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    單克隆抗體技術:細胞的選擇

    脾細胞 1.材料 (1) 免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。 (2) 1640培養液 (3) 2.5%FCS-1640營養液 2.操作方法 (1) 拉頸或用CO2處死小白鼠。 (2) 將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無菌條件下取脾。 (3) 把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。 (4) 用鑷子輕輕擠壓脾,做成脾細胞懸液,用毛細管將懸液移入小試管中。 (5) 直立小試管3min,使大塊的結締組織下沉,把細胞懸液移入離心管中。 (6) 以2.5%FCS—1640充滿離心管,并以400g離心7min~10min(與此同時應開始制備骨髓細胞)。 (7) 把沉淀用約10ml的新鮮培養液再懸浮。 (8) 重復⑹、⑺步驟。 (9) 計算細胞,......閱讀全文

    單克隆抗體

    ·?????????Tips and hints for the storage of antibodies?(Synaptic Systems)·?????????Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose(KPL)·????

    單克隆抗體培養—含有單克隆抗體的腹水制備

    實驗步驟材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)裸 鼠 , 6?8 周齡,無 特 殊 病 原(SPF),或者是同基因型宿主(注射小鼠-小鼠雜交瘤時)姥 鮫 焼(Pristane, 2,6,10,14-四甲基十五焼; Aldrich 公司提供)雜 交 瘤(單 元 1.3)添 加 10 mmol/L H

    單克隆抗體技術

    實驗原理  B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養 基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產生抗體,又能無限增殖,并以此生產抗

    單克隆抗體技術

    實驗概要顯微鏡下觀察血片或骨髓片,找出異常細胞。實驗原理B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產

    單克隆抗體技術

    實驗概要顯微鏡下觀察血片或骨髓片,找出異常細胞。實驗原理B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產

    單克隆抗體的純化實驗——單克隆抗體的純化實驗

    1~5 ml/min?的速度上樣于蛋白A-Sepharose柱,用Tris緩沖液洗柱子直至所有的未結合的蛋白都被洗脫,采用A280監測。?3. ?依次用2~3倍柱床體積的檸檬酸緩沖液、乙酸緩沖液液以及甘氨酸·Cl緩沖液連續洗脫結合蛋白,洗脫下的蛋白直接接入裝有中和緩沖液的管中,中和緩沖液的體積應為所

    單克隆抗體的定義

    由單一克隆B細胞針對單一抗原表位產生的均一性的高特異性的抗體稱為單克隆抗體。

    單克隆抗體的簡介

      1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上,創建立雜交瘤技術,他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細

    單克隆抗體的概述

      單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。[1]  它通常采用雜交瘤技術來制備,將具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,從根本上解決了在抗體制備中長期存在的特異性和可重復性問題,可直接用于疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究。

    單克隆抗體的定義

    單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,可制備針

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