【實驗原理】 免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術,這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中,首先利用蛋白質的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質進行分離,然后將特異性的抗體引入到與電泳方向平行的凹槽中,在抗原和抗體的擴散過程中,抗原和抗體適當比例的結合會導致沉淀的產生。0.85%鹽不僅可以終止擴散過程也可用于洗去未結合的蛋白,抗原和抗體結合所形成的沉淀線即可以肉眼觀察也可利用染色方法觀察。 免疫電泳技術不僅可用于血清或尿樣中單克隆抗體的鑒定,也可用于其它方面,比如免疫復合物的篩選、各種異常丙種球蛋白血癥的識別和鑒定等。免疫電泳技術也是進行蛋白質常規評價的一種可靠,精確的實驗方法,可觀察蛋白質結構的變化和濃度的改變。 【實驗材料】 ⒈ 實驗器材 水平電泳儀;打孔器;滴管;刀片;電源;水浴(......閱讀全文
郝繁運 綜述 中國誤診學雜志 2007年 第一期 第五次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編 摘要:本文主要介紹了酶免疫分析的發展現狀,從酶免疫分析標記技術若干環節的技術進步、在方法學上與現代化技術的融合與發展、酶免疫分析技
沙門氏菌病是公共衛生學上具有重要意義的人畜共患病之一,其病原沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒,導致胃腸炎、傷寒和副傷寒的細菌.它們除可感染人外,還可感染很多動物包括哺乳類、鳥、爬行類、魚、兩棲類及昆蟲.人畜感染后可呈無癥狀帶菌狀態,也可表現為有臨床癥狀的致死疾病,它可能加重病態或死亡率,或
1、糖化血紅蛋白是血液中的葡萄糖與血紅蛋白交聯形成的產物。糖化血紅蛋白越高表示血糖與血紅蛋白結合越多,糖尿病病情也越重。血糖與血紅蛋白的結合過程很緩慢,而且是不可逆的,在紅細胞死亡之前一直存在,其總數始終與人體內的一段時間來的血糖情況保持一個動態的穩定平衡。而紅細胞的壽命為120天,平均60天,所以
電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗,此后各種電泳技術及儀器相繼問世,廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和/或鑒定。近年來,先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被越來越多的臨床實驗室所采用檢驗|地帶網搜
實驗概要本實驗介紹了蛋白質印跡與探測(Western Blot)實驗原理、方法與步驟。實驗原理Western Blot(蛋白質印跡或免疫印跡)技術,以蛋白質為檢測對象,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。實驗采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)將樣品蛋白質分離,再轉移到固相載體(PVDF
一般來說,重金屬是指密度大于4.5g/cm3的金屬,比如金、銀、銅、鐵、鉛、鋅、鎳、鈷、鉻、汞、鎘等,其中砷是非金屬元素,但是其性質類似金屬元素,根據它的毒性,在食品行業中也充斥著各種各樣的貴金屬的限制。 國際食品法典委員會的新標準 鎘的含量精白米:< 0.4毫克/千克;貝殼類以及魷魚
隨著人類基因組測序工作的基本完成,功能基因組學逐漸成為研究的熱點。而基因表達的調控又是功能基因組學的一個重要研究領域,要想提供蛋白因子直接調控的證據,需要直接檢測蛋白質-DNA的相互作用,而染色質免疫沉淀技術(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)就是一種研
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指
腫瘤具有高死亡率、高轉移率和高復發率,是危害人類健康的重大疾病。診斷腫瘤的傳統方法有病理組織活檢、核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、電子計算機斷層掃描(computed tomography,CT)、B 超、X 線胸片、內鏡檢查等。這些檢查對于腫瘤早期
腫瘤具有高死亡率、高轉移率和高復發率,是危害人類健康的重大疾病。診斷腫瘤的傳統方法有病理組織活檢、核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、電子計算機斷層掃描(computed tomography,CT)、B 超、X 線胸片、內鏡檢查等。這些檢查對于腫瘤早期
實驗常見的問題指南根據問題的類型主要分成以下幾類(以下資料權作參考,請勿盲目模仿!):1. 參考書推薦A. 對初學者看什么資料比較好?解答:《抗體技術實驗指南》和Antibodies(a laboratory manual, wrote by Ed Harlow ,d
蛋白質免疫印跡(Western Blot )可以:(1)從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質;(2)定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況;(3)用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA 相互作用后續分析。實驗方法原理———底物化學發光 ECL 法Western 免疫印跡(Western B
實驗概要人晶狀體上皮細胞原代的和永生化細胞培養是為了一個能夠調查研究人類晶狀體上皮生理及白內障的模型系統而建立的。人晶狀體上皮細胞培養是靠分離來自進行早產兒視網膜病變治療的嬰兒晶狀體上皮碎片,并且允許上皮細胞從外植體生長。通過使細胞培養感染腺病毒(Adl2-SV40)來達到細胞永生化。實驗步驟1.
