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  • 關于位點特異性重組的特點介紹

    ①這種交換是可逆的,原先存在的DNA順序全部被保存下來,并無丟失; ②噬菌體和細菌的DNA之間有一段很短的同源序列,重組交換必須通過其中的一個特定的核苷酸。這兩個特點也就是位點特異性重組的共同特點。......閱讀全文

    關于位點特異性重組的特點介紹

      ①這種交換是可逆的,原先存在的DNA順序全部被保存下來,并無丟失;  ②噬菌體和細菌的DNA之間有一段很短的同源序列,重組交換必須通過其中的一個特定的核苷酸。這兩個特點也就是位點特異性重組的共同特點。

    關于位點特異性重組的整合介紹

      λ噬菌體編碼λ整合酶(integrase)。這個酶能指導噬菌體DNA插入E.coli染色體中。這種插入作用是通過兩個DNA分子的特異位點進行重組,將兩個環狀DNA分子變成一個大環。在噬菌體感染的早期即有大量整合酶產生,故幾乎所有被感染的細胞都發生整合作用。這種作用可用體外模型來進行實驗。用四種成

    關于位點特異性重組的整合和切出的介紹

      attB由稱為BOB’的序列組成,而attP由POP'組成。O是核心序列,是attB和attP所共同的。而其兩側的序列是B,B’和P,P’,被稱為臂。噬菌體DNA是環狀的,重組時被整合入細菌染色體中,成為線性序列。前病毒的兩側是兩個新的雜種att位點,左側稱為attL,由BOP’組成,而

    關于位點特異性重組的基因的表達調控介紹

      如果一個DNA分子上兩個特異位點之間發生重組,其后果有兩種可能性:兩個位點之間的節段或被丟失,或被顛倒。有些生物能夠利用這種重組倒置來控制基因的表達。因為DNA的一正一倒兩種排列法可以相應地表達兩種不同的蛋白質,細胞就可根據需要作出選擇。奇怪的是,利用這種機制所調節的蛋白質往往都位于生物的體表。

    位點特異性重組的簡介

      位點特異性重組(site-specific recombination)是遺傳重組的一類。這類重組依賴于小范圍同源序列的聯會,重組也只發生在同源的短序列的范圍之內,需要位點特異性的蛋白質分子參與催化,重組的蛋白不是rec 系統而是int 等,如噬菌體l 的定點插入。重組時發生精確的切割、連接反應

    位點特異重組的重組機制介紹

      位點特異性重組本質上是兩個重組位點的四股DNA發生兩次切割和兩次連接的過程,所需的關鍵成分是重組酶( recombinase),此外還需要一些蛋白因子。這里以入噬菌體DNA與大腸桿菌DNA整合而進入溶原狀態為例,介紹位點特異性重組機制(圖2-33)。  1.第一次切割重組酶(又稱入噬菌體整合酶,

    位點特異性重組的整合酶和IHF的介紹

      在att上都有特定的結合位點,體外實驗也證明這兩種蛋白質結合在attDNA的特定位點上。每一次重組過程需要20-40個整合酶分子及約70個IHF分子。故可能這兩種蛋白質不僅是作為酶(發揮催化作用),而且在每次重組中都要形成某種復合物結構。通過缺失實驗,證明attP至少要約250bp長,太短將使其

    關于位點特異重組的重組效應簡介

      位點特異性重組既可以發生在一個DNA分子中,也可以發生在兩個DNA分子間。重組酶識別位點有方向性,所以重組時兩個重組位點的排列有方向性。  1.插入 當位點特異性重組發生在兩個閉環DNA之間或一個閉環DNA與一個線性DNA之間時,重組的結果是DNA插入(即整合),并且插入之后在兩端形成同向重復序

    關于位點特異重組的簡介

      位點特異性重組(sile-specific recombinalion)是指發生在特定的DNA序列之間的片段交換,序列之間不要求有同源性。位點特異性重組發生于包括基因表達調控、胚胎發育過程中的程序性基因重排、免疫球蛋白基因的重排、一些病毒DNA和質粒復制周期中發生的整合與解離等過程中。

