一、實驗器具與材料:1、移液槍:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸頭:1ml、200μl、20μl3、勻漿管:5ml4、吸頭臺:放置1ml吸頭的一個,放置20μl吸頭的一個5、EP 管:1.5ml、0.2ml、100μl6、試劑瓶:2個60ml的棕色試劑瓶(廣口,帶蓋)1個125ml的白色試劑瓶(放無水乙醇)7、量筒:50ml、250ml、500ml8、容量瓶:250ml、500ml、1000ml9、試管架:5ml、 1.5ml、20μl10、鹽水瓶:250ml、500ml各2個備用,一個裝無水乙醇,另一個裝DEPC水11、鋁制飯盒:4個12、塑料小飯盒:1個13、大瓷缸:2個14、錫泊紙:一卷15、卷紙:2卷16、三角燒瓶:帶蓋,稍大易生物儀器庫:http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html易生物試劑庫:http://www.ebioe.com/yp/product......閱讀全文
淺談RT-PCR實驗方法中常見污染問題及對策 河南出入境檢驗檢疫局技術中心 李軻 反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)是一種體外核酸擴增技術,它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點,能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定,所以
李軻反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)是一種體外核酸擴增技術,它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點,能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定,所以近年來RT-PCR技術被廣泛應用于人和動物的多種傳染病早期診斷。 筆者一直
反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法中常見的污染問題及對策反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)是一種體外核酸擴增技術,它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點,能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定,所以近年來RT-PCR技
李軻反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)是一種體外核酸擴增技術,它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點,能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定,所以近年來RT-PCR技術被廣泛應用于人和動物的多種傳染病早期診斷。筆者一直從事實
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單
試劑、試劑盒 雙蒸水RT-PCR 緩沖液MMLV 逆轉錄酶SUPERaseIN Taq DNA 聚合酶總 RNA 隨機引物dNTP 混合物 基因特異的正向引物基因特異的反向引物儀器、耗材 PCR 儀 PCR 管實驗步驟 第一部分:單鏈 cDNA 的合成一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去除 RNA 酶
試劑、試劑盒 雙蒸水 RT-PCR 緩沖液 MMLV 逆轉錄酶 SUPERaseIN Taq DN
在預實驗中,對樣品和競爭子應分別做反轉錄,然后,不變的這種樣品反轉錄產物的量與競爭子反轉錄產物 2 的對數倍稀釋的量相結合,用于 PCR,這種方法可以確定樣品的最適拷貝數。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒雙蒸水RT-PCR 緩沖液MMLV 逆轉錄酶SUPER
PCR實驗代測,熒光定量PCR代測主要這幾點很關鍵! 南京信帆生物技術有限公司提供實驗室代測服務,包括放免實驗代做,免疫組化,PCR,WB實驗代測等到,的設備加上技術嫻熟的實驗操作人員,讓您的每一份實驗結果均真實可靠,咨詢!PCR技術服務,Q-,RT-PCR實驗代做。 南京信帆生物提
三:操作1:反轉錄反應按下表準備反應液樣品 體積 終濃度5×反應緩沖液 10μl 1×dNTP混合液 1μl 0.2mM下游引物 50pmol* 1μm上游引物 50pmol* 1μm25mM MgSO4 2μL 1mMAMV反轉錄酶 1μl 0.1μ/μlTflDNA聚合酶 1μl 0.1μ/μl
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求: 1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA
生物谷: RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存
1、流式所需細胞數問:我目前準備做流式,要做10 個標本,但是細胞總數不多了,我能不能把原來在100ml培養瓶培養的細胞轉移到25ml里培養,這樣把細胞重懸后,1個100ml的可以分到4個25ml里。請問這樣可以嘛?細胞數夠嘛?據說做流式至少要105次方個細胞以上才行。丁香網友漂泊認為:細胞數是夠的
