DNA的細胞化學――孚爾根反應(二)
(注意: 這個步驟非常重要,必須用1 mol/L稀鹽酸沖洗,因為它可以洗去貼在切片上的試劑的痕跡。如用蒸餾水沖洗,則試劑本身也可以水解,所釋放出的堿性品紅,可以使切片內一切嗜堿性物質皆染色從而引起嚴重的錯誤。若切片較厚,可延長其水解時間,而且每次均需更換洗滌劑)↓蒸餾水沖洗3次(使水解停止)↓Schiff 試劑中染色40min↓用亞硫酸水洗3~5次(以洗去多余的非特異性色素及擴散的染料)↓流水沖洗5 min↓蒸餾水洗片刻↓1%亮綠復染數秒鐘(注意: 復染時間切忌過長,以免染色過深,影響對DNA的觀察)↓水洗脫水封片5.實 驗 結 果細胞核中的DNA呈鮮亮的紫紅色反應,它不但反應出DNA存在的部位及其分布情況,而且還可從顏色反應的深淺,來判斷DNA的相對含量。細胞質被亮綠復染成綠色,核仁通常為負反應;但在有些材料的細胞質中,DNA也會出現陽性反應。6.實驗報告(1). 繪圖表示Feulgen反應的染色結果, 并驗交Feulge......閱讀全文
DNA的細胞化學――孚爾根反應(二)
(注意: 這個步驟非常重要,必須用1 mol/L稀鹽酸沖洗,因為它可以洗去貼在切片上的試劑的痕跡。如用蒸餾水沖洗,則試劑本身也可以水解,所釋放出的堿性品紅,可以使切片內一切嗜堿性物質皆染色從而引起嚴重的錯誤。若切片較厚,可延長其水解時間,而且每次均需更換洗滌劑) ↓ 蒸餾水沖洗3
DNA的細胞化學――孚爾根反應(一)
Feulgen反應(Feulgen reaction)是顯示DNA的最典型的組織化學反應,為學者Feulgen和Rossenbeck于1924年發明,簡稱為Feulgen法。因對 DNA的顯示反應具有高度專一性,故常被用來顯示細胞內DNA的分布情況。 1.實 驗 目 的
DNA的細胞化學――孚爾根反應(一)
Feulgen反應(Feulgen reaction)是顯示DNA的最典型的組織化學反應,為學者Feulgen和Rossenbeck于1924年發明,簡稱為Feulgen法。因對 DNA的顯示反應具有高度專一性,故常被用來顯示細胞內DNA的分布情況。1.實 驗 目 的1.1. 熟悉并掌握Feulge
DNA的細胞化學――孚爾根反應(二)
(注意: 這個步驟非常重要,必須用1 mol/L稀鹽酸沖洗,因為它可以洗去貼在切片上的試劑的痕跡。如用蒸餾水沖洗,則試劑本身也可以水解,所釋放出的堿性品紅,可以使切片內一切嗜堿性物質皆染色從而引起嚴重的錯誤。若切片較厚,可延長其水解時間,而且每次均需更換洗滌劑)↓蒸餾水沖洗3次(使水解停止)↓S
孚爾靈的不良反應
常見的不良反應為骨髓抑制,用藥后約40%的患者中性粒細胞數減低至1000/mm3以下,約20%的患者血小板計數減低至50000/ mm3以下,此外可有貧血。 中樞神經系統癥狀如精神異常、緊張、震顫等,發生率約5%,偶有昏迷、抽搐等。 可出現皮疹、瘙癢、藥物熱、頭痛、頭昏、呼吸困難、惡心、嘔吐
福爾根反應的反應過程
DNA經弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與Schiff(無色品紅亞硫酸溶液)試劑結合,形成紫紅色化合物,使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色陽性反應。紫紅色的產生是因為反應產物的分子內有醌
什么是福爾根反應?