    簡述位點特異性重組的最終結果

      其結果是G(+)和G(-)噬菌體對不同株E.coli有不同的特異性。在G(+)方向,基因S和U表達,其產物使噬菌體可吸附在E.coliK12上,但不能吸附在E.coliC上,反之,在G(-)方向,基因S’和U’表達,噬菌體可吸附在E.coliC上,而不能吸附在E.coliK12上。各蛋白質的分子

    關于位點專一重組的基本介紹

      λ噬菌體感染大腸桿菌后,或是進入裂解生長,或是進入溶原生長。當噬菌體裂解宿主細胞的功能受到抑制,噬菌體DNA整合進宿主染色體并隨宿主染色體而進行復制,或作為一個獨立的郊猶?/SPAN>(如P22)。這稱為溶原性(lysogeny),這類噬菌體稱為溶原性噬菌體(lysogenic phage)。當

    關于多克隆位點的應用介紹

      多克隆位點,是指載體上含有的一個人工合成的DNA片段,其上含有多個單一酶切位點,是外源DNA的插入部位,具備條件:是載體中的一段堿基序列,由數個酶切位點組成,這些位點在載體上都是單一位點。  多克隆位點(multiple cloning site, MCS),是包含多個(最多20個)限制性酶切位

    關于核糖體結合位點的形成介紹

      真核細胞的大小亞基是在核中形成的,在核仁部位rDNA轉錄出45SrRNA,是rRNA的前體分子,與胞質運來的蛋白質結合,再進行加工,經酶裂解成28S,18S和5.8S的rRNA,而5SrRNA則在核仁外合成28S,5.8S及5SrRNA與蛋白質結合,形成RNP分子團。為大亞基前體,分散在核仁顆粒

    概述位點專一重組的相關信息

      溶原狀態同裂解狀態是可以轉換的。當λ噬菌體DNA整合在宿主基因組中,則進入溶原狀態;當噬菌體DNA從宿主基因組中切離下來,則轉入裂解狀態。這種整合和切離,都是通過DNA和細菌DNA特定的附著位點之間的重組來實現的。大腸桿菌DNA上的att(attach)位點記為attλ或attB,長度為23 b

    特異性位點的DNA甲基化的檢測方法

    相關專題1 甲基化敏感性限制性內切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法這種方法利用甲基化敏感性限制性內切酶 對甲基化區的不切割的特性,將DNA消化為不同大小的片段后再進行分析。常使用的甲基化敏感的

    多克隆位點的應用特點

    多克隆位點(multiple cloning site, MCS),是包含多個(最多20個)限制性酶切位點(restriction site)的一段很短的DNA序列。也稱為多位點接頭(polylinker),是基因工程中常用到的載體質粒的標準配置序列。MCS中,每個限制性酶切位點通常是唯一的,即它們

    關于DNA重組的重組修復介紹

      有絲分裂和減數分裂期間由各種外源因子(例如紫外線,X射線,化學交聯劑)引起的DNA損傷都可以通過同源重組修復機制(HRR)來修復。  人類和嚙齒動物中減數分裂期間HRR所必需的基因產物的缺陷會導致不育 。人類HRR所必需的基因產物(例如BRCA1和BRCA2)的缺陷同時會增加患癌癥的風險。在細菌

    關于基因重組的自然重組的介紹

      自然界不同物種或個體之間的基因轉移和重組是經常發生的,它是基因變異和物種進化的基礎。自然界的基因轉移的方式有:  接合作用:當細胞與細胞、或細菌通過菌毛相互接觸時,質粒DNA就可從一個細胞(細菌)轉移至另一細胞(細菌),這種類型的DNA轉移稱為接合作用(conjugation )。  轉化作用(

    關于內部核糖體進入位點的分類介紹

      根據其序列特征和二級結構的保守性,可以將內部核糖體進入位點分為三類。第一類IRES(見于腸病毒和鼻病毒)并不是非常有效的翻譯起始體。第二類IRES(見于cardioviruses and aphthoviruses)則是有效的翻譯起始體。第三類(見于甲肝病毒)則位于兩者之間,也不是非常有效。當然

    關于核糖體結合位點的異常改變抑制介紹

      電鏡下,多聚核糖體的解聚和粗面內質網的脫粒都可看作是蛋白質合成降低或停止的一個形態指標。  多聚核糖體的解聚:是指多聚核糖體分散為單體,失去正常有規律排列,孤立地分散在胞質中或附在粗面內質網膜上。一般認為,游離多聚核糖體的解聚將伴隨著內源性蛋白質生成的減少。脫粒是指粗面內質網上的核糖體脫落下來,