實驗方法原理 原位 PCR 儀,蓋玻片,培養箱,濕盒,RT-PCR 試劑盒,Permount實驗材料 組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒 Nuclear Fast Red甲醛緩沖液檢測溶液DEPC 處理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 顯色劑胃蛋白酶DNA
我的一位好友前段時間決定報名公務員考試,考前他列了個體檢清單給我,我仔仔細細翻看了之后默默說了句“少年,你體檢忘了一項哦”。他一臉驚訝的看著我,我笑笑,“要查HIV的哦”。我們中很多人可能對這項檢測非常陌生,今天戲子熊就帶你了解下這個神秘的檢測,也給大家展示下HIV快檢。HIV檢測有哪些種類?抗體檢
轉錄后基因沉默,也稱為RNA干擾,是指雙鏈RNA分子阻斷或者降低同源基因的表達的現象。這種現象可能是作為一種抑制病毒感染和轉座子跳躍的細胞防御機制(Ketting et. al., 1999; Tabara et. al., 1999; Jensenet. al., 1999; Ratc
實驗四 逆轉錄PCR (RT-PCR )【實驗目的】1.了解用逆轉錄PCR 法獲取目的基因的原理。2.學習和掌握逆轉錄PCR 的技術和方法。【實驗原理】聚合酶鏈式反應(PCR)過程利用模板變性,引物退火和引物延伸的多個循環來擴增DNA序列。因為上一輪的擴增產物
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單改變Mg2+
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單改變Mg2+濃度、退火溫
安捷倫科技公司發布用于克隆、基因表達和定量的一步法RT-PCR試劑盒 2010年1月6日,北京安捷倫科技公司(NYSE:A)今天宣布推出了AffinityScript 一步法 RT-PCR試劑盒。這一試劑盒的問世意味著安捷倫Stratagene 產品部又一次攜市場領先的高性能解決方案挺進一
2010年1月6日,北京 –安捷倫科技公司(NYSE:A)今天宣布推出了AffinityScript 一步法 RT-PCR試劑盒。這一試劑盒的問世意味著安捷倫Stratagene 產品部又一次攜市場領先的高性能解決方案挺進一步法RT-PCR市場,致力于幫助研究者改善終點法RT-PCR的實驗結果。
生物谷: RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單改變
為了確認所選擇 cDNA 確實是差異表達的,建議使用 Northern 印跡分析,而不要用其他的確認技術,比如反向 Northern 雜交(Zhangetal.1996) 或定量 RT-PCR。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒瓊脂糖凝膠菌落裂解緩沖液蒸餾水甲
(七)污染 在實際工作中,常見有以下幾種污染類型:擴增片段的污染(產物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后,再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
(七)污染 在實際工作中,常見有以下幾種污染類型:擴增片段的污染(產物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后,再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
實驗方法原理 原位 PCR 儀,蓋玻片,培養箱,濕盒,RT-PCR 試劑盒,Permount 實驗材料
總RNA提取可以:(1)獲得高純度、高質量的總RNA;(2)可以滿足生物學下游實驗Northern Blot、核酸酶保護實驗、RT-PCR、qRT-PCR 和陣列分析所需。實驗方法原理一些公司推出的總RNA 提取試劑盒,可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RN
關于印發農貿(集貿)市場新型冠狀病毒環境監測技術規范的通知 聯防聯控機制綜發〔2020〕221號 各省、自治區、直轄市及新疆生產建設兵團應對新冠肺炎疫情聯防聯控機制(領導小組、指揮部): 為科學規范指導開展農貿(集貿)市場新冠病毒環境監測工作,深入開展病毒溯源和疫情防控,我們組織編制了《農
春暖花開,萬物復蘇,無論是自然界還是科學界,都在發生著日新月異的變化,近年來醫療診斷及食品安全監測領域的技術創新更是層出不窮,而這一切都離不開分子生物學檢測手段的支持。目前大家對于即時現場檢測的需求也十分多樣化,比如,技術不太熟練的基層人員需要在短時間內能夠得到準確的檢測結果,或是在野外條件下需要攜
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”,但越來越多的證據清楚的表明,RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾(RNA interference)的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識,更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有力工具,