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提取RNA時如何去除DNA的污染的方法：注意實驗室的標準化問題，注意污染的存在，同時嚴格按照說明書上的操作應該沒有問題。發現DNA污染，用DNAse I 消化1小時，37度離心取上清的時候，一定要小心不要取到中間的膜和下面的液體。直接加NaOH溶液與提取液混合攪拌,然后離心就可以了.因為RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,離心后的上清液就不含有DNA了。RNA提取步驟：1. 勻漿處理：① 組織 將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1ml TRIzol，用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10%。② 單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。③ 細胞懸液 離心收集細胞，每5-1......閱讀全文
人類的妊娠效率很低，自然妊娠中只有不到50%的胚胎能夠發育至足月。部分流產胚胎主要是源于胚胎的非整倍體染色體異常，在移植胚胎前鑒定并排除非整倍體胚胎是輔助生殖領域面臨的巨大挑戰。 當前臨床上多采用對植入前胚胎的滋養外胚層進行樣品活檢和遺傳學檢測的方式來分析胚胎細胞的染色體倍性。該方法因涉及侵入
熒光定量PCR實驗指南 一、基本步驟： 1、目的基因（DNA和mRNA）的查找和比對； 2、引物、探針的設計； 3、引物探針的合成； 4、反應體系的配制； 5、反應條件的設定； 6、反應體系和條件的優化； 7、熒光曲線和數據分析；
熒光定量PCR實驗指南一、基本步驟：1、目的基因（DNA和mRNA）的查找和比對；2、引物、探針的設計；3、引物探針的合成；4、反應體系的配制；5、反應條件的設定；6、反應體系和條件的優化；7、熒光曲線和數據分析；8、標準品的制備；二、技術關鍵：1、 目的基因（DNA和mRNA）的查找和比
常規PCR一般注意點：1）PCR模板是關鍵，引物可以優化。制備模板的時候，一定要注意核酸模板的純度和量。純度上要避免雜質和雜蛋白質的混入，同時還要注意添加模板的量，模板很理想的話，不用加太多，加的多了，混進去的雜質機會就多了。當模板的濃度過低,比如低于100個分子時, 引物和模板之間就很難發生反應.
(七)污染 在實際工作中，常見有以下幾種污染類型：擴增片段的污染(產物污染)；天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后，再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
(七)污染 在實際工作中，常見有以下幾種污染類型：擴增片段的污染(產物污染)；天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后，再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
3.8 防止殘余（Carry-over）污染PCR易受污染的影響，因為它是一種敏感的擴增技術。小量的外源DNA污染可以與目的模板一塊被擴增。當前一次擴增產物用來進行新的擴增反應時，會發生共同來源的污染。這稱之為殘余污染。從其他樣品中純化的DNA或克隆的DNA也會是污染源（非殘余污染）。可以在PCR過
3.7 模板濃度起始模板的量對于獲得高產量很重要。對大多數PCR擴增和熒光PCR擴增，104到106個起始目的分子就足以觀測到好的熒光曲線（或在溴化乙錠染色膠上觀察到）。所需的最佳模板量取決于基因組的大小（下表）。舉例說，100ng到1μg的人類基因組DNA，相當于3×104到3×105個分子，足以
分子生物學產品常見問題分析問題原因解決辦法DNA完全沒有被內切酶切割1) 內切酶失活標準底物檢測酶活性2) DNA不純，含有SDS，酚，EDTA等內切酶抑制因子將DNA過柱純化，乙醇沉淀DNA3) 條件不適（試劑、溫度）檢查反應系統是否最佳4) DNA酶切位點上的堿基被甲基化換用對DNA甲基化不敏感
PCR污染是每個實驗室都多多少少會遇到的問題。原因在于，PCR是非常靈敏的一項檢測，100個拷貝之內的靶序列就足以產生陽性擴增，從而容易出現DNA污染導致的假陽性。那么，怎樣遠離PCR的污染呢？ 圖 PCR污染之一瞥 首先，要辨別PCR污染的來源。設立陰陽性對照，有利于檢
實驗概要本實驗介紹了氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心法(即連續梯度法)純化閉環DNA的原理及操作步驟等。實驗原理用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于線性 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。許多年來，純化大量質粒 DNA 的首選方法是
Lab 的經驗和客戶的難題以華聯基因體實驗室的長期以來承接客戶 RNA 檢體的經驗來說，我們經常遇到的問題：（1）RNA 的總量不夠；（2）RNA 有嚴重的鹽類污染；（3）RNA 有嚴重的有機溶劑污染；（4）DNA 污染；（5）樣品降解嚴重。前四項問題都還好解決，只需要再次萃取或進行純化即可解決，但