實驗方法原理 在核內,RNA 聚合酶 Ⅱ 的轉錄產物同大量不同類型的核前體 mRNA/mRNA 結合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonuc
實驗方法原理 在核內,RNA 聚合酶 Ⅱ 的轉錄產物同大量不同類型的核前體 mRNA/mRNA 結合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 結合形成 hnRNP 復合物。實驗材料 HeLa S3 細胞抗體試劑、試
骨腫瘤較罕見,惡性骨腫瘤只占全身惡性腫瘤的1%,男多于女,性別比約為1.6 ∶1,均好發于10-30歲間,良性者以骨軟骨瘤最多,依次為骨巨細胞瘤、內生軟骨瘤 等,惡性者以骨肉瘤最多,依次為軟骨肉瘤、纖維肉瘤等.骨惡性腫瘤的發生機理目 前認為是癌基因顯性作用與抗癌基因失活的結果,是多種癌基因多階段
實驗概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。本實驗詳細介紹了免疫共沉淀的詳細步驟及注意事項。實驗原理當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋
實驗概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。本實驗詳細介紹了免疫共沉淀的詳細步驟及注意事項。實驗原理當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋
3.免疫探測 包括被轉印到膜上的靶抗原與第一抗體(特異抗體)反應、與酶標第二抗體 (抗抗體) 反應,以及用酶相應的底物處理后進行靶蛋白(抗原)信號檢測。(1)用0.01mol/L PBS洗膜,5min×3次。(2)加入封閉液(5%脫脂奶粉或2%牛血清白蛋白),浸泡被轉印膜,室溫或37℃(平緩搖動)反
五、實驗方法的影響 理想的實驗方法要求準確性和精密度較好,又簡便、快速能適合常規應用:因所用實驗方法的不同,其所得的結果也可不相同。例如,測定血漿纖維蛋白原的方法可歸為四類,它們各具優缺點,目前推薦用Clauss(凝血酶凝固時間法)法。 &nb
在核內,RNA 聚合酶 Ⅱ 的轉錄產物同大量不同類型的核前體 mRNA/mRNA 結合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 結合形成 hnRNP 復合物。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法
就臨床應用而言,EPO 的測定主要經歷了三個階段:1、生物體內測定法;2、生物體外測定法;3、免疫測定法。其中后期發展起來的免疫測定法是目前應用最廣泛的臨床檢測 EPO 的方法。實驗方法原理免疫測定法以抗原、抗體反應的特異性和親和性為基礎,具有快速、靈敏、簡易的特點。放射免疫法(RIA)是其中發展較
今年距B細胞被鑒定為一種獨立的細胞類型已經有50周年。作為紀念,美國佐治亞州亞特蘭大市emory大學醫學院的Max D. Cooper教授在Nature review immunology雜志發表了一篇文章總結了B細胞早些年的研究歷史,本文簡要摘取文章的重點進行介紹。 人們首次發現B細胞的存在
蛋白A或蛋白G微珠-抗體層析柱是免疫親和層析技術中最常用的微珠基質之一。此類層析柱容易制備,由于抗體分子是通過Fc段與微珠基質結合,抗原結合片段(Fab)可與抗原最大限度地發生作用。以下介紹的方法可用于蛋白質抗原的純化,但類似的方案也適用于任何其他抗原。 抗體可直接與蛋白A或蛋白G結合。根據抗
實驗方法原理 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如
蛋白質區帶電泳是血清蛋白的經典分析方法,血清(或尿液)標本中不同性質的蛋白質可明顯分開形成不同的區帶,通過正常的電流圖譜進行比較分析,很容易發現患者電泳圖譜不一狹窄而濃縮的集中帶,即M區帶(圖26-1),這是由于M蛋白的化學結構高度均一,因而其電泳遷移率十分一致。如果將這些區帶電泳圖譜掃描,還可計
蛋白質區帶電泳是血清蛋白的經典分析方法,血清(或尿液)標本中不同性質的蛋白質可明顯分開形成不同的區帶,通過正常的電流圖譜進行比較分析,很容易發現患者電泳圖譜不一狹窄而濃縮的集中帶,即M區帶(圖26-1),這是由于M蛋白的化學結構高度均一,因而其電泳遷移率十分一致。如果將這些區帶電泳圖譜掃描,還可計
酸纖維素膜(nitrocellulose filter membrane,簡稱NC膜),是蛋白印跡廣泛使用的轉移介質,對蛋白有很強的結合能力,而且適用于各種顯色方法,包括同位素,化學發光(Luminol類)、常規顯色、染色和熒光顯色;背景低,信噪比高。在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是
抗體藥經過 30 余年的發展,已成為全球醫藥市場的重要組成部分,目前大分子生物制藥市場(包括重組蛋白類藥物)急速增長已突破千萬億美元。從 2017 年市場表現來看,全球 10 大最暢銷藥物中:除 2 個小分子藥物以外,另外 8 個都是大分子藥物,包括 6 個抗體藥物和 2 個融合蛋白。其中藥王“
1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什么的?FL2-W是只檢測熒光的脈沖寬度, FL2-H是指脈沖高度。通常在做細胞周期分析時應用,用于去除粘連細胞。2、流式同型對照怎樣選擇?同型對照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免