實驗原理 B淋巴細胞能夠產生抗體,但在體外不能進行無限分裂;而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代,但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后,用一特殊選擇培養 基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路,而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存,且既能產生抗體,又能無限增殖,并以此生產抗 體的技術。單抗技術是主要由抗原制備,免疫動物,細胞融合,篩選雜交瘤細胞,克隆化培養,單克隆抗體的大量制備與鑒定等一系列實驗組成的實驗系統,其核心 部分是細胞融合。 細胞融合是單克隆抗體技術的中心環節,基本步驟是將脾細胞和骨髓瘤細胞混合后加入PEG使細胞彼此融合。 實驗方法 材料: Balb/c小鼠,SP2/0骨髓瘤細胞,50%PEG,不完全培養液,HAT培養液,75%酒精,剪刀,鑷子,紗布,離心管,網篩,大小瓶 皿,直頭滴管,彎頭滴管,瓶塞,培養瓶蓋,離心管蓋,燒杯(加......閱讀全文
近期生物藥領域風起云涌,Venclexta、Atezolizumab等多個新型靶向藥物取得突破性進展。這讓我們再一次意識到,技術創新對于生物藥開發的重要性。筆者在近期參加一些抗體/精準醫療峰會時發現產業界和市場都在關注著靶向藥物、特別是抗體藥方向的新型藥物種類。因此我們撰寫了《抗體藥物?遇見未來
一、對照實驗 1.吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳
(四)染色原理及步驟 1.基本原理 酶標抗體與熒光色素標記抗體的染色相同,亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標記在每一抗體上,間接法是將酶標記在第二抗體上,檢測組織細胞內的特定抗原物質。間接法所用的第一抗體是對組織細胞內某種抗原的特異性抗體(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而絕大數單克隆
前段時間,有小伙伴在公眾號留言說能不能寫點生物藥的文章,不要老是小分子藥嘛。難道你們團隊里只有化學,沒有生物?我們團隊的生物大咖劉博坐不住了,閃開,我來做個分享,絕對干貨!后面還要加鹵蛋!(不對,是彩蛋!) 話不多說,直接開始: 1897年Paul Ehrlich 提出的“魔術子彈”( ma
自身免疫性肝病是-類原因不明的慢性肝病,主要包括3種與自身免疫密切相關的,以肝、膽損傷為主的疾病:自身免疫性肝炎(AIH)、原發性膽汁性肝硬化(PBC)和原發性硬化性膽管炎(PSC)。自身免疫性肝病的診斷主要依靠病史、臨床表現、體征和實驗室檢查結果。每種自身免疫性肝病都具有特征性自身抗體譜,自身抗體
自身免疫性疾病(autoimmune disease, AID)是指機體免疫系統對自身成分的免疫耐受被打破, 從而攻擊自身的器官、組織或細胞, 引起損傷而誘發的一類疾病。按受累器官組織的范圍將AID分為器官特異性AID和非器官特異性AID兩大類。器官特異性AI
【中國制藥網 市場分析】目前,全球抗體藥物產業已經步入了強勁發展的時代,與此同時,抗體技術的發展也面臨著諸多挑戰。無論是在抗體靶標和新抗體基因發現,還是在新抗體藥物的研發和產品種類等方面,很多問題都亟待解決。在此,小編做了詳細的總結。 隨著引領第二次生物醫藥產品浪潮的“單克隆抗體”的出現,
自身抗體檢測是自身免疫性疾病診治中的重要工具,隨著早期診斷、規范化治療的開展,自身抗體檢測在疾病診斷、監測及預后評估中發揮的作用也日益受到重視。但是,由于目前自身抗體檢測缺乏統一的標準化檢驗方法,加上工作條件、傳統診療習慣、結果判讀以及醫療保險限制等方面的因素影響,導至自身抗體檢測在臨床應用上存在著
臨床遇到多臟器受累,而又找不到感染或者腫瘤證據時,需要考慮到自身免疫病,而初篩自身免疫病時首先要檢查的就是抗核抗體(ANA),即自身抗體的一類。為此,我們這次學習一下自身抗體及其臨床意義。自身抗體的分類及其意義自身抗體:指抗自身組織、器官、細胞及其成分的抗體。系統性自身免疫病相關自身抗體ANAANA
自身抗體檢測是自身免疫性疾病診治中的重要工具,隨著早期診斷、規范化治療的開展,自身抗體檢測在疾病診斷、監測及預后評估中發揮的作用也日益受到重視。但是,由于目前自身抗體檢測缺乏統一的標準化檢驗方法,加上工作條件、傳統診療習慣、結果判讀以及醫療保險限制等方面的因素影響,導致自身抗體檢測在臨床應用上存在著
1994年到2011年間,《比較神經學》(Comparative Neurology)期刊的主編Clifford Saper經常看到一大堆利用抗體標記神經遞質及其受體位置的論文。2000年前后,基因敲除小鼠在生物領域大受歡迎,但結果令人不安。這提醒了Clifford Saper一個事實:抗體正在
在抗體研究的漫長過程中,相繼發展了三代不同水平的抗體制備技術?其中以抗原免疫高等脊椎動物制備的多克隆抗體,稱為第一代抗體;通過雜交瘤技術生產的只針對某一種特定抗原決定簇的單克隆抗體,稱為第二代抗體;應用重組DNA技術或是基因突變的方法改造某種抗體基因的編碼序列,使之產生出自然界中原本存在的抗體蛋白質
