鹽析少量的鹽(如硫酸銨、硫酸鈉、氯化銨等)能促進蛋白質的溶解。當向蛋白質中加入的鹽溶液達到一定濃度時,反而使蛋白質的溶解度降低而從溶液中析出,這種作用稱為鹽析。蛋白質的鹽析是一個可逆過程,鹽析出的蛋白質稀釋后仍能溶解,并不影響蛋白質的活性。采用多次鹽析和溶解,可以分離提純蛋白質。制肥皂(高級脂肪酸鈉)時要加入飽和食鹽水降低在水中溶解度使肥皂析出,也屬于鹽析。......閱讀全文
(一)原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,簡稱IgG)的主要成分之一,分子量約為15萬~16萬,沉降生活費數約為7s。IgG是動物和人體血漿的重要成分之一。血漿蛋白質的成分多達70余種,要從血漿中分離出IgG,首先要進行盡可能除去其他蛋白質成分的粗分離程序,使IgG在樣品中比例大為
原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,簡稱IgG)的主要成分之一,分子量約為15萬~16萬,沉降生活費數約為7s。IgG是動物和人體血漿的重要成分之一。血漿蛋白質的成分多達70余種,要從血漿中分離出IgG,首先要進行盡可能除去其他蛋白質成分的粗分離程序,使IgG在樣品中比例大為增高,
1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用。4.非離子多聚體沉淀法
表2-1 室溫下由S1提高到S2時每升加固體硫酸銨的克數 0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242
在生化制備中,沉淀主要用于濃縮目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑:1.鹽析法多用于各種蛋白質和酶的分離純化。2.有機溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。3.等電點沉淀法用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物
1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。 3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合
鹽析法是粗分離IgG的重要方法原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,簡稱IgG)的主要成分,分子量約為15萬~16萬,沉降生活費數約為7s。IgG是動物和人體血漿的重要成分。血漿蛋白質的成分多達70余種,要從血漿中分離出IgG,首先要進行盡可能除去其他蛋白質成分的粗分離程序,使IgG
在生化制備中,沉淀主要用于濃縮目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑: 1.鹽析法 多用于各種蛋白質和酶的分離純化。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。 3.等電點沉淀法 用于氨基酸、
以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個
1.根據分子大小不同進行分離純化蛋白質是一種大分子物質,并且不同蛋白質的分子大小不同,因此可以利用一些較簡單的方法使蛋白質和小分子物質分開,并使蛋白質混合物也得到分離.根據蛋白質分子大小不同進行分離的方法主要有透析、超濾、離心和凝膠過濾等.透析和超濾是分離蛋白質時常用的方法.透析是將待分離的混合物放
鹽析萃取是利用物質在有機溶劑與鹽構成的互不相溶的兩相中的溶解度不同而實現分離的方法,已用于多種蛋白質分離,如脂肪酶,重組人血清白蛋白,免疫球蛋白G,淀粉酶,纖維素酶等,其對蛋白質結構、活性具有良好的保護作用,且收率及除雜效果較好。除此之外,鹽析萃取特有的分相快,易操作,高效率,低毒性,易回收,低成本
確定沉淀蛋白質所需硫酸銨濃度的方法將少量樣品冷卻到0~5℃,然后攪拌加入固體硫酸銨粉末,見蛋白質產生沉淀時,離心除去沉淀,分析上清液確定所要蛋白質的濃度,如它仍在溶液中則棄去沉淀,再加更多的硫酸銨于上清液中,直到產生蛋白質沉淀時止。以所要提取的蛋白質在溶液中的濃度對硫酸銨濃度作圖,得沉淀曲線,找出蛋
1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用。4.非離子多聚體沉淀法
蛋白質提取液中,除包含所需要的蛋白質(或酶)外,還含有其它蛋白質、多糖、脂類、核酸及肽類等雜質。除去的方法有:1)核酸沉淀法該法可用核酸沉淀劑和氯化錳、硫酸魚精蛋白或鏈霉素等。必要時也可用脫氧核糖核酸酶除去核酸。即在粗勻漿中加入少量DNase,于4℃保溫30~60min,可使DNA 降解為足夠小的碎
二、蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化方法很多,主要有:(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中
二、蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化方法很多,主要有:(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析 中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶
(一)根據配體特異性的分離方法-親和色譜法 親和層析法(aflinity chromatography)是分離蛋白質的一種極為有效的方法,它經常只需經過一步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據某些蛋白質與另一種稱為配體(Ligand)的分子能特異
選擇材料及預處理以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方法分離
選擇材料及預處理以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方法分離
選擇材料及預處理 以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到
蛋白質的分離純化方法很多,主要有:(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析 中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子
一,蛋白質(包括酶)的提取 大部分蛋白質都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液,少數與脂類結合的蛋白質則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機溶劑中,因些,可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質及酶。(一)水溶液提取法 稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質最常用的溶劑,通常用量是原材料體積的1
在生化制備中,沉淀主要用于濃縮目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑:1.鹽析法多用于各種蛋白質和酶的分離純化。2.有機溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。3.等電點沉淀法用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物
血漿蛋白由數百種具有廣泛生理功能的蛋白質組成,其中白蛋白與免疫球蛋白占據著血液制品中主要的市場份額。血漿成分十分復雜,目前工業上血漿蛋白的分離方法主要采用有機溶劑沉淀法、鹽析法和柱層析,但這些方法尚存在著分離環境要求低溫、分離純化步驟繁瑣、純度和收率低等缺點。本論文開展了親水性有機溶劑鹽析萃取偶合柱
鹽析法——多用于各種蛋白質和酶的分離純化在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出,這種方法稱為鹽析.常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等.各種蛋白質鹽析時所需的鹽濃度及pH不同,故可用于對混和蛋白質組分的分離.例如用半飽和的硫酸銨來沉淀出血清中的球蛋白,飽和硫酸銨可以使血清
鹽析法——多用于各種蛋白質和酶的分離純化在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出,這種方法稱為鹽析.常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等.各種蛋白質鹽析時所需的鹽濃度及pH不同,故可用于對混和蛋白質組分的分離.例如用半飽和的硫酸銨來沉淀出血清中的球蛋白,飽和硫酸銨可以使血清
蒸餾利用液體混合物中各組分揮發性的不同,將它們分離的方法和過程,它可以將液體混合物中各組分部分地或全部地分離。除了簡單的蒸餾技術外,還有分餾、減壓蒸餾、共沸蒸餾、水汽蒸餾、萃取蒸餾、等溫蒸餾和亞沸點蒸餾等。升華固態物質不經液態直接轉變成氣態的現象,可作為一種應用固-氣平衡進行分離的方法。可分為常壓升
1 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方
離子交換樹脂法處理有機酸廢液的基木原理是利用某些離子交換樹脂可從廢酸溶液中吸收有機酸而排除無機酸和金屬鹽的功能來實現不同酸及鹽之間分離的一種方法。 鹽析循環利用 所謂鹽析就是使用大量飽和食鹽水將廢酸中的各種有機雜質幾乎全部析出。但是這種方法會產生鹽酸,影響廢酸中硫酸的回收利用,因此研究了用硫酸
摘 要 綜述了近幾年來多肽類物質的提取分離與分析方法,主要包括高效液相色法、電泳、質譜及核磁共振等方法在肽類物質研究中的最新應用進展。 多肽類化合物廣泛存在于自然界中,其中對具有一定生物活性的多肽的研究,一直是藥物開發的一個主要方向。生物體內已知的活性多肽主要是從內分泌腺組織器官、分泌細胞和體