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  • 如何清潔移液器以減少移液污染造成的PCR檢測假陽性風險

    對于大量進行PCR的實驗室來說,移液器的污染造成的假陽性并不是一個罕見的情況。 PCR尤其是RT-PCR技術已經逐漸成為疾病診斷的標準方法。如近期流行的新冠(COVID-19)疫情,RT-PCR結果即為診斷標準之一。對于PCR檢測,由于實驗室設備的污染造成的假陽性結果也不容忽視。尤其是在樣本量極大,PCR儀連續工作期間,檢測間往往都是封閉環境,氣溶膠彌漫,儀器極易污染。而移液器往往是離樣品最近,使用最頻繁的儀器,不論是吸液過程中,還是在操作環境中,都非常容易被污染。污染的移液器可能會將污染的樣品或核酸引入后續樣品或者PCR反應體系中導致檢出信號而出現假陽性結果。 我們以德國BRAND 的Transferpette? S移液器為例,介紹如何清潔移液器以減少移液器污染造成的假陽性風險。德國BRAND 的Transferpette? S移液器具有易于拆卸維護的優點,配件更換容易,并具有易校準技術,無需工具即......閱讀全文

    如何清潔移液器以減少移液污染造成的PCR檢測假陽性風險

    對于大量進行PCR的實驗室來說,移液器的污染造成的假陽性并不是一個罕見的情況。?PCR尤其是RT-PCR技術已經逐漸成為疾病診斷的標準方法。如近期流行的新冠(COVID-19)疫情,RT-PCR結果即為診斷標準之一。對于PCR檢測,由于實驗室設備的污染造成的假陽性結果也不容忽視。尤其是在樣本量極大,

    造成移液器移液誤差的因素大全

    可能造成移液誤差的因素→確定影響因素的方法→避免誤差的方法1、氣壓變化對移液器調節影響→觀察測試環境中氣壓計→按照制造商建議的方法操作2、被移取液體與水的密度不同對移液的影響→比較被移取液體與水的密度→觀察用戶相關信息,采用不同的移液方式3、被移取液體與水的水汽壓力不同對移液的影響→移液過程中,液體

    導致PCR假陽性的污染源

    ?PCR反應的特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。一、標本交叉污染源:收集標本的容器:標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;吸樣槍:標本核酸模板在提取過程中,由于污染導致標本間污染;氣溶膠:zui可能

    PCR的假陽性和假陰性如何解釋

    假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。產生的原因有:①引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行 PCR 擴增時,擴增出的 PCR 產物為非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有:操作輕柔

    高白細胞計數造成hCG檢測假陽性

    hCG是婦科最常見的檢查項目,由于其對妊娠狀況以及婦科腫瘤的診治具有極為重要的價值,因此臨床對其檢測準確程度要求較高。然而,現實的情況是hCG的檢測性能并不盡如人意。近兩年來的Clinical Chemistry刊登了多篇關于hCG檢測假陽性和假陰性的論文,提醒廣大實驗室醫學工作者注意hCG檢測

    造成HBsAg檢測出現假陽性的幾種原因

    造成HBsAg檢測出現假陽性的原因可能會有以下幾種:? 1. 待測標本溶血或含有血細胞。? 2. 待測標本長菌或其它原因混濁。? 3. 洗板時洗滌液溢出,污染其它孔。? 4. 洗板機內部管道有真菌生長。? 5. 洗板機設置不當。? 6. 手工洗板時,拍干用紙未更換。? 7. 實驗中,實際孵育時間過長

    如何選購優質的移液器(移液槍)

    移液器的選擇,一般注意從以下幾個方面進行考慮:1.產品性能,即移液器的準確性和重復性對于絕大多數用戶而言,購買之前檢測產品性能既有難度又無必要。因此,主要還是依據制造廠商提供的技術數據。但在這里還是要說明兩點:其一,不要輕易相信賣家的口頭承諾,一定要查閱制造商提供的書面材料;其二,在全球移液器市場上