DNA經弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯福爾根反應鍵斷開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與Schiff(無色品紅亞硫酸溶液)試劑結合,形成紫紅色化合物,使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色陽性反應。紫紅色的產生是因為反應產物的
孚爾靈的用法用量及不良反應
用法用量 1、誘導期:靜脈滴注 按體重一次5mg/kg,每12小時1次,每次靜滴1小時以上,療程14~21日,腎功能減退者劑量應酌減。肌酐清除率為50~69ml/分鐘時,每12小時靜脈滴注2.5mg/kg;肌酐清除率為25~49ml/分鐘時,每24小時靜脈滴注2.5mg/kg;肌酐清除率為10
福爾根反應的方法介紹
專一顯示DNA的一種染色法。標本經水解去掉RNA后,DNA的嘌呤—脫氧核糖糖苷鍵中的嘌呤被酸水解,暴露出了脫氧核糖的醛基,游離的醛基同Schiff‘s試劑反應,呈紫紅色。
孚爾靈的介紹
孚爾靈,是一種藥品,通用名更昔洛韋注射液,本品為無色或幾乎無色的澄明液體。
孚爾靈的不良反應及注意事項
不良反應 常見的不良反應為骨髓抑制,用藥后約40%的患者中性粒細胞數減低至1000/mm3以下,約20%的患者血小板計數減低至50000/ mm3以下,此外可有貧血。 中樞神經系統癥狀如精神異常、緊張、震顫等,發生率約5%,偶有昏迷、抽搐等。 可出現皮疹、瘙癢、藥物熱、頭痛、頭昏、呼吸困難
福爾根反應所需材料和試劑
材料洋蔥根尖, 洋蔥鱗莖表皮細胞試劑1)Carnoy固定液: 無水乙醇:冰醋酸 = 3:12)95% 乙醇3)70% 乙醇: 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL4) 5% 三氯乙酸(TCA):固體TCA 5g,加水溶解到100 mL。5) 1N HCl (當量鹽酸)6) Schiff 試劑:煮
孚爾靈的用法用量
1、誘導期:靜脈滴注 按體重一次5mg/kg,每12小時1次,每次靜滴1小時以上,療程14~21日,腎功能減退者劑量應酌減。肌酐清除率為50~69ml/分鐘時,每12小時靜脈滴注2.5mg/kg;肌酐清除率為25~49ml/分鐘時,每24小時靜脈滴注2.5mg/kg;肌酐清除率為10~24ml/
原代細胞富爾根(Feulgen)反應顯示DNA
基本原理:顯示DNA的傳統方法是富爾根(Feulgen)反應,切片先用稀鹽酸處理,DNA經弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連接打開,脫氧核糖的一端釋放出醛基,并在原位與Schiff試劑反應生成紫紅色產物。原理同PAS反應,使細胞核DNA顯紫紅色
原代細胞富爾根(Feulgen)反應顯示DNA
原代細胞富爾根(Feulgen)反應顯示DNA?基本原理:顯示DNA的傳統方法是富爾根(Feulgen)反應,切片先用稀鹽酸處理,DNA經弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連接打開,脫氧核糖的一端釋放出醛基,并在原位與Schiff試劑反應生成紫紅
孚爾靈的適應癥
1、適用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并發巨細胞病毒視網膜炎的誘導期和維持期治療。 2、亦可用于接受器官移植的患者預防巨細胞病毒感染及用于巨細胞病毒血清試驗陽性的艾滋病患者預防發生巨細胞病毒疾病。
孚爾靈的注意事項
用藥期間應經常檢查血細胞數,初始治療期間應每二天測定血細胞計數,以后為每周測定一次。對有血細胞減少病史的患者(包括因藥物、化學品或射線所致者)或粒細胞計數低于1000/mm3患者,應每天進行血細胞計數。如中性粒細胞計數在500/mm3以下、或血小板計數低于25000/mm3時應暫時停藥,直至中性
孚爾靈的性狀及適應癥
性狀 本品為無色或幾乎無色的澄明液體。 適應癥 1、適用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并發巨細胞病毒視網膜炎的誘導期和維持期治療。 2、亦可用于接受器官移植的患者預防巨細胞病毒感染及用于巨細胞病毒血清試驗陽性的艾滋病患者預防發生巨細胞病毒疾病。
孚爾靈的適應癥及用法用量
