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蛋白質的可逆磷酸化修飾是生物體內普遍存在的信息轉導調節方式，幾乎參與生命活動的所有過程，在細胞的增殖、發育和分化，細胞信號轉導、轉錄和翻譯，細胞的周期調控、蛋白降解和新陳代謝，細胞生存、細胞凋亡和腫瘤發生等方面發揮著重要的作用。目前已知許多人類疾病的發生都與異常的蛋白質磷酸化修飾有關，而且一些疾病也會導致一些異常的磷酸化修飾。因此，通過探索生理和病理狀態下蛋白質磷酸化規律對于闡述生命本質和疾病發生機制具有十分重要的意義。 由于蛋白質磷酸化是一種動態過程，磷酸化蛋白的豐度很低，化學計量比十分小、非磷酸化肽質譜信號強烈抑制磷酸化肽質譜信號，因而難以用質譜直接檢測。此外，由于磷酸根帶負電，其離子化效率較低，使得磷酸化肽的質譜檢測變得更加困難。因此，在檢測前，進行富集，提高其相對含量，改善質譜對磷酸肽的信號響應是十分必要的。盡管目前有多種富集方法可以選擇，但都存在不少問題，如抗體需要量較大、費用昂貴、富集效率不高，......閱讀全文
關鍵詞：腫瘤微環境，磷酸化蛋白質組，分泌蛋白質組，IP-MS，PRM，ELISA 胰腺癌是全球范圍內死亡率最高的一種癌癥，其發生率高、生存期短的特點而被稱為“癌王”。胰腺癌是一種惡性程度極高的消化系統惡性腫瘤，其發病隱匿，早期診斷困難、進展快，發現時已經進入中晚期且大多已經轉移，再加上對
實驗材料 異丙基 β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒 非變性裂解液非變性洗滌液非變性洗脫液苯甲基磺酰氟儀器、耗材 超聲勻漿器聚丙烯柱實驗步驟 3.1 非變性條件下重組激酶的純化用于磷酸化篩選的激酶必須是可溶和有活性的，且無其他激酶參雜的純化激酶。因此，我們可以從 cDNA
來自清華大學生物科學與技術系，冷泉港實驗室的研究人員發現一種對于果蠅嗅覺長時程記憶形成必需的突變：AKAP Yu，這有利于進一步了解果蠅神經傳遞記憶形成過程中蛋白激酶A信號通路的作用。這一研究成果公布在《美國國家科學院刊》（PNAS）雜志上。 文章的通訊作者是來自清華大學生物科學與技術系的周海夢
靶向藥物具有特異性好、毒副作用少的特點，在對癌癥的治療中發揮了重要作用。然而，腫瘤對靶向藥物耐藥性的產生卻是臨床實踐中遇到的一大難題。在此背景下，如何全面系統地理解耐藥性產生的機理是當前癌癥研究的熱點之一。最近，德國慕尼黑理工大學的研究者在國際著名期刊Cancer Research發表論文，綜合
磷 蛋 白 的 檢 測作為基本的細胞信號機制, 指定氨基酸殘基的可逆磷酸化作用的重要性已無需爭辯。當前磷蛋白染料具有受專利保護的構型，即磷酸基結合部分共價連接于熒光團。檢測的方式是選擇性結合磷酸化的氨基酸，但是沒有熒光增強作用。從某種程度上講, 許多可溶的熒光復合物都可作為總蛋白質染色劑
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀
實驗材料測序級膜蛋白酶試劑、試劑盒二硫蘇糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯儀器、耗材螯合瓊脂糖凝膠層析介質實驗步驟這里所述的方法概括為下列幾個步驟：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性組分中的蛋白質（見 24. 3.1 )；固相金屬螯合親和層析（IMAC) 富集磷酸肽（見 24. 3. 2 )；用串聯質譜對磷酸