    關于核糖體結合位點的理化性質介紹

      核糖體的主要成份為蛋白質和rRNA,二者比例在原核細胞中為1.5:1,在真核細胞中為1:1,每個亞基中,以一條或二條高度折疊的rRNA為骨架,將幾十種蛋白質組織起來,緊密結合,使rRNA大部分圍在內部,小部分露在表面。由于RNA的磷酸基帶負電荷超過了蛋白質帶的正電荷/負電性,易與陽離子和堿性染料

    骨橋蛋白的結合位點的介紹

      OPN分布廣泛并受多種因素的調控,能與許多物質結合。  (1)結合多種整合素受體:已發現αvβ1、αvβ3、αvβ5、α5β1、α8β1、α4β1和α9β1等7種整合素能與OPN結合,2個α4β1整合素結合部位位于OPN的N-末端凝血酶片酸的38 aa結構域上,α9β1能結合凝血酶斷裂的OPN

    關于核糖體結合位點的信號學說的要點介紹

      ⑴分泌蛋白質多肽的合成一開始也在游離多聚核糖體上,但其mRNA在AUG之后有一段45-90bp的信號順序(密碼),由此能翻譯出15-30個氨基酸的多肽(信號肽)SignalPeptide。這種能合成信號肽的核糖體將成為附著核糖體與內質網結合,不能合成信號肽的為游離核糖體,仍散布于胞質中。  ⑵近

    以量子點對包膜病毒進行位點特異性標記用于單病毒示蹤

    對于單病毒的示蹤,是研究病毒感染路徑和表征病毒與靶細胞動態相互作用的有力工具,有助于闡明病毒侵入細胞并播散的關鍵步驟,揭示病毒流行和發病的機理,從而有利于形成具有針對性的新的治療策略。為了實現對單病毒的持續示蹤,熒光標記物必須具備良好的熒光穩定性,配備應用高放大倍數的物鏡,從而實現對微小病毒顆粒(2

    以量子點對包膜病毒進行位點特異性標記用于單病毒示蹤

      對于單病毒的示蹤,是研究病毒感染路徑和表征病毒與靶細胞動態相互作用的有力工具,有助于闡明病毒侵入細胞并播散的關鍵步驟,揭示病毒流行和發病的機理,從而有利于形成具有針對性的新的治療策略。為了實現對單病毒的持續示蹤,熒光標記物必須具備良好的熒光穩定性,配備應用高放大倍數的物鏡,從而實現對微小病毒顆粒

    以量子點對包膜病毒進行位點特異性標記用于單病毒示蹤

      對于單病毒的示蹤,是研究病毒感染路徑和表征病毒與靶細胞動態相互作用的有力工具,有助于闡明病毒侵入細胞并播散的關鍵步驟,揭示病毒流行和發病的機理,從而有利于形成具有針對性的新的治療策略。為了實現對單病毒的持續示蹤,熒光標記物必須具備良好的熒光穩定性,配備應用高放大倍數的物鏡,從而實現對微小病毒顆粒

    識別位點

    中文名稱識別位點英文名稱recognition site定  義限制性內切酶特異結合的核苷酸序列。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞遺傳(二級學科)

    剪接位點

    中文名稱剪接位點英文名稱splicing site;splice site定  義剪接體可識別的RNA前體中內含子和外顯子連接邊界的序列和接頭位點。根據位置不同可以分為供體和接納體剪接位點。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),基因表達與調控(二級學科)

    位點特異性核酸內切酶的蛋白質工程實驗

    位點特異性核酸內切酶的蛋白質工程 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 pMQ402 試劑、試劑盒

    位點特異性核酸內切酶的蛋白質工程實驗

    實驗材料pMQ402試劑、試劑盒阿拉伯糖苯甲基磺酰氟Ni-NTA 瓊脂糖結合緩沖液清洗緩沖液洗脫緩沖液透析緩沖液儀器、耗材超聲破碎器冷凍離心機實驗步驟3. 方法此處列出的方法概括了為定點突變而做的氨基酸位點選擇(見 3.1)、為在細菌細胞中表達而做的 MutH 蛋白突變 ( 見 3.2 ) 和 Mu

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