細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子，均與蛋白質結合成核蛋白（nucleoprotein）。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白（deoxyribonucleoprotein，DNP），RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP）。其中真核生物的DNA
細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子，均與蛋白質結合成核蛋白（nucleoprotein）。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白（deoxyribonucleoprotein，DNP），RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP）。其中真核生物的DNA又有染色體DNA
（四）核酸的濃縮、沉淀與洗滌隨著核酸提取試劑的逐步加入，以及去除污染物過程中核酸分子不可避免的丟失，樣品中核酸的濃度會逐漸下降，及至影響到后面的實驗操作或不能滿足后繼研究與應用的需要時，需要對核酸進行濃縮。沉淀是核酸濃縮最常用的方法，其優點在于核酸沉淀后，可以很容易地改變溶解緩沖液和調整核酸溶液至所
試劑、試劑盒 乙酸銨 ATP 乙醇 甘油 蒸餾水 IPTG Mg
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
下面的方案描述了鳥槍法測序的起始步驟，從靶 DNA 的剪切到用 M13 噬菌體載體構建 DNA 片段文庫，也包括斷裂靶 DNA 的兩種方法--超聲法和噴霧法，以及用 DNA 聚合酶修復片段末端的技術要點。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。試劑、
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合
樣品處理有可能是導致DNA數據庫廣泛污染的最主要原因 2月16日發表在《公共科學圖書館·綜合》（PLoS ONE）期刊上的一份研究報告稱康涅狄格大學的遺傳學家Mark Longo及同事發現由頂級公共測序機構提供的測序結果構建的基因組數據庫中的大約1/5的細菌、植物和非靈長類動物基因
內毒素，即脂多糖或LPS，是革蘭氏陰性菌（如大腸桿菌）細胞膜的組成部分。細菌外膜的外層脂質部分是完全由內毒素分子所構成的。單個大腸桿菌細胞約包含兩百萬個LPS分子，每個LPS分子由疏水的脂質A（lipid A）部分、復雜的糖類殘基陣列部分及負電性的磷酸基團所組成。因此，每個內毒素分子都具有
本方法是分離蛙、海 膽 、被囊動物、蠕蟲和蠅的卵母細胞、受精卵及其胎細胞 RNA 的簡便有效的方法。試劑、試劑盒Triton X-100勻漿緩沖液酚氯仿乙酸鈉乙醇氯化鋰實驗步驟一 材料與設備1)5%TritonX-1002) 勻漿緩沖液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,
試劑、試劑盒 Triton X-100 勻漿緩沖液 酚 氯仿 乙酸鈉 乙醇
試劑、試劑盒 Triton X-100勻漿緩沖液 酚氯仿乙酸鈉 乙醇 氯化鋰實驗步驟 一 材料與設備1)5%TritonX-1002) 勻漿緩沖液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,(PH7.5),5 mmol/LEDTA(pH8.0),0.5%SDS,200ug/ml
PCR需要注意的一些問題擴增長目的片段當擴增大于5kb的目的片段時，可以使用用于超長PCR的酶或酶混合物以獲得zui佳產量）。Taq DNA聚合酶并不能有效擴增較長目的片段（大于5kb），可能是因為其缺少3'-5'外切核酸酶活性，不能糾正dNTP錯誤摻入。錯誤配對的延伸幾
3：裂解液的選擇 – 影響操作方便程度，內源雜質殘留的因素常用的裂解液幾乎都能抑制 Rnase 活性，因此，選擇裂解液的重點是要結合純化方法一起考慮。只有一個例外：高內源酶含量的樣品建議使用含苯酚的裂解液，以增加滅活內源酶的能力。 4：純化方法的選擇 – 影響內源雜質殘留。抽提速度的因素對于干凈的樣
對大部分實驗人員來說，RNA 抽提比基因組 DNA 抽提要困難得多。事實上，現有的 RNA 抽提方法/試劑，如果用于從培養細胞中抽提 RNA，比抽提基因組 DNA 更方便，成功率也更高。那為什么同樣的方法用于組織 RNA 的抽提，總會碰到問題呢？ 組織 RNA 抽提失
對大部分實驗人員來說，RNA 抽提比基因組 DNA 抽提要困難得多。事實上，現有的 RNA 抽提方法/試劑，如果用于從培養細胞中抽提 RNA，比抽提基因組 DNA 更方便，成功率也更高。那為什么同樣的方法用于組織 RNA 的抽提，總會碰到問題呢？組織 RNA 抽提失敗的兩大現象是： RNA 降解和組
丹尼索瓦人是新發現的一支古老型人類，與曾廣泛分布在歐洲的尼安德特人是姐妹群，對現代大洋洲、東亞、南亞和美洲原住人群有遺傳貢獻，是廣泛關注的研究熱點。 此前，蘭州大學和中國科學院青藏高原研究所帶領的研究團隊報道了發現于青藏高原東北部白石崖溶洞的夏河人下頜骨化石的研究成果，利用古蛋白分析方法鑒定其