    造成PCR假陰性的原因

    PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重,并且用些因素經常 被人忽略,嚴重的影響了PCR的使用。可以想象一種假陽性和假陰性都很高的項目,有什么樣的診斷價值。造成PCR假陰性的原因是復雜 的,也是多樣的。主要有:1.PCR儀本身的質量問題。PCR儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題(如:溫控不準等)給臨床

    造成PCR假陰性的原因

    PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重,并且用些因素經常 被人忽略,嚴重的影響了PCR的使用。可以想象一種假陽性和假陰性都很高的項目,有什么樣的診斷價值。造成PCR假陰性的原因是復雜 的,也是多樣的。主要有:1.PCR儀本身的質量問題。PCR儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題(如:溫控不準等)給臨床

    什么是PCR假陽性?

    假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。產生的原因有:①引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行 PCR 擴增時,擴增出的 PCR 產物為非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有:操作輕柔,防止

    移液器的移液模式

    ? 1)樣品混勻模式,(PIPmix Mode)?  2)反向吸液模式(revPIP Mode)該模式專為吸高黏度,高蒸汽壓或發泡液體所設計。?  3)電泳上樣模式(GEL Mode) 以設定的移液量會以較快可調的速度進行吸液,然后以較慢的速度進行排液,以免擴散。該模式在1000ul量程移液器時。?

    PCR實驗室的污染來源

    1、樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。2、實驗試劑污染:主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照

    PCR假陽性產生原因分析

    假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。產生的原因有:①引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行 PCR 擴增時,擴增出的 PCR 產物為非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有:操作輕柔,防止

    什么是菌落pcr假陽性

    利用菌落作為模板進行PCR擴增,驗證該菌落里是否帶有目標片段。但是由于PCR是一個級聯放大的過程,所以即使菌落中不含有目標片段,而是菌落表面沾有一部分之前連接,轉化中用的目標DNA,也會導致PCR獲得擴增條帶,從而誤認為這個菌落已經帶有了目標片段,稱之為假陽性。可以通過提質粒酶切,或者測序驗證,排除

    PCR實驗中假陽性和假陰性的防治

    1,標本采集必須合格,否則不做。2,嚴格按照操作規程,避免人為實驗誤差。3,用于操作的各種儀器,加樣器,必須通過審核驗收,儀器選貴的,進口的!4,最主要的就是試劑,選擇公認的,優質試劑

    移液器移液技法—入水時間和移液速率

    相信每一個在實驗室工作人員都有使用移液器的經驗,也要求移液器能有高準確度跟精確度,但是其實除了移液器本身的準確度和精確度會影響到我們的移液結果之外,移液器的使用技法也會對我們的移液結果產生影響。為了能獲得最佳結果,確保實驗的準確性,我們需要采用良好的移液技法。萊貝將向您介紹關于獲得最佳移液效果的技巧

    移液器的移液的方法介紹

      移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態,將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。  一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接

    移液器的移液的方法介紹

      移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態,將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。  一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接

    移液器種類與移液操作

    正確的移液是實驗成功的保障,在實驗室工作的每一個人都需要移液操作,但是你知道關于移液器一共有多少種類嗎?都是如何應用的呢?在實驗室中,幾乎沒有一項工作像移液一樣普通了。也許正是因為如此普通、簡單,所以,沒有得到人們的關注吧。但就是這樣一個最為普通、簡單工作卻對檢測實驗的結果有著至關重要的影響,那么了

    電子移液器不同的移液方式

    電子移液器是最新研發出來的產品,目前已推出單道電子移液器。獨特的設計符合人體工程學原理。多種移液模式,可以由客戶根據實驗的要求來選擇。樣品混勻模式反向吸液模式:該模式專為吸高黏度,高蒸汽壓或發泡液體所設計。電泳上樣模式:以設定的移液量會以較快可調的速度進行吸液,然后以較慢的速度進行排液,以免擴散。該