Broad研究所蛋白質組學平臺的研究人員近日在《Nature Protocols》雜志上報道了一個經過優化的新流程，能夠快速且重復地對腫瘤蛋白進行深度分析和定量。 在過去十年中，基因組學研究已經系統繪制了人類癌癥的遺傳改變，但這些改變對蛋白質組的直接影響還知之甚少。NIH臨床蛋白質組學腫瘤分析
在過去十年中，基因組學研究已經系統繪制了人類癌癥的遺傳改變，但這些改變對蛋白質組的直接影響還知之甚少。NIH臨床蛋白質組學腫瘤分析聯盟（CPTAC）的蛋白組學研究表明，將蛋白質組和磷酸化蛋白質組數據與基因組數據相整合，才能改善癌癥通路的鑒定。圖片來源于網絡 然而，實體瘤組織在組成上比細胞系要復
EMBL的歐洲生物信息學研究所（EMBL-EBI）的研究人員創建了迄今為止最大的參考磷酸化蛋白質組，將近120000個人類磷酸化位點。為了識別最重要的成員，他們使用了一種機器學習方法，能夠根據功能重要性對其進行排名。 蛋白質是細胞的核心分子機器，可以通過類似于分子開關的蛋白質修飾來調節。磷酸化
報告題目：《Orbitrap Fusion Tribrid MS/TSQ Quantiva/TSQ Endura質譜簡介》 報告人：賽默飛世爾科技公司唐佳博士 賽默飛世爾科技公司唐佳博士作了《Orbitrap Fusion Tribrid MS/TSQ Quantiva/TS
來自澳大利亞的科學家們以前所未有的細節，精確地繪制出了胰島素在細胞中的作用路徑圖。從而為了解糖尿病中的異常提供了一張綜合性藍圖。來自悉尼Garvan醫學研究所的Sean Humphrey和David James教授將這一突破性的研究在線發表在著名的《細胞代謝》(Cell Metabolism
實驗材料異丙基 β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒非變性裂解液非變性洗滌液非變性洗脫液苯甲基磺酰氟儀器、耗材超聲勻漿器聚丙烯柱實驗步驟3.1 非變性條件下重組激酶的純化用于磷酸化篩選的激酶必須是可溶和有活性的，且無其他激酶參雜的純化激酶。因此，我們可以從 cDNA 表達文庫中，大量生產和純化組氨酸標記
Significant and unique changes in phosphorylation levels of four leaf phosphoproteins in two apple rootstock genotypes under drought stress.
中科院大連化物所癌細胞遷移抑制蛋白質組磷酸化機制研究取得新進展近日，大連化物所王方軍研究員團隊與美國國家科學院和美國藝術與科學院院士、佐治亞理工學院Mostafa A. El-Sayed教授團隊，以及佐治亞州立大學方寧教授團隊合作，在金納米棒抑制癌細胞擴散相關生物學機理研究方面取得新進展，相關工作發
非磷酸化是測該蛋白的含量，不能知道其活性狀態，抗體磷酸化是測該蛋白的磷酸化水平如何，側重于了解該蛋白的一種活性狀態。很多信號通路的蛋白在受到某些刺激后都是通過改變其磷酸化水平的改變而引起細胞的一系列反應，其蛋白含量并不見得會有多大的變化。首先要說明的就是檢測的蛋白質在你檢測的組織或者細胞中是表達的,
2009年5月23日，質譜沙龍第十九期活動在清華大學生物醫學測試中心舉行。此次到會者除了來自二炮總醫院、西苑醫院、清華大學醫學院、發酵研究院、中科院微生物研究所、空軍總醫院、天津博納艾杰爾科技、AB公司等老朋友外，還有來自戴安公司、東西電子的新朋友。報告后的討論一直洋溢著熱烈的氣氛。
申請課題缺創新點？撰寫論文沒思路？急著畢業時間緊？別怕，對于吉凱，一切都是套路！更有甚者，對于宇宙終極難題：“屌絲如何逆襲白富美？”老司機黃博也有一套經典案例分享給大家。 從前，在生物學研究領域，有一個白富美叫基因組學（Genomics），她有一項強大的技能：DNA測序，憑借這項技能，她完
實驗方法原理 實驗材料 蛋白樣品 實驗步驟
