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    載體兩性電解質等電聚焦電泳的基本原理

    載體兩性電解質等電聚焦電泳的基本原理是利用蛋白質分子或其他兩性分子等電點的不同,在一個穩定、連續的線性的pH梯度中進行蛋白質的分離和分析電泳檢測方法。......閱讀全文

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗             試劑、試劑盒 樣品緩沖液

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗

    對于復雜混合物,如全細胞裂解物或富集的亞細胞組分,通過兩步正交的分離 (orthogonalseperation),二維凝膠 (2D 膠)電泳可以很好地分離成幾百個至上千個單個蛋白質。第一次分離基于電荷,即使用變性等電聚焦電泳; 第二次分離基于表觀分子質量,即使用變性十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗(一)

    試劑、試劑盒 樣品緩沖液羥乙基二硫化物細胞裂解緩沖液SDS-PAGE 現成溶液二硫蘇糖醇碘乙酰胺儀器、耗材 等電聚焦電泳系統二維SDS-PAGE 多凝膠系統恒溫循環器IPG 干膠條溶脹盤上樣杯旋轉搖動混合器實驗步驟 一、等電聚焦的基本原理等電聚焦 (IEF) 是一種能根據分子內的質子接受點的 p

    幾種蛋白質凝膠電泳方法的區別和用途

    1、醋酸纖維素薄膜電泳 :醋酸纖維素薄膜電泳是以醋酸纖維素薄膜為支持物,它是纖維素的醋酸酯,由纖維素的羥基經乙酰化而制成.醋酸纖維素膜薄是一種細密而又薄的微孔膜.醋酸纖維素膜對樣品的吸附性較小,因此,少量的樣品,甚至大分子物質都能得以較高的分辨率.又由于醋酸纖維素薄膜親水性較小,故電滲作用也較小,并

    臨床蛋白電泳及進展/基本知識/概述

    分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。蛋白質為兩性電解質,在不同pH溶液中帶不同的電荷,從而在直流電場中能夠泳動,這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術,并成功地將血清

    臨床蛋白電泳及進展

    分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。蛋白質為兩性電解質,在不同pH溶液中帶不同的電荷,從而在直流電場中能夠泳動,這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術,并成功地將血清蛋

    臨床蛋白電泳及進展/基本知識/概述

    分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。蛋白質為兩性電解質,在不同pH溶液中帶不同的電荷,從而在直流電場中能夠泳動,這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術,并成功地將血清蛋

    電泳的原理、分類和應用

      【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。  1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。 

    等電聚焦(isoelectric focusing)

    等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上,電聚焦的優點是:有很高的分辨率,可將等電點相差0.01-0.02pH單位的蛋白質分開;一般電泳由于受擴散作用的

    電泳技術

    電泳技術簡介 電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。  

    電泳技術:生物化學實驗常用技術-3

    三.凝膠孔徑的調節凝膠孔徑、機械性能(彈性)、透明度等在很大程度上取決于Acr和Bis二者的總濃度T%。T%越大,孔徑越小,機械強度則增加。凝膠的特性是分子篩效應。在聚合前調節單體的濃度來控制凝膠孔徑大小,有利于針對樣品分子大小,增加分辨力。為此可以根據分離樣品分子大小配制不同孔徑的凝膠。一般大孔膠

    生化實驗講義(理論部分)四——電泳技術

    4.1 電泳技術發展簡史  1809年俄國物理學家Рейсе首次發現電泳現象。他在濕粘土中插上帶玻璃管的正負兩個電極,加電壓后發現正極玻璃管中原有的水層變混濁,即帶負電荷的粘土顆粒向正極移動,這就是電泳現象。  1909年Michaelis首次將膠體離子在電場中的移動稱為電泳。他

    等 電 聚 焦

     等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上,電聚焦的優點是:有很高的分辨率,可將等電點相差0.01-0.02pH單位的蛋白質分開;一般電泳由于

    等 電 聚 焦

    等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上,電聚焦的優點是:有很高的分辨率,可將等電點相差0.01-0.02pH單位的蛋白質分開;一般電泳由于受擴散作用的

    電泳技術

    電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。    電泳技術的

    電泳分析常用方法

    (一)醋酸纖維素薄膜電泳 醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄 膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣 品傳導,所以分離速度快,電泳時間短,樣品