適應癥 1、適用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并發巨細胞病毒視網膜炎的誘導期和維持期治療。 2、亦可用于接受器官移植的患者預防巨細胞病毒感染及用于巨細胞病毒血清試驗陽性的艾滋病患者預防發生巨細胞病毒疾病。 用法用量 1、誘導期:靜脈滴注 按體重一次5mg/kg,每12小時1次,每次靜滴
銨根與氫氧根離子反應
銨根離子和氫氧根離子反應方程式:NH42++QH-=H2O+NH3。離子方程式,即用實際參加反應的離子符號表示離子反應的式子。是指可溶性物質可拆的反應。多種離子能否大量共存于同一溶液中,歸納起來就是:一色,二性,三特殊,四反應。銨根離子和氫氧根離子反應方程式銨根離子(Ammonium;化學式;NH4
狄爾斯–阿爾德反應的反應機理
狄爾斯–阿爾德反應是典型的[4+2] 型的環加成反應,其反應機理一般認為,在反應時兩反應物彼此靠近,相互作用, 形成一個環狀過濾態。然后逐漸轉化為產物分子,即舊鍵的斷裂與新鍵的形成是相互協調地在同一步驟中完成的—協同反應,無中間體生成。反應圖如下所示:證明,1,3-丁二烯和乙烯的反應是一個簡單而典型
富爾根氏核染色液的配制方法
富爾根氏核染色液 1.席夫氏(Schiff)試劑 將1g堿性復紅加入200ml煮沸的蒸餾水中,振蕩5分鐘,冷至50℃左右過濾,再加入1mol/LHC120ml,搖勻。待冷至25℃時,加Na2S2O5(偏重亞硫酸鈉)3g,搖勻后裝在棕色瓶中,用黑紙包好,放置暗處過夜,此時試劑應為淡黃色(如為粉紅色
多線染色體的帶和間帶的介紹
沿著多線染色體的長軸有一系列深色的帶和透亮的間帶交替排列。帶上的 DNA纖維高度卷曲,DNA 含量高,故能用堿性染料著色,呈孚爾根陽性反應,260納米紫外光吸收強;間帶的DNA含量低,不能用堿性染料著色,呈孚爾根陰性反應,260納米紫外光吸收弱。 各種多線染色體上帶的數目、形態、大小及其分布位
海力孚全自動生化分析儀的反應系統
???? 反應系統是全自動生化分析儀的一個非常重要的組成部分,反應系統包括反應盤、混合裝置、溫控裝置等,這些部分都有什么作用,它們的優差又會對檢測造成什么影響呢?pzbvihb????? (1)反應盤。反應盤裝載一系列反應比色杯,多為轉盤形式。反應測定過程中按固定程序,在加樣臂、加液臂、攪拌棒、光路
狄爾斯阿爾得反應的定義
在加熱條件下,共軛二烯烴與含碳碳雙鍵或碳碳三鍵的化合物進行1,4-環加成反應,生成六元環烯烴,反應也經過一個環狀過渡態。成環反應需要的溫度比開環反應的溫度低些。這個反應稱做雙烯合成反應,是由德國化學家狄爾斯和阿爾得發現的,又稱狄爾斯-阿爾得反應。1928年德國化學家奧托·迪爾斯和他的學生庫爾特·阿爾
狄爾斯–阿爾德反應的應用介紹
由于該反應一次生成兩個碳碳鍵和最多四個相鄰的手性中心,所以在合成中很受重視。如果一個合成設計上使用了狄爾斯–阿爾德反應,則可以大大減少反應步驟,提高了合成的效率。狄爾斯-阿爾得反應在有機合成中有重要用途,是合成六元環狀化合物的重要方法。把反應中的碳原子換成雜原子,也能進行類似的反應,得到含雜原子的六
多線染色體的形態結構
并行排列的染色質纖維多線染色體是DNA多次復制后所產生的子染色體整齊排列,緊密結合在一起而形成的。它所在的細胞在此過程中處于永久間期階段,不分裂,因而隨著復制的不斷進行,核體積不斷增加,多線化細胞的體積也相應增大。同種動物的不同組織以及不同動物的相同組織的多線化程度各不相同。例如搖蚊馬爾皮基氏管細胞
狄爾斯–阿爾德反應的基本內容
狄爾斯–阿爾德反應是一種有機反應,共軛雙烯與取代烯烴(一般稱為親雙烯體)反應生成取代環己烯。該反應用很少能量就可以合成六元環,是有機化學合成反應中非常重要的碳碳鍵形成的手段之一,也是現代有機合成里常用的反應之一。反應有豐富的立體化學呈現,兼有立體選擇性、立體專一性和區域選擇性等。該反應是可逆反應,正
有絲分裂(Feulgen染色)制片技術
實驗概要 1、通過本實驗的學習,初步掌握植物染色體制片,奠定細胞遺傳學研究的基本技術; 2、通過對植物根尖細胞的觀察,掌握有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化; 3、掌握Feulgen染色方法。 實驗原理 有絲分裂(mitosis)是植物
有絲分裂(Feulgen染色)制片技術
實驗概要1、通過本實驗的學習,初步掌握植物染色體制片,奠定細胞遺傳學研究的基本技術;?2、通過對植物根尖細胞的觀察,掌握有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化;?3、掌握Feulgen染色方法。實驗原理有絲分裂(mitosis)是植物細胞分裂的主要方式,細胞分裂過程中,核內染色體準確地復制,并有規