了解肽或蛋白質中磷酸化氨基酸的類型，可以限定可能的磷酸化位點，并因此簡化(對多肽鏈中磷酸化殘基的確認。磷酸化殘基類型通常由磷酸氨基酸分析或磷酸氨基酸特異性免疫檢測確定。磷酸氨基酸分析是對肽鍵進行氣相或液相水解，此水解條件下要至少保留一段磷酸酯鍵完整。 32p標記的磷酸蛋白質或磷酸肽的水解產
實驗材料蛋白樣品實驗步驟了解肽或蛋白質中磷酸化氨基酸的類型，可以限定可能的磷酸化位點，并因此簡化(對多肽鏈中磷酸化殘基的確認。磷酸化殘基類型通常由磷酸氨基酸分析或磷酸氨基酸特異性免疫檢測確定。磷酸氨基酸分析是對肽鍵進行氣相或液相水解，此水解條件下要至少保留一段磷酸酯鍵完整。 32p標記的磷
10月18日，Molecular Biology and Evolution雜志在線發表了中科院系統生物學重點實驗室李亦學研究組與曾嶸研究組、日本國立遺傳研究所Yoshio Tateno教授以及德國國家環境生物學研究中心流行病研究所在中科院系統生物學重點實驗室的進修生Ludwig
2. 總蛋白質熒光法染色熒光染色法結合了檢測靈敏度 (可與銀染法媲美) 與染色流程簡便性 (與考馬斯亮藍染 色 或 Z n 2+ 反染法相同），且其線性定量范圍較比色法大 10?100 倍 。檢測依賴于儀器,需要一個單色激發光源、能將波長較長的發射光從波長較短 (也更亮）的激發光
陸豪杰教授 復旦大學 題目：糖蛋白組的富集和定量新技術 晏光榮副研究員 暨南大學生命與健康工程研究院 題目：基于質譜技術的天然產物genistein調控的抑癌磷酸化信號通路構建 中國科學院生物物理研究所 楊福全研究員 來自中國科學院生物物理研究所的楊福全研究員為
鑒定蛋白質中磷酸化的氨基酸殘基是很有意義的。磷酸化作用發生在蛋白質的絲氨酸、蘇氨酸和酩氨酸時，通過部分的HCl水解及接著進行雙向薄層電泳，可以便利地鑒定 標記的磷酸氨基酸。實驗方法酸水解法磷酸化蛋白質 印度墨汁 HCl 磷酸氨基酸混合物 電泳緩沖液 茚三酮 PVDF膜 烘箱 離心機 離心管 纖維素薄
鑒定蛋白質中磷酸化的氨基酸殘基是很有意義的。磷酸化作用發生在蛋白質的絲氨酸、蘇氨酸和酩氨酸時，通過部分的HCl水解及接著進行雙向薄層電泳，可以便利地鑒定 標記的磷酸氨基酸。實驗材料磷酸化蛋白質試劑、試劑盒印度墨汁HCl磷酸氨基酸混合物電泳緩沖液茚三酮儀器、耗材PVDF膜烘箱離心機離心管纖維素薄層色譜
最近收到了一條來自讀者的吐槽：你們成天說熬夜不好，但是卻每天晚上十點半才推送，這是誠心不讓我們早睡…… 對不起，我們誠懇道歉（但絕對不改）。不過我們的希望是，大家能看科研結果看困直接睡著（不是 睡好覺到底多重要？我眼前就有一個現成的例子。因為昨天上線了音頻課，亞慧老師半宿沒睡，今天早上來了，
從生理學家的觀點來看，有一個大的心臟并不是一種優點，反而可能是致命的。心臟擴大是擴張型心肌病（DCM）的一個標志，盡管這是一種最常見的遺傳性心肌疾病，醫生卻完全不知道為什么它會發生。但是現在，多倫多大學一項新的研究闡明了DCM的根本分子原因。這項研究結果發表在本周的《PNAS》雜志上，揭示了健康心臟
基于元素標記和等離子體質譜測量的蛋白質定量標記 中國科學院高能物理研究所 王萌博士 首先，來自中國科學院高能物理研究所的王萌博士為大家做了題為《基于元素標記和等離子體質譜測量的蛋白質定量標記》的報告。 已有的蛋白質組學定量方法 蛋白質是生物功能的執行者，它是生命復雜性的起
2013年11月23日-25日，2013年全國無機及同位素質譜學學術會議在江蘇昆山召開，23日下午清華大學教授張新榮教授做題為《ICP-MS在生命科學分析中的應用潛力》的報告，為從事ICP-MS原子光譜分析的與會者打開了廣闊的創新應用思路。 清華大學教授張新榮 作為重要的元素分析手段，ICP