    電泳技術(electrophoretic techniques)簡介-3

    (三)等電聚焦電泳技術等電聚焦(isoelectric focusing,IEF)是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由于其分辨率可達0.01pH單位,因此特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。⒈IEF的基本原理 在IEF的電泳中,具有pH梯

    雙向電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)-1

    一、蛋白質組學概論隨著人類基因組計劃的實施,生命科學步入了后基因組時代,出現了不同于以往經典生物實驗科學的全新的研究方式─“生物大科學”。這種生物大科學的核心思想是整體性研究,即以生物體內某類物質為對象進行完整的研究。過去對生命活動的研究僅限于研究細胞內個別的基因或蛋白質,而基因組學和蛋白質組學的目

    電泳技術原理、分類及分析方法(二)

    (二)凝膠電泳以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法 稱為凝膠電泳。其中聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大,對一般蛋白質不起分子篩作用,但適用于分離同

    電泳儀的這些常識你知道嗎?

    電泳儀的這些常識你知道嗎?*節  電泳原理第二節  常用電泳方法第三節  常用電泳儀的基本結構及技術指標       第四節  常用電泳儀簡介第五節  毛細管電泳第六節  電泳儀的

    雙向電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)-3

    2.[操作步驟]1. 將標準品BSA(5mg/ml)先稀釋成0.5 mg/ml,2. 按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl分別加到96孔板中,加DDW補足到20μl。3. 加適當體積樣品(4μl)到96孔板的樣品孔中,加DDW到20μl。4. 各孔加入200μl G-250染色液

    等電聚焦(isoelectric focusing,IEF)電泳技術

    等電聚焦(isoelectric focusing,IEF)是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由于其分辨率可達0.01pH單位,因此特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。⒈IEF的基本原理 在IEF的電泳中,具有pH梯度的介質其分布是從陽極

    雙向電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)-4

    由于合成載體兩性電解質(synthetic carrier ampholyte SCA)是通過復雜的合成過程得到的,其重復性很難控制,由此不同批次之間會存在很大的變化,同一蛋白質在不同批 圖-1. 等電聚焦的“聚焦效應” 次等電聚焦中所出現的位置有所偏差,這樣作為雙向電泳中的一向時就限

    蛋白質的雙向電泳實驗_等電聚焦法

    蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根據蛋白質的等電點不同進行分離; 第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS-PAGE ) , 按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后, 可以得到蛋白質分子的等電點和分子量信息。本實驗目的是

    載體兩性電解質等電聚焦電泳技術介紹

      載體兩性電解質等電聚焦電泳技術是蛋白質理化性質研究的核心技術之一,載體兩性電解質等電聚焦電泳的基本原理是利用蛋白質分子或其他兩性分子等電點的不同,在一個穩定、連續的線性的p H梯度中進行蛋白質的分離和分析電泳檢測方法。  是1966年由2位瑞典科學家Harry Rilbe和O

    IEF分離蛋白質

    實驗概要等電點聚焦電泳(IEF)就是在電泳膠中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質在此體系中泳動時,不同的蛋白質即聚焦于與其等電點相當的pH位置上,電聚焦的優點是:有很高的分辨率,可將等電點相差0.01-0.02pH單位的蛋白質分開,由于I

    高效毛細管電泳色譜儀性能特點歸納

      高效毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼高效液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。  C

    毛細管電泳色譜儀分離分析模式詳解

    分析模式詳解。毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,正成為生物樣品zui重要的分離分析手段。CE分離分析模式有毛細管電色譜、毛細管區帶電泳

    Nature報道一種新型電泳技術:液晶電泳

          摘要: 來自美國肯特州立大學(Kent State University)的研究人員發現了一種新型電泳技術:向列液晶(nematic liquid crystal)電泳技術,這一技術未來也許將為生命科學領域提供新穎的分離技術,這一研究成果

    毛細管電泳技術的簡介及其應用

    毛細管電泳的基本原理CE指以高壓電場力為驅動力,以毛細管為分離通道,依據樣品中各組分毛細管之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的一類液相分離技術。其儀器裝置簡圖如下圖所示,其結構包括高壓電源、毛細管、檢測器各一及兩個緩沖液貯瓶。CE所用的石英毛細管柱,在pH>3情況下,其內表面帶負電,和溶液接

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