臨床遇到多臟器受累,而又找不到感染或者腫瘤證據時,需要考慮到自身免疫病,而初篩自身免疫病時首先要檢查的就是抗核抗體(ANA),即自身抗體的一類。為此,我們這次學習一下自身抗體及其臨床意義。自身抗體的分類及其意義自身抗體:指抗自身組織、器官、細胞及其成分的抗體。1、系統性自身免疫病相關自身抗體ANAA
抗體是由B細胞轉化而來的漿細胞分泌的,每個B細胞株只能產生一種它專有的、針對一種特異性抗原決定簇的抗體。這種從一株單一細胞系產生的抗體就叫單克隆抗體(McAb),簡稱單抗。第一代單抗來自于Koehler和Milstein于1975年開發出的雜交瘤(hybridoma)抗體技術:在細胞融合技術的基
類風濕關節炎(rheumataid arthritis,RA)是一種以慢性關節炎為特征的系統性自身免疫性疾病,該病如不及時診斷治療,即可出現軟骨和骨的侵蝕性病變,造成關節結構破壞,最終發展成為關節畸形、強直,導致不同程度的殘疾,因此早期診斷至關重要。但是,目前的診斷均依據1987年美國風濕協會修訂的
前幾天有“磚家”同學寫了兩篇《鼠年說鼠》(一)和(二)。為了留作永久的學習材料,小編在經過原作者同意后,現進行轉載。本文將兩部分內容融在一起,并對(一)和 (二)順序進行了調換。 抗體藥發現的兩大礦場 抗體藥主要有兩個大礦場,一個是依賴于體外展示技術的全合成/半合成/天然抗體
三、《自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家建議》十三條本《建議》可為廣大臨床醫生和檢驗醫師在日常診療實踐中擬定檢測項目及檢測流程時提供參考。自身抗體檢測的合理應用有賴于檢驗醫生和臨床醫生的共同合作。1、《建議》十三條2《建議》解讀 (1)對臨床懷疑有自身免疫性疾病的患者建議進行自身
單克隆抗體是針對腫瘤(癌癥)的特異性藥物。單克隆抗體不僅為基礎醫學研究提供極有價值的抗癌載體,而且在臨床醫學上也得到廣泛的實際應用,為腫瘤、自身免疫等許多臨床疾病的診斷、治療和預防提供了新的手段,是人類治療腫瘤的希望所在。 單克隆抗體具有三種獨特的作用機制。主要包括靶向效應、阻斷效應、信
在免疫檢測中,即使相同的項目,也常常有不同的反應模式。這些模式各有特點,其中夾心法、競爭法可用于檢測抗原,也可用于檢測抗體;間接法、捕獲法僅可用于檢測抗體。下面為大家介紹各種反應模式的特點。 夾心法夾心法分為檢測抗體的雙抗原夾心法和檢測抗原的雙抗體夾心法。其中雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的
抗體市場革命 抗體行業的市場格局,在今年下半年經發生了巨大變化。 今年5月底,抗體巨頭Santa Cruz Biotech涉嫌虐待動物,因而觸犯美國動物保護法,慘遭350萬美元巨額罰款。更嚴重的是,Santa Cruz被永久禁止生產和銷售多克隆抗體-曾經叱咤風云的多抗玩家,現在徹底出局了(S
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色
ELISA原理 ELISA利用抗原抗體之間專一性結合之特性,對標本進行檢測;由于結合與固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計 其結合 機制後,配合酵素顯色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用顯色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與結合機制的不同,ELI
一、ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合
ELISA原理與分類1. ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載
1. ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復
ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與
免疫熒光細胞化學技術免疫熒光細胞化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一,是由Coons等(1950)建立,經過近43年的發展,免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞(或組織)化學。它與親合化學技術如葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素與卵白素、植物血凝素(ConA等)相結合拓寬了領域;與激
1. ELISA的原理 ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗
前言 近年來,靶向PD-1/PD-L1抗體的效果無疑戲劇性地引導我們對癌癥治療總體方法和對宿主-腫瘤生物學理解的改變。由于癌癥治療過程中,T細胞會發生功能性障礙,大多數癌癥病人單獨接受PD-1或者PD-L1抗體治療后,并不能表現出持久的抗腫瘤反應。因此進行抗體聯用策略和治療無疑成為了靶向可
如今,單克隆抗體藥物以其獨特的作用機制及高效性,在腫瘤和自身免疫疾病的治療中發揮了不可估量的作用,成為全球的研發熱點,目前已有2400個單克隆抗體藥物處于研發及商業化階段。 1975年雜交瘤技術問世[1]。1986年鼠源單克隆抗體藥物Muromonab的上市拉開了單克隆抗體發展的序幕。