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  • 抗血清的制備方法和過程

    1、動物的選擇羊、馬、雞、猴、豚鼠,都是常用的免疫動物,在實驗中,選擇動物時應考慮抗原與動物的種屬關系、抗原性質與動物種類、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及動物個體等因素。免疫用動物應選適齡、健壯.最好為雄性。最常用的實驗動物是家兔,一般選擇選擇年齡在6個月以上當年繁殖的♂性,體重2 ~3公斤,健康家兔三只,免疫前用金屬編號牌固定兔耳,或用染料涂沫在動物的背部,作出明確的標記。2、抗原制備1)抗原稀釋:用滅菌生理鹽水將抗原稀釋為2mg/ml,于免疫前一天加入溶液,使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI,鏈霉素1000 UI,放4℃過夜(一般可不加青、鏈霉素)次日取出,與佐劑混合制成乳劑后用于動物免疫。免疫原的注射劑量應考慮其抗原性的強弱、分子量大小、動物的個體狀態和免疫時間。對于純的可溶性抗原的免疫劑量,通常小鼠首次抗原劑量為50~100μg/次,大鼠為100~200μg/次,兔為100μg ~1 mg/次,合成免疫原為2 ......閱讀全文

    抗血清的制備方法和過程

    1、動物的選擇羊、馬、雞、猴、豚鼠,都是常用的免疫動物,在實驗中,選擇動物時應考慮抗原與動物的種屬關系、抗原性質與動物種類、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及動物個體等因素。免疫用動物應選適齡、健壯.最好為雄性。最常用的實驗動物是家兔,一般選擇選擇年齡在6個月以上當年繁殖的♂性,體重2 ~3公斤,

    抗血清的制備

    1、動物的選擇羊、馬、雞、猴、豚鼠,都是常用的免疫動物,在實驗中,選擇動物時應考慮抗原與動物的種屬關系、抗原性質與動物種類、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及動物個體等因素。免疫用動物應選適齡、健壯.最好為雄性。最常用的實驗動物是家兔,一般選擇選擇年齡在6個月以上當年繁殖的♂性,體重2 ~3公斤,

    抗血清的制備

    一、目的:1、了解抗血清制備的基本過程:2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理:抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應,一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(A

    抗血清制備的原理

    抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應,一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenic determinant),另一方面取決于機體的免疫狀態,當具備以

    抗血清的制備(一)

    一、目的: ?1、了解抗血清制備的基本過程: ?2、掌握抗血清的收集和保存方法。 ?二、原理: ?抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。 ?一種抗原能否引起抗體生成反應,一

    抗血清的制備(二)

    3、免疫途徑,劑量和免疫周期 ?抗原注射途徑可根據不同抗原及試驗要求,選用皮內、皮下、肌肉、靜脈或淋巴結內等不同途徑注入抗原進行免疫。一般常采用背部、足掌、淋巴結周圍、耳后等處皮內或皮下多點注射。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2~4周。常規免疫方案為抗原加CFA皮下多點注射進行基礎免疫;再以

    免疫球蛋白抗血清制備方法

    免疫球蛋白抗血清制備方法此法用于制備間接法抗抗體。因抗原為可溶性,故多需加佐劑。(1)淋巴結注射法1)選擇體重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),編號;2)在家兔兩后腳掌共注射活卡介苗,50mg(約0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮內0.2mL)。7~10d后,鼠或國窩處淋巴結腫大如黃豆或

    多克隆抗血清的制備

    材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)家兔、大鼠、小鼠或合適品系的倉鼠弗 氏 完 全 佐 劑(CFA; Sigma)含 1?2 mg/m l 純化蛋白抗原的 PBS 溶液:吸取其中 10?20 Mg,在考馬斯亮藍染色的 SDS-聚丙烯酰胺凝膠上分析未見有污染的條帶VPBS弗 氏 不 完 全 佐 劑

    制備互補DNA的方法和過程

    制備互補DNA,往往需要先分離從目的基因轉錄來的mRNA.如果該基因編碼的蛋白質是細胞中的主要蛋白質,則此基因的產物是總mRNA的主要組成部分。就胰島B細胞而論,此細胞含有高水平胰島素前體mRNA,后者有時可以沉淀正在翻譯的mRNA的核糖核蛋白體,如果用特異抗體結合所表達的蛋白質(抗原),則可從沉淀

