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    溶解引物需要什么水

    先離心!然后加入適量的水或TE溶解。一般配制成較高濃度的母液(約100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物濃度不宜偏高,濃度過高有兩個弊端:一是容易形成引物二聚體(primer-dimer),二是當擴增微量靶序列并且起始材料又比較粗時,容易產生非特異性產物。一般說來,用低濃度引物不僅經濟,而且反應特異性也較好。一般終濃度用0.25-0.5pM/μl較好。1 引物的分子量如何計算? 比如:AAGCTTTTACCGC的分子量是多少?2 OD值,1個OD值是不是等于40UG。3 質量數,質量數的含義是什么,怎么計算?4摩爾數(μmol)和終濃度(pM)和稀釋水量(μl)是不是計算稀釋引物都要用到以上四點的各個參數?具體的公式是什么呢?合成引物的單子上應該有算法:1OD=33ug1個堿基的分子量=324.5(以上為近似值,通常都這樣用)1條引物的分子量=堿基數*324.5質量數=......閱讀全文

    引物溶解引物保存

    1. 如何測定引物的OD值?用紫外分光光度計在260nm波長測定溶液的吸光度來定量,請注意紫外分光光度計的使用,測定時溶液的吸光度最好稀釋到0.2~0.8之間(吸光度太高或太低會有較大的誤差)。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后,取部分溶液稀釋到1 ml 并在1 ml 標準比色皿中測定其吸光度

    引物溶解引物保存

    1. ?如何測定引物的OD值? 用紫外分光光度計在260nm波長測定溶液的吸光度來定量,請注意紫外分光光度計的使用,測定時溶液的吸光度最好稀釋到0.2~0.8之間(吸光度太高或太低會有較大的誤差)。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后,取部分溶液稀釋到1 ml 并在1 ml 標準比色皿中測定其

    如何溶解引物?

    干燥后的引物質地非常疏松,開蓋前最好離心一下,或管垂直向上在桌面上敲敲,將引物粉末收集到管底。根據計算出的體積加入去離子無菌水或10mM Tris pH7.5緩沖液,室溫放置幾分鐘,振蕩助溶,離心將溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸餾水,因為有些蒸餾水的pH值比較低(pH4-5),引物在這種

    引物溶解稀釋方法

    在實驗室進行分子克隆實驗時,經常需要合成大量的引物,而這些合成的引物首先要進行適當的稀釋才能使用。如果不稀釋就使用引物,往往造成引物的浪費和過早的活性喪失,更有一些被污染而不能使用。因此,建議對合成的引物先進行稀釋,然后使用。稀釋的引物利于保存和應用。現將方法簡單敘述如下:1. Oligo DNA是

    如何溶解和保存引物?

    如何溶解引物?干燥后的引物質地非常疏松,開蓋前最好瞬時離心一下,或管垂直向上在桌面上敲敲,將引物粉末收集到管底。根據計算出的體積加入去離子無菌水或TE(pH8.0)緩沖液,室溫放置幾分鐘,振蕩助溶,離心將溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸餾水,因為有些蒸餾水的pH值比較低(pH4-5),引物

    已經溶解的引物的問題

    已經溶解的引物,為什么原先使用正常,而過一段時間再使用就不好了?如果您溶解引物的水pH過低或污染了菌或核酸酶,會使引物降解。使用時沒有充分解凍混合,液體不均勻也可能會造成引物加入量不準確。建議分裝引物,避免反復凍溶。建議使用10mM Tris pH7.5緩沖液溶解引物,因為有些蒸餾水的pH值

    溶解引物需要什么水

    先離心!然后加入適量的水或TE溶解。一般配制成較高濃度的母液(約100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物濃度不宜偏高,濃度過高有兩個弊端:一是容易形成引物二聚體(primer-dimer),二是當擴增微量靶序列并且起始材料又比較粗時,容易產

    怎么通過看擴增曲線和溶解曲線看引物的好差

    具體要看你做什么實驗,模板和擴增的基因實怎樣的.1、擴增曲線:一般來說如果你做雙ΔCT法那么你的擴增曲線必須是S型,有明顯的四個時期,且復孔的CT值盡量一致,相差不要超過0.5個CT值(上限是1個CT值);同一個基因在...

    引物設計的引物設計原則

    1、引物長度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般為40%-60%,以45-55%為宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之間,Tm值曲線以選取72度附近為佳,5'到 3

    快速了解反轉錄引物隨機引物

      隨機引物是指當特定mRNA由于含有使逆轉錄酶終止的序列而難于拷貝其全長序列時,可采用隨機六聚體這一非特異的引物來拷貝全長mRNA。  1.特異性引物一般在增低豐度目的基因才選擇使用,用得比較少。一般都推薦用Oligo(dT)或隨機引物代替基因特異性引物。由于rna的二級結構破壞不完全,導致特異性

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