DNA測序技術自動測序法介紹
自動測序法基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物,使得四種熒光染料的測序PCR產物可在一根毛細管內電泳,從而避免了泳道間遷移率差異的影響,大大提高了測序的精確度。由于分子大小不同,在毛細管電泳中的遷移率也不同,當其通過毛細管讀數窗口段時,激光檢測器窗口中的CCD(charge-coupled device)攝影機檢測器就可對熒光分子逐個進行檢測,激發的熒光經光柵分光,以區分代表不同堿基信息的不同顏色的熒光,并在CCD攝影機上同步成像,分析軟件可自動將不同熒光轉變為DNA序列,從而達到DNA測序的目的。分析結果能以凝膠電泳圖譜、熒光吸收峰圖或堿基排列順序等多種形式輸出。它是一臺能自動灌膠、自動進樣、自動數據收集分析等......閱讀全文
DNA測序技術自動測序法介紹
自動測序法基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物,使得四種熒光染料的測序PCR產物
DNA測序——自動測序法
DNA測序可用于:(1)測定未知序列;(2)確定重組DNA的方向與結構;(3)對突變進行定位和鑒定比較研究。實驗方法原理ABI ?PRISM 310型基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單
DNA測序自動測序法簡介
基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物,使得四種熒光染料的測序PCR產物可在一
DNA測序的方法自動測序法
基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物,使得四種熒光染料的測序PCR產物可在一根毛
DNA測序方法自動測序法的操作步驟
一、準備工作1. BigDye測序反應試劑盒 主要試劑是BigDye Mix,內含PEZL四色熒光標記的ddNTP和普通dNTP,AmpliTaq DNA polymerase FS,反應緩沖液等。2. pGEM-3Zf (+) 雙鏈DNA對照模板 0.2 g/L,試劑盒配套試劑。3. M13(-2
DNA測序方法中自動測序法的操作步驟
基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司專利的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物,使得四種熒光染料的測序PCR產物可在一根毛
DNA測序的方法自動測序法的操作步驟
一、準備工作1. BigDye測序反應試劑盒 主要試劑是BigDye Mix,內含PEZL四色熒光標記的ddNTP和普通dNTP,AmpliTaq DNA polymerase FS,反應緩沖液等。2. pGEM-3Zf (+) 雙鏈DNA對照模板 0.2 g/L,試劑盒配套試劑。3. M13(-2
高通量DNA自動測序儀技術指標
高通量DNA自動測序儀是一種用于信息科學與系統科學領域的分析儀器,于2012年3月15日啟用。 技術指標 1.雙光速雙側激光和后置超薄CCD檢測成像系統 2.內置一體化自動進樣器及樣品板儲器。 3.內置樣品板條形碼自動識別。 4.100次(9600個樣品)運行試劑一次性上機。 5.自
DNA測序技術的介紹
DNA測序(DNA sequencing,或譯DNA定序)是指分析特定DNA片段的堿基序列,也就是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)與鳥嘌呤的(G)排列方式。快速的DNA測序方法的出現極大地推動了生物學和醫學的研究和發現。 在基礎生物學研究中,和在眾多的應用領域,如診斷,生物技術,法醫
DNA測序技術的介紹
DNA測序技術,又叫基因測序技術。 人類基因組這部由A、T、G、C四個字母組成的卷帙浩繁的生命天書如同一座寶庫,保藏著幾千年來人們迫切想知道的秘密,DNA測序技術就好似“芝麻開門”這樣的咒語,是我們打開寶庫的金鑰匙。世界上第一個測定DNA序列的方法是由英國生化學家弗雷德里克·桑格爾發明的。自此
DNA測序技術的測序反應的介紹
1. 對于每組測序反應,標記四個0.5ml eppendorf管(G、A、T、C)。每管加入2ml適當的d/ddNTP混合物(d/ddNTP Mix)。各加入1滴(約20ml)礦物油,蓋上蓋子保存于冰上或4℃備用。 2. 對于每組四個測序反應,在一個eppendorf管中混合以下試劑: (1
DNA測序技術的分類介紹
高通量測序技術(High-throughput sequencing)又稱“下一代”測序技術("Next-generation" sequencing technology),以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定和一般讀長較短等為標志。 根據發展歷史、影響力、測序原理和技術不同
DNA測序的測序技術
高通量測序技術(High-throughput sequencing)又稱“下一代”測序技術(Next-generation sequencing technology),以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定和一般讀長較短等為標志。根據發展歷史、影響力、測序原理和技術不同等,主要有以
DNA測序技術
目前還有一種基于半導體芯片的新一代革命性測序技術——Ion Torrent。該技術使用了一種布滿小孔的高密度半導體芯片, 一個小孔就是一個測序反應池。當DNA聚合酶把核苷酸聚合到延伸中的DNA鏈上時,會釋放出一個氫離子,反應池中的PH發生改變,位于池下的離子感受器感受到H+離子信號,H+離子信號再直
DNA測序技術的材料相關介紹
待測已提純的DNA,可為單鏈,也可為雙鏈。 科學家在一個蝕刻有納米結構的微陣列芯片上放置了數以千計的波導管。這是一種微型、中空的金屬管,直徑大約20納米,體積大約是1毫微微微升,一個DNA分子外加一個DNA多聚酶分子便可將管內空間占滿。這樣一來,僅在一塊小小的芯片上,就能同時進行數千個測序反應
DNA測序技術的測序規律