    多克隆抗血清的制備1

    首要的問題是需要制備多克隆抗體還是單克隆抗體。多克隆抗體的優勢在于可在多種不同生物種系中制備,花費精力較少。另外 ,多克隆抗體特別適用于分析變性蛋白質以及免疫沉淀法和免疫印跡法。作者:J.E.科利跟等,譯者:曹雪濤等,本實驗來自「精編免疫學實驗指南」—使用弗氏佐劑制備多克隆抗體的免疫接種法實驗步驟材

    抗血清制備法生化檢驗

    抗血清制備法:抗血清指含有抗體的血清。傳統的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動物,數十天后或數月后,采集動物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應用前必須作效價和特異性鑒定及純化。(一)免疫動物的選擇免疫動物的選擇基本要求:1.抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。2.動物必須適齡、健壯、無感染、

    兔多克隆抗血清的制備實驗

    實驗材料 抗原試劑、試劑盒 PBS乙醇儀器、耗材 注射針頭注射器培養箱實驗步驟 1. ?取2 ml 的弗氏完全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射針頭,排出注射器中的氣泡。?2. ?將兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的頸背部毛皮,另一只

    抗血清的制備的免疫程序有哪些?

    1.免疫原的劑量:免疫原劑量過大或過小都可使動物產生免疫耐受,在一定劑量范圍內,免疫原劑量越大,產生的抗體效價越高。2.免疫途徑:有皮內、皮下、肌內、靜脈、腹腔、淋巴結等途徑。皮內或皮下免疫時一般采用多點注射。初次免疫一般選擇皮內接種,加強免疫和顆粒性抗原一般選擇靜脈注射。寶貴抗原可選擇淋巴結內微量

    抗血清的保存方法

    (1)2~8℃保存:用于短期保存(2)冷凍保存:是常用的抗體保存方法將抗體分為小包裝,在-80~-20℃保存,一般可保存5年,效價不會明顯下降,但應避免反復凍融。(3)真空干燥保存:用真空凍干機進行干燥,封裝后可長期保存,醫|學教育網搜集整理一般在冰箱中可保存5~10年。

    抗血清的鑒定方法

    1.抗體特異性的鑒定常用雙向免疫擴散法。(1)粗抗原及純抗原之間皆有一條沉淀線,且兩者互相融合,則已產生單價特異性抗體;(2)若純化抗原出現一條,而粗抗原出現多條線,且一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接,需去除雜抗。(3)若不出現沉淀線,表示免疫失敗。2.抗體效價的測定顆粒性抗原采用凝集試驗,可溶性抗原

    抗血清的制備免疫程序知識點

    1.免疫原的劑量:免疫原劑量過大或過小都可使動物產生免疫耐受,在一定劑量范圍內,免疫原劑量越大,產生的抗體效價越高。2.免疫途徑:有皮內、皮下、肌內、靜脈、腹腔、淋巴結等途徑。皮內或皮下免疫時一般采用多點注射。初次免疫一般選擇皮內接種,加強免疫和顆粒性抗原一般選擇靜脈注射。寶貴抗原可選擇淋巴結內微量

    制備互補DNA的方法過程

    制備互補DNA,往往需要先分離從目的基因轉錄來的mRNA.如果該基因編碼的蛋白質是細胞中的主要蛋白質,則此基因的產物是總mRNA的主要組成部分???。就胰島B細胞而論,此細胞含有高水平胰島素前體mRNA,后者有時可以沉淀正在翻譯的mRNA的核糖核蛋白體,如果用特異抗體結合所表達的蛋白質(抗原),則可

    兔多克隆抗血清的制備實驗——耳動脈放血

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?準備用于放血的家兔(見基本方案)?2. ?將靠近家兔頭部的半只耳朵托在梅指和食指上,用中指和無名指彎曲剩余的半只耳朵使之下垂,以便使血液隨重力下流,用一個18G注射用針頭(不帶注射器)沿著兔耳中動脈進針,針尖指向兔耳根部

    滲析膜的制備方法及過程

    1.蒸餾法,按蒸餾器皿可分為玻璃、石英蒸餾器,金屬材質的有銅、不銹鋼和白金蒸餾器等.按蒸餾次數可分為一次、二次和多次蒸餾法.此外,為了去掉一些特出的雜質,還需采取一些特殊的措施.例如預先加入一些高錳酸鉀可除去易氧化物;加入少許磷酸可除去三價鐵;加入少許不揮發酸可制取無氨水等.蒸餾水可以滿足普通分析實

    抗血清有哪些鑒定方法?

