通過實時熒光定量PCR技術實現對miRNA靶向物mRNAs的相對定量分析1 導言小RNA(miRNAs)是一種內源性非編碼蛋白的小分子RNA,它們是許多基礎的細胞過程中基因表達的主要調節因子,這些過程包括細胞增殖、細胞分化以及細胞凋亡等。miRNA在腫瘤生長過程中也發揮著重要作用。一般來說,miRNA通過控制翻譯過程來實現對目標蛋白表達的調控。然而,在靶向mRNA降解水平上的基因表達的調控已有報道。因此,有證據顯示miRNA能夠通過RNA降解來實現對細胞內mRNA濃度的直接調控,而且也會通過靶向作用于蛋白質級聯來調控mRNA水平,這些蛋白質級聯能夠調控下游轉錄或在轉錄后對mRNA水平進行調控。在當前的研究中,我們重點關注miRNA hsa(人)miR-21,研究發現在乳腺癌和其他腫瘤中miR-21水平上調。更進一步的研究發現,miR-21在細胞凋亡和細胞生長過程中也發揮著功能性作用。為了進一步對miR-21進行研究,我們研究了m......閱讀全文
實時熒光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,熒光定量)分類以及實驗步驟介紹實時熒光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,熒光定量)技術(Real-time quantitative PCR),是指在(QPCR,熒光定量)反應體系中加入熒光基因,
實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR
實時熒光定量PCR在人感染豬流感診斷中的作用彭年才12 張鎮西1 蘭鄒然3 黃兵3 李紅東2 李明2 苗保剛2 1西安交通大學生物醫學分析技術與儀器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山東省動物疾病預防與控制中心200
實時熒光定量PCR——一種科學準確的定量方法實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用。本文試就其定量原理、
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指
淺析乳制品中高危害食源性致病菌--阪崎腸桿菌的快速檢測摘 要:2006年國家出臺的《嬰幼兒配方乳粉生產許可證審查細則》中明確要求采用國際通行的“熒光PCR儀”作為出廠檢驗必備設備,此要求已成為乳品企業生產許可證核發的必要條件。本文簡單綜述了國際通行的保證食品安全的食
眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能直接揭示病原體的存在,
實時熒光PCR檢測技術眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能
實時熒光定量PCR技術是指在PCR反應體系中加入熒光染料或熒光集團,利用熒光信號來實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板濃度進行定量分析。 病原學檢測是動物疾病確診的關鍵點,而聚合酶鏈式反應(PCR)是目前病原檢測的最常用的分子生物學技術,具有高敏感性的特征。PCR技術發展已日趨完
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在許多
分析測試百科網訊,根據《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第五版)》,作為新型冠狀病毒肺炎診斷的“金標準”,除湖北地區在核酸檢測基礎上增加CT檢測外,全國其它地區以及全球各地區,目前都以核酸檢測陽性為確診依據。核酸檢測除了100多家試劑盒企業推出產品,主要比拼產能、靈敏度、獲得醫療器械注冊證的速度外,所
1、Ct值的定義在熒光定量PCR技術中,有一個很重要的概念--Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含義是:每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數。2、熒光域值(threshold)的設定PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號,熒光域值的缺省設置是3-
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術,該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針,具有可實時監測,高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,極大地克服了原有PCR儀技術的不足,擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr;熒光;基因Flu
聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析,分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下,我們所感興趣的是未經 PCR
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等
PCR實驗室產品選擇指南 熒光 基團是吸收一定波長的光子后發射特定波長的光波,可以作為抗體等分子的標記物,實時熒光定量PCR中的Taqman探針常用熒光基團FAM標記熒光基團和TAMRA標記。 熒光基團 吸收特定波長的光子后熒光染料(通常稱為“熒光基團”或簡稱為“熒光
文章要點:上海樂楓市場部對目前疫情防控工作中的熒光定量PCR的核酸檢測技術做了深入淺出地闡述,并為該實驗中使用的純水設備做了解析和介紹。轉載請注明原文出處 目前疫情的防控工作取得了階段性的成效,基于實時熒光定量PCR的核酸檢測技術在新冠病毒快速鑒定及確診中發揮了重要作用。 什么是
PCR概念PCR,中文名是聚合酶鏈反應(基因擴增)基本原理 類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR是模擬體內DNA復制過程,在體外特異性擴增DNA片段的一種技術。PCR的應用領域:1、遺傳病和某些疑難病的診斷2、病原體的檢測。某些惡性疾病一般用微生
一、阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種:1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血癥,死亡率高達50% 以上。目前,微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。阪崎腸桿茵的生物學性狀及其對人群的健康危
目前疫情的防控工作取得了階段性的成效,基于實時熒光定量PCR的核酸檢測技術在新冠病毒快速鑒定及確診中發揮了重要作用。什么是實時熒光定量PCR?實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技術,簡稱qPCR,是在PCR反應體系中加入熒光物質(熒光染料或熒光標記的特異性探針
聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法,而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展,定量PCR技術取得了突飛猛進的發展,不僅建立了一系
今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展! 其實相對于其
臨床檢驗常見設備包括:一、臨檢設備:血細胞分析儀、流式細胞儀、血凝分析儀、尿液干化學分析儀、尿液有形成分分析儀、糞便分析儀二、生化免疫設備:生化分析儀、化學發光免疫分析儀、酶免疫分析儀、熒光免疫分析儀三、分子診斷設備:核酸提取儀、實時熒光PCR儀、基因測序儀、質譜儀四、微生物檢驗設備:微生物鑒定藥敏
定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied biosystems公司推出,它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該
嗜酸乳桿菌是重要的益生菌,被大量應用在食品中。研究表明嗜酸乳桿菌能在乳制品中產生乳酸,并能通過氨基酸代謝增加風味。嗜酸乳桿菌主要作用有降低pH值、產生抗菌素(如嗜酸菌素和乳酸殺菌素等),在一定程度上抑制腸道中有害微生物的有害作用。有研究發現嗜酸乳桿菌對大腸桿菌、腹瀉致病菌等均有抑制作用;大量的嗜
自1985年 Mullis 發明了體外多聚酶鏈反應(PCR)至今, PCR在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用.今天的第三代PCR技術, 即絕對定量的數字化 PCR也備受關注。來自西安交通大學生命科學與技術學院等處的研究人員近期發表綜述,介紹了 PCR 技術的發展