生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點,但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每一個堿基出現在可變終止端的機會均等,因此上述每一組產物都是一些寡核苷酸混合物,這些寡核苷酸的長度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。在可以區分長度僅差一個核苷酸
DNA測序技術的測序原理
化學修飾法測序原理化學試劑處理末段DNA片段,造成堿基的特異性切割,產生一組具有各種不同長度的DNA鏈的反應混合物,經凝膠電泳分離。化學切割反應:包括堿基的修飾,修飾的堿基從其糖環上轉移出去在失去堿基的糖環處DNA斷裂。Sanger法測序的原理就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物
DNA測序EDF膠片顯影法的介紹
使用EDF膠片可增強測序條帶的對比度,如果測序膠上條帶很淡,我們建議把數據轉移至EDF膠片,銀染膠在其影像轉移至EDF膠片之后可增強條帶可讀性。 1. 在暗室內,將染色過的粘于玻璃板的凝膠(膠面向上)置于熒光燈箱上。如有合適的漫射板,亦可用白燈箱,為確保曝光時間,用一小條EDF膠片曝光不同時間
熒光法DNA測序的方法介紹
中文名稱熒光法DNA測序英文名稱fluorescencebased DNA sequencing定 義通過四種不同熒光試劑分別標記四種雙脫氧核苷酸進行DNA測序的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
DNA測序技術綜述
1977年,Sanger團隊完成人類歷史上第一個基因組序列噬菌體X174測序,并在3年后,成為“兩度”獲得諾貝爾化學獎的人(前一次是1958年)。Sanger測序技術誕生,讓DNA片段的測序成為現實,此后這一技術獨領風騷20多年。再后來的20年里,二代測序走向成熟、三代測序嶄露頭角,DNA測序技術以
關于DNA測序技術的測序凝膠的銀染介紹
染色過程要求凝膠浸在塑料盤中。因而至少使用兩個盤子,大小與玻璃板類似。在盤中加入新鮮溶液之前須用高質量的水洗滌盤子。 1.電泳完畢后用一個塑料片子小心地分開兩板,凝膠應該牢固地附著在短玻璃板上。 2. 固定凝膠:將凝膠(連玻璃板)放入塑料盤,用固定/停止溶液浸沒,充分振蕩20分鐘或直至樣品中
DNA測序技術的測序的規律
生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點,但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每一個堿基出現在可變終止端的機會均等,因此上述每一組產物都是一些寡核苷酸混合物,這些寡核苷酸的長度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。在可以區分長度僅差一個核苷酸
關于DNA測序技術的設備相關介紹
DNA測序儀,性能特點,自動化程度高,提供連續、無需監控的操作,自動灌膠、上樣、電泳分離、檢測及數據分析,可連續運行24小時無需人工干預。樣品分析量大,一束毛細管可同時對16個樣品進行全自動分析,一天可完成數百個樣品的測序或片段分析工作。先進的熒光檢測系統,采用光柵分光,CCD攝像機成像技術,實
關于DNA測序技術的試劑的介紹
(1)SILVER SEQUENCETM DNA測序試劑盒。 (2)丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺儲備液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉雙丙烯酰胺 W/V):95g丙烯酰胺,5g甲叉雙丙烯酰胺溶于140ml 雙蒸水中,定容至250ml,0.45mm過濾器過濾后,貯于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周
DNA測序技術的技術原理
化學修飾法測序原理化學試劑處理末段DNA片段,造成堿基的特異性切割,產生一組具有各種不同長度的DNA鏈的反應混合物,經凝膠電泳分離。化學切割反應:包括堿基的修飾,修飾的堿基從其糖環上轉移出去在失去堿基的糖環處DNA斷裂。Sanger法測序的原理就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物
DNA測序的測序原理介紹
化學修飾法測序原理 化學試劑處理末段DNA片段,造成堿基的特異性切割,產生一組具有各種不同長度的DNA鏈的反應混合物,經凝膠電泳分離。化學切割反應:包括堿基的修飾,修飾的堿基從其糖環上轉移出去在失去堿基的糖環處DNA斷裂。 Sanger法測序的原理 就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定
DNA的測序技術2
一:儀器:離心機,PCR儀,高壓電泳儀, 測序槽 ,搖床 ,染色,脫色缸易生物儀器庫:http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html易生物試劑庫:http://www.ebioe.com/yp/product-list-43.html二:試劑:測序反應試劑
DNA的測序技術4
3,染色,將膠板移至染色液中,搖床震蕩30分鐘。 4,凝膠洗滌,將染色后的膠板,放入超純水中2-3秒后,迅速取出并豎起控水,隨后把膠板放入預冷的顯影液中(用量為總量的1/2),充分震蕩,當第一批條帶后,把膠板移入預冷的另一半顯影液中,震蕩,直至全部條帶出現。 注意:從放入水到放入
DNA的測序技術3
(二):測序膠的制備1:玻璃板的處理A,長板(不帶凹槽、反硅化處理,粘膠板) a,2N NaOH浸泡1小時以上,自來水沖洗,海綿或軟布蘸洗滌劑將板清洗干凈,自來水沖洗掉全部洗滌劑,無離子水中過三遍,晾干。b, 在1ml95%乙醇,0.5%冰乙酸中加入5μl粘合硅烷。c, 用b中所配溶液浸
DNA的測序技術1
DNA序列的正確測定,是進行基因結構和功能分析,繪制基因圖譜、轉基因檢測等方面工作的重要前提。同時DNA測序技術為快速、簡捷分析蛋白序列及結構提供了工具。DNA序列測定技術是在DNA內切酶、合成酶的應用,基因克隆及亞克隆技術,高分辨率聚丙烯酰胺變性膠電泳技術等基礎上建立起來的。這些技術主要有三部分組