    電子移液器不同的移液方式

    電子移液器是最新研發出來的產品,目前已推出單道電子移液器。獨特的設計符合人體工程學原理。多種移液模式,可以由客戶根據實驗的要求來選擇。樣品混勻模式反向吸液模式:該模式專為吸高黏度,高蒸汽壓或發泡液體所設計。電泳上樣模式:以設定的移液量會以較快可調的速度進行吸液,然后以較慢的速度進行排液,以免擴散。該

    電子移液器不同的移液方式

    電子移液器是最新研發出來的產品,目前已推出單道電子移液器。獨特的設計符合人體工程學原理。多種移液模式,可以由客戶根據實驗的要求來選擇。樣品混勻模式反向吸液模式:該模式專為吸高黏度,高蒸汽壓或發泡液體所設計。電泳上樣模式:以設定的移液量會以較快可調的速度進行吸液,然后以較慢的速度進行排液,以免擴散。該

    如何徹底清潔移液器呢?

    如何徹底清潔移液器呢?(1)首先是移液器外部清潔基本的外部清潔可以使用柔軟的布蘸取消毒液擦拭。消毒液的可選的類型有:1.84消毒液(原液按照提供的指導進行稀釋)2.70%的酒精3.對于附著性的污漬,如染色性實驗試劑的殘留可以使用60%的異丙醇擦拭;使用消毒液或清潔劑擦拭后,需要用布再蘸取水擦拭。(2

    核酸檢測常態化,遇到“假陽性”該怎么辦?

    新型冠狀病毒感染引起的肺炎疫情至今仍在全球肆虐,且感染病例數在突破2000萬后仍在繼續攀升。經過全國上下艱苦努力,我國新冠肺炎疫情防控向好態勢進一步鞏固,為全面落實“外防輸入、內防反彈”的總體防控策略,防控工作已從應急狀態轉為常態化。隨著各地新建符合安全級別的PCR實驗室與核酸檢測技術的普及,病毒核

    實驗室移液從移液管到移液器的升級之旅

    在遙遠的一百多年前,實驗室里的精英們開始用移液管來轉移液體。所謂移液管,就是一根空心的玻璃管,上面標著一到N個刻度。把這根玻璃管插到液體里面,在管子的另一頭用嘴(剛開始,我們的精英們只能用他們寶貴的嘴巴來干這個活)或洗耳球把液體吸到管子里,而上面的刻度則告訴我們里面有多少液體了。在吸滿我們需要的量之

    如何進行移液器(移液控制器)的維護保養

    ?移液器是生物\化學實驗室常用的工具,特別在生物實驗室中微量移液器應用更為廣泛,因為使用方便,度高,成為實驗室*的儀器。? ? ? ? 因為技術的發展,目前市場上移液器品牌繁多,魚目混雜,常用的主要以進口品牌為主:eppendorf(艾本德)、brand(普蘭德)、axygen(愛思進)、corni

    PCR產物的假陽性的相關問題介紹

      出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。  引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。  靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:

    注意:異嗜性抗體造成血hCG假陽性

    所謂異嗜性抗體,就是指體內存在的可以識別動物抗體的抗體。盡管其在人體內并不會引起任何不適,但其卻是免疫學檢測的一塊“心病”:因為其可以干擾很多免疫學檢測過程,造成結果假陽性或假陰性。最近,Clinical Biochemistry就刊登了一則異嗜性抗體干擾HCG檢測的病例,筆者進行了一些概括和總結,

    PCR-反應出現假陽性結果原因

    1 ) 引物設計不合適: 選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而,在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。 2 ) 靶序列或擴增產物的交叉污染: 這種污染有兩種原因: 一是整個基因組或大片段的交叉污染,導致假

    菌落pcr會出現假陽性結果嗎

    最近做酶切連接轉化,最后做鑒定時,以菌落為模板進行PCR時可以見到有目的條帶;當把菌落接種到LB液擴菌后,以菌液為模板進行PCR時卻什么東東都沒有?請問會是什么原因啊?多多指教啊!建議重新以菌落為模板進行PCR檢測,再重新以菌液為模板進行PCR檢測,因為菌落或者菌液PCR假陽性的幾率還是比較高的。但

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