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    實時熒光定量PCR技術用于檢測插入的外源基因拷貝數

    自 1994 年,第一例轉基因植物產品 Flavr Savr TM 西紅柿在美國上市,到 2003 年底,世界范圍內轉基因作物已遍布 18 個國家和地區,種植面積達 167.2 萬英畝 (6770 萬公頃 )( Ewen SWB,1999; 北國網 ) 。大量實踐使得植物轉基因技術已有了比較經典和成熟的技術路線。除了在商業領域內獲得抗性植株外,植物轉基因技術還延伸到植物生理學研究(生化反應途徑、植物抗病、抗逆性)以及生物反應器研究(藥物、疫苗等)中( Khachatourians 2002 )。一般經過上游表達載體的設計構建以及下游轉化體系的建立、轉化品系的篩選鑒定等一系列步驟后,即獲得 T 0 代轉基因植物。在轉化過程中,外源 DNA 隨機插入植物基因組內,插入的拷貝數和位點都不固定。插入外源基因的拷貝數低( 1 或 2 個)能較好的表達,插入的拷貝數多則會導致表達的不穩定甚至基因沉默現象( Flave......閱讀全文

    實時熒光定量 PCR技術用于檢測插入的外源基因拷貝數

    自 1994 年,第一例轉基因植物產品 Flavr Savr TM 西紅柿在美國上市,到 2003 年底,世界范圍內轉基因作物已遍布 18 個國家和地區,種植面積達 167.2 萬英畝 (6770 萬公頃 )( Ewen SWB,1999; 北國網 ) 。大量實踐使得植物轉基因技術已有了

    實時熒光定量PCR技術

    通過實時熒光定量PCR技術實現對miRNA靶向物mRNAs的相對定量分析1 導言小RNA(miRNAs)是一種內源性非編碼蛋白的小分子RNA,它們是許多基礎的細胞過程中基因表達的主要調節因子,這些過程包括細胞增殖、細胞分化以及細胞凋亡等。miRNA在腫瘤生長過程中也發揮著重要作用。一般來說,miRN

    如何確定轉基因拷貝數

    鑒定轉基因植物的第一步就是要確定被轉基因已經穩定的整合到了染色體上。第二步任務就是評估有多少個轉基因拷貝,以及每個轉基因的表達水平如何。一般經過上游表達載體的設計構建以及下游轉化體系的建立、轉化品系的篩選鑒定等一系列步驟后,即獲得 T 0 代轉基因植物。在轉化過程中,外源 DNA 隨機插入植物

    實時熒光定量PCR儀【實時熒光定量PCR儀】

      【FT-PCR】實時熒光定量PCR儀【實時熒光定量PCR儀】_風途廠家_Kgaolet?o ya dikarolo t?e bopago seswant?ho t?a kgole ya PCR  具體來講撲殺無害化處理染疫動物,禁止泔水飼喂生豬,加強生豬養殖運輸屠宰等各個環節的清洗和消毒,包括養

    實時熒光定量PCR技術原理

    所謂的實時熒光定量 PCR 就是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。其原理是在實時熒光定量 PCR 反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著 PCR 反應的進行, PCR 反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒

    講解實時熒光定量PCR技術

    ?實時熒光定量PCR (real time fluorogenetic quantitative PCR, FQ-PCR),是在PCR定性技術基礎上發展起來的核酸定量技術。它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時檢測整個PCR過程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該

    實時熒光定量PCR技術原理

    所謂的實時熒光定量 PCR 就是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。其原理是在實時熒光定量 PCR 反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著 PCR 反應的進行, PCR 反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光

    實時熒光定量PCR技術原理

    所謂的實時熒光定量 PCR 就是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。其原理是在實時熒光定量 PCR 反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著 PCR 反應的進行, PCR 反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光

    實時熒光定量PCR技術原理

    所謂的實時熒光定量 PCR 就是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。其原理是在實時熒光定量 PCR 反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著 PCR 反應的進行, PCR 反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光

    實時熒光定量PCR技術-2

    qRT-PCR基因表達分析在384孔板上11ul/孔的總反應體積中,使用熒光Universal ProbeLibrary(UPL)探針(羅氏公司)和ABI 7900HT 實時儀器(美國應用生物系統公司)以及2X FastStart Universal Probe Master (Rox)PCR試劑(

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