單克隆抗體的研究進展
單克隆抗體藥物的發展起源于1975年，雜交瘤技術的問世使大量制備均一的鼠源單克隆抗體成為可能。1986年第一個抗移植后免疫排斥反應的鼠源單克隆抗體muromonab-CD3(OKT3)，經美國食品藥品監督管理局（Food and Drug Administration, FDA）批準上市，[2]但是來源于鼠源淋巴細胞雜交瘤的抗體被人的免疫系統識別，會引起嚴重的人抗鼠抗體反應（human anti-mouse antibody,HAMA），不僅使治療性單抗半衰期變短，療效減弱，有時還會引起嚴重的不良反應。[3] 單克隆抗體藥物的發展在1988年到1993年間陷入低谷。隨著重組DNA技術的發展，各種抗體人緣化技術迅速發展，單克隆抗體藥物經歷了人鼠嵌合單抗、人源化單抗階段。隨后出現的噬菌體展示文庫技術和轉基因小鼠技術，使全人源單抗的產生成為可能，2002年第一個全人源抗體阿達木單抗上市。 單克隆抗體在醫藥治療上有廣泛的前景，被......閱讀全文
單克隆抗體
·?????????Tips and hints for the storage of antibodies?(Synaptic Systems) ·?????????Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose(KPL)
單克隆抗體培養—含有單克隆抗體的腹水制備
實驗步驟材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)裸 鼠 ， 6?8 周齡，無 特 殊 病 原（SPF)，或者是同基因型宿主（注射小鼠-小鼠雜交瘤時）姥 鮫 焼（Pristane， 2,6，10，14-四甲基十五焼； Aldrich 公司提供）雜 交 瘤（單 元 1.3)添 加 10 mmol/L H
單克隆抗體技術
實驗原理 B淋巴細胞能夠產生抗體，但在體外不能進行無限分裂；而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代，但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后，用一特殊選擇培養 基（HAT）阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路，而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存，且既能產生抗體，又能無限增殖，并以此生產抗
單克隆抗體技術
實驗概要顯微鏡下觀察血片或骨髓片，找出異常細胞。實驗原理B淋巴細胞能夠產生抗體，但在體外不能進行無限分裂；而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代，但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后，用一特殊選擇培養基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路，而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存，且既能產
單克隆抗體技術
實驗概要顯微鏡下觀察血片或骨髓片，找出異常細胞。實驗原理B淋巴細胞能夠產生抗體，但在體外不能進行無限分裂；而骨髓瘤細胞可以在體外無限傳代，但不能產生抗體。將這兩種細胞融合后，用一特殊選擇培養基(HAT)阻斷正常細胞或自體融合細胞的DNA合成通路，而雜交瘤細胞可利用補救通路合成DNA得以生存，且既能產
單克隆抗體的純化實驗——單克隆抗體的純化實驗
1~5 ml/min?的速度上樣于蛋白A-Sepharose柱，用Tris緩沖液洗柱子直至所有的未結合的蛋白都被洗脫，采用A280監測。?3. ?依次用2~3倍柱床體積的檸檬酸緩沖液、乙酸緩沖液液以及甘氨酸·Cl緩沖液連續洗脫結合蛋白，洗脫下的蛋白直接接入裝有中和緩沖液的管中，中和緩沖液的體積應為所
單克隆抗體的簡介
1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上，創建立雜交瘤技術，他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合，成為雜交細胞系，既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性，又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細
單克隆抗體的概念
單克隆抗體單克隆抗體（Monoclonal Antibody，McAb）即單個B淋巴細胞克隆所分泌的抗體。抗體主要由機體的B淋巴細胞合成，每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫，即克隆
單克隆抗體的制備
實驗方法原理使用聚二乙醇（PEG ) 將抗原免疫過的小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞（P3. 653 )進行融合。用 HAT 選擇性培養基篩選雜合的克隆株（雜交瘤細胞）。融合后 10~14 天用 ELISA 對上清液進行篩査（ELISA 篩査方法必須在融合前就已掌握），然后對理想的雜交瘤細胞加以擴增、冷凍和
單克隆抗體的制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 使用聚二乙醇（PEG ) 將抗原免疫過的小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞（P3. 653 )進行融合。用 HAT 選擇性培養基篩選雜合的克隆株（雜交瘤細胞）。融合后 10~14 天用 ELISA 對上清液進行篩査（ELISA 篩