    1.抗體特異性的鑒定常用雙向免疫擴散法。(1)粗抗原及純抗原之間皆有一條沉淀線,且兩者互相融合,則已產生單價特異性抗體;(2)若純化抗原出現一條,而粗抗原出現多條線,且一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接,需去除雜抗;(3)若不出現沉淀線,表示免疫失敗。2.抗體效價的測定?顆粒性抗原采用凝集試驗,可溶性抗

    兔多克隆抗血清的制備實驗——皮內注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?按基本方案中步驟1制備免疫兔用的抗原。?2. ?牢牢地抓住兔子,剃除其背毛,用70%乙酵消毒其暴露的皮膚。用拇指和食指將需要免疫注射的區域的皮膚張開,用3 ml 注射器帶24G注射針頭以相對皮膚30。的角度進針(針尖的斜

    兔多克隆抗血清的制備實驗——肌肉內注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?取2 ml 的弗氏完全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射針頭,排出注射器中的氣泡。?2. ?將兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的頸背部毛皮,另一只手托住兔

    抗肽的抗血清制備及從多肽庫篩選B細胞和T細胞抗原表位

    采用合成肽組合庫鑒定 B 細 胞 和 T 細胞的表位實驗步驟?基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 篩選抗體抑制劑材 料肽或蛋白質抗原目的抗原的單克隆抗體(M A b )1 % (m/V) BS A / P B S (見附錄 1PBS)六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m

    抗肽的抗血清制備及從多肽庫篩選B細胞和T細胞抗原表位

    使用雙功能團試劑將合成肽偶聯至載體蛋白實驗步驟基 本 方 案 使用雙功能團試劑將合成肽偶聯至載體蛋白材 料家兔肽-載體的連接體(單 元 13. 1)P B S , p H 7. 5弗 氏 完 全 佐 劑(F C A ; Pierce Biotechnology)弗氏不完全佐劑1 . 收 集 血 樣(

    外植體的來源和制備方法

    制備原生質體的供體材料來源于植物的各類組織、器官、細胞或是由之建立的細胞無性系。其中使用最多的是各種植物的葉片、愈傷組織和懸浮培養細胞,次之是根尖、莖尖和子葉。所用植物材料的生理狀態(如光照時間、光強、光質、溫度、濕度、營養等)對原生質體的產量和存活具有 顯著影響。即使是由生長在相同條件下的外植體如

    平板的制備和儲存方法

    傾注融化的培養基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3?mm(直徑90?mm的平皿,通常要加入18?mL~20?mL瓊脂培養基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存,或者培養時間超過48?h或培養溫度高于40?℃,則需要傾注更多的培養基。凝固后的培養基應立即使用或存放于

    兔多克隆抗血清的制備實驗——皮下組織注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?準備用于注射家兔的抗原,并準備用于皮下注射免疫的家兔(方法同皮內注射)。2. ?將家兔背部皮膚捏出,以遠離其下的肌肉,用24G注射針頭全程穿剌,進入皮下,小心勿刺入肌肉組織中,在4個不同的部位各注射0.5 ml 抗原。?

    垂直電泳槽的樣品制備和裝載過程

    ??? 垂直電泳槽是用來對少量的核酸及蛋白質樣品進行垂直電泳的裝置,玻璃板與墊條的一體化設計確保墊條表面及墊條制膠密封端的平整,徹底防止漏液,適用于生物學研究中,對核酸、蛋白樣品的分離、純化、制備等。今天就讓我們了解一下垂直電泳槽的樣品制備和裝載過程。??? 1、將試管插入至制冷恒溫金屬浴,以解凍冷

    氫化鋯的制備方法和生產方法

    制備方法將純度為99.8%的海綿狀金屬鋯與高純度氫(99.9999%)加熱至400~600℃,直接反應,即可制得。反應為放Chemicalbook熱反應。或在氫氣流中用氫化鈣在600℃下還原二氧化鋯,也可制得。生產方法將鋯粉末在氫氣流中于300~400℃反應就得到產品。

    金相試樣的制備過程

    一、過程簡單地說分為:取樣→鑲嵌→磨光與拋光→侵蝕→觀察照相等五個步驟二、注意事項1金相試片只應在砂輪側面輕輕地磨制。當試片的厚度小于10mm時,應在鑲嵌后再進行打磨。2嚴禁在磨片機旋轉時更換砂紙、砂布。3試片打磨,拋光時應拿緊,并力求與磨面接觸平穩。兩人不得同時在一個旋轉盤上操作。4腐蝕、電解金相

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