物檢測技術更是在食品檢測中發揮了非常重要的作用。生物檢測技術主要包括酶技術、免疫技術、傳感技術等等,對此本文中將進

    聚合酶鏈反應設備(PCR)主要市場和主要品牌

    預計到2026年底,全球PCR市場的市值將達到約70億美元,在預測期內以高個位數的復合年增長率增長。(另一種預計是2024年達到115億美元,在預測期內以復合年增長率6.2%的市場增長率增長。)PCR在整個分子診斷市場,占64%研發支出的增加、藥物基因組學的發展、疾病自我診斷作為預防手段的趨勢的增加

    食品中沙門氏菌的檢測方法

    生吃西紅柿等新鮮的時蔬水果是再平常不過的事了。然而,2008年6月在美國中西部和南部30個州,卻有數百人因生食了從超市或是餐館購買的新鮮西紅柿而出現發燒、腹瀉、腹痛等癥狀,其中有幾十人因病情嚴重需住院,甚至有重癥病人死亡 。這就是2008年發生的“西紅柿事件”,不僅使美國人驚恐不已,也引起

    免疫PCR技術(Immuno-PCR)

    免疫PCR技術(Immuno-PCR) 免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年將免疫學反應和PCR技術相結合而創建的一種新的檢測技術,具有抗原、抗體反應的特異性和PCR技術的高效性。它運用PCR的高度敏感性來放大抗原抗體反應的特異性,使實驗中只需數百個抗原分子即

    聚焦精準醫療之分子診斷技術

    文章導讀  分子診斷是精準醫療的技術基礎,也是體外診斷增速最快的分支行業。近幾年分子診斷產業以較快速度穩步增長。市場占有率還不高,處于行業成長初期,相對免疫診斷、生化診斷來講,發展并不成熟,中國分子診斷行業年均增速達到25%。分子診斷簡介  分子診斷技術是應用分子生物學如DNA、RNA和蛋白質等方法

    食品檢驗中生物檢測技術應用的分析

      摘要:社會的進步促進了食品工業的快速發展,生物檢測技術在食品檢驗中得到了廣泛的應用。本文介紹了幾種常見的生物檢測技術,主要包括免疫技術、生物酶技術、PCR技術、生物芯片、生物傳感器以及核酸探針等技術,并對其在食品檢驗中的應用進行了分析。  隨著社會的進步和人們生活水平的提高,食品安全問題越來越受

    PCR簡介及污染的處理

    PCR技術簡介  前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reacti

    聚合酶鏈反應(PCR)技術的發展和應用-1

    第一節 概述  聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction, PCR),又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique),是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統分子克隆技術的模式,不通過活細胞,操作

    DNA擴增檢測技術的應用

    在藥物的分析和研究,以及控制藥物質量等方面有著廣泛應用的藥物分析檢測技術,可以采用物理、化學等方式對藥物進行系統的分析,并結合現代化學、光譜、色譜等技術對藥品進行研究。DNA擴增檢測技是現代生物學重大發現之一,也是現代藥物分析中快速檢測技術之一。作為人體生命的重要物質,核酸和蛋白的異常表達往往與癌癥

    淺談PCR技術在微生物檢測中的應用前景

      摘要:PCR技術是一種體外擴增特定DNA序列的方法。該技術以其高特異性和靈敏度等優點已廣泛用于各領域。本文主要對PCR技術的原理及其在一次性使用衛生用品微生物檢測的應用前景等方面進行綜述。   隨著科學研究的進步,各種新技術不斷形成且廣泛應用于各個領域。人們對一些生物指標的檢測手段也進

    食品檢驗之PCR技術

      摘要:近年來,微生物及其產生的各類毒素引發的食品污染層出不窮,微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中令人頭痛的問題。隨著生物學技術和微電子技術的發展,食品微生物快速檢驗技術有了較大進展。PCR技術用于食品中致病微生物的檢測較之傳統方法具有快速、 特異、 敏感等特性 ,其優越性無可比擬 ,因

    王曉英:快速檢測鑒定系統在食源性致病菌檢測中的應用

      2014年5月7日上午,第三屆中國食品與農產品質量安全檢測技術國際論壇暨展覽會在北京國際會議中心盛大召開。來自中國動物疫病預防控制中心的王曉英研究員給我們帶來了題為《快速檢測鑒定系統在食源性致病菌檢測中的應用》的報告。中國動物疫病預防控制中心 王曉英研究員  王曉英研究員首先講到食源性

    實時熒光定量PCR

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在許多

    數字PCR市場年增長近12% 國內企業數已反超進口

    數字PCR作為第三代PCR技術,它是將分子生物學與現代微機電、微納制造等工程技術相結合的典范。數字PCR以聚合酶鏈式反應的理論和技術體系為基礎,結合現代微機電和光學檢測技術,實現單分子水平的核酸精確定量檢測。數字PCR的核心思想是將核酸樣品平行劃分為大規模單分子水平的微反應單元,然后對眾

    試管嬰兒植入前遺傳學診斷單細胞PCR的方法

      聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)簡稱PCR技術,是近年來發展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術,由于其可使特定DNA片段在數量上呈指數增加至可檢測范圍,故成為基因診斷的重要方法。在PCR基礎上衍生的一些擴增技術已用于基因突變的診

    數字PCR技術的發展與應用簡介

    數字PCR技術的原理數字PCR(Digital PCR-dPCR)技術是一種新的核酸檢測和定量方法,與傳統定量PCR(qPCR)技術不同,數字PCR采用絕對定量的方式,不依賴于標準曲線和參照樣本,直接檢測目標序列的拷貝數。由于這種檢測方式具有比傳統qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅

    感染性疾病基因診斷進展

    感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查,體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體,抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況,或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應( PCR )

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