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    概述基因沉寂的實現工具

    Sigma-Aldrich公司近日在全球推出MISSION&reg; esiRNA,一種基因特異的siRNA庫,它為哺乳動物細胞中的RNAi篩選提供了一種強有力的方法。與傳統的合成siRNA不同,esiRNA集合了數百個針對單個基因靶點的siRNA。這種新工具能避免鑒定有效siRNA的反復試驗過程,迅速實現基因沉默,并確保脫靶效應最低。 此項技術與傳統的單個siRNA介導的基因knockdown相比,優勢相當明顯。以前,我們需要反復試驗,來鑒定出最有效的siRNA,現在有了這個siRNA的“超級庫”,這一步都省了。此外,esiRNA還能確保最低的脫靶效應。esiRNA是由德國馬普學會細胞生物學和遺傳學(MPI-CBG)開發的。 MPI-CBG的課題組組長Frank Buchholz開創了esiRNA技術在RNAi篩選中的應用。他表示:“我們很高興能與Sigma-Aldrich合作,讓整個學術界都能享有esiRNA......閱讀全文

    概述基因沉寂的實現工具

      Sigma-Aldrich公司近日在全球推出MISSION®; esiRNA,一種基因特異的siRNA庫,它為哺乳動物細胞中的RNAi篩選提供了一種強有力的方法。與傳統的合成siRNA不同,esiRNA集合了數百個針對單個基因靶點的siRNA。這種新工具能避免鑒定有效siRNA的反復試驗過

    概述基因沉寂的內容

      總之,基因沉默是基因表達調控的一種重要方式,是生物體在基因調控水平上的一種自我保護機制,在外源DNA侵入、病毒侵染和DNA轉座、重排中有普遍性。對基因沉默進行深入研究,可幫助人們進一步揭示生物體基因遺傳表達調控的本質,在基因克服基因沉默現象,從而使外源基因能更好的按照人們的需要進行有效表達;利用

    概述基因沉寂的病毒的影響

      早在20世紀70年代初人們就發現,病毒或類病毒侵入植物后,RNA依賴性的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)的活性明顯提高。RdRP是生物體內普遍存在的一種RNA聚合酶,在體外能以單鏈RNA或單鏈DNA甚至以雙鏈RNA為模板,合成與模板互補RNA,合

    基因沉寂的作用

    這個“原則”就是目前尚沒有真正完全清楚的“組蛋白密碼”(Histone Code)。能夠與甲基化組蛋白結合的蛋白質有sir1/2/3/4,這是一組被稱為"Silencing Informative Repressor"的蛋白,其中,Sir2就是上文中的“去乙酰化”酶,而Sir1/3/4則負責與甲基化

    基因沉寂的原理

    基因沉寂需要經歷不同的反應過程才能實現,包括組蛋白N端結構域的賴氨酸殘基的去乙酰基化加工、甲基化修飾(由甲基轉移酶催化,修飾可以是一價、二價和三價甲基化修飾,后者又被稱為'過度’甲基化修飾(Hypermethylation) ) 、以及和甲基化修飾的組蛋白結合的蛋白質(MBP)形成“異染色質

    基因沉寂的作用

    這個“原則”就是目前尚沒有真正完全清楚的“組蛋白密碼”(Histone Code)。能夠與甲基化組蛋白結合的蛋白質有sir1/2/3/4,這是一組被稱為"Silencing Informative Repressor"的蛋白,其中,Sir2就是上文中的“去乙酰化”酶,而Sir1/3/4則負責與甲基化

    基因沉寂的作用

    這個“原則”就是目前尚沒有真正完全清楚的“組蛋白密碼”(Histone Code)。能夠與甲基化組蛋白結合的蛋白質有sir1/2/3/4,這是一組被稱為"Silencing Informative Repressor"的蛋白,其中,Sir2就是上文中的“去乙酰化”酶,而Sir1/3/4則負責與甲基化

    基因沉寂的概念

    基因沉寂(Gene Silencing) 也可以被稱為“基因沉默”。基因沉寂是真核生物細胞基因表達調節的一種重要手段。指的是真核生物中由雙鏈RNA誘導的識別和清除細胞非正常RNA的一種機制。以前,“基因沉寂”被理解為是真核生物染色體形成異染色質(Heterochromatin)的過程。最近的研究表明

    簡述基因沉寂的原理介紹

      基因沉寂需要經歷不同的反應過程才能實現,包括組蛋白N端結構域的賴氨酸殘基的去乙酰基化加工、甲基化修飾(由甲基轉移酶催化,修飾可以是一價、二價和三價甲基化修飾,后者又被稱為'過度’甲基化修飾(Hypermethylation) ) 、以及和甲基化修飾的組蛋白結合的蛋白質(MBP)形成“異染

    關于基因沉寂的作用介紹

      這個“原則”就是目前尚沒有真正完全清楚的“組蛋白密碼”(Histone Code)。能夠與甲基化組蛋白結合的蛋白質有sir1/2/3/4,這是一組被稱為"Silencing Informative Repressor"的蛋白,其中,Sir2就是上文中的“去乙酰化”酶,而Sir1/3/4則負責與甲

    關于基因沉寂的推測介紹

      從大量的研究結果中我們可以推測,生物體內有一套RNA監視系統,可以通過多種異常RNA來激發。如果外來核酸是DNA(包括轉基因、重組基因、DNA病毒、擴增子等),靶標RNA需要在細胞核中完全成轉錄后運轉到細胞質中,而侵入細胞質的病毒RNA可以直接提供靶標RNA。各種不同的靶標RNA(包括與外源基因

    基因沉寂的定義和特征

    基因沉寂(Gene Silencing) 也可以被稱為“基因沉默”。基因沉寂是真核生物細胞基因表達調節的一種重要手段。指的是真核生物中由雙鏈RNA誘導的識別和清除細胞非正常RNA的一種機制。以前,“基因沉寂”被理解為是真核生物染色體形成異染色質(Heterochromatin)的過程。最近的研究表明

    基因沉寂的定義和原理

    定義RNAi與轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing and transgene silencing)在分子層次上被證實是同一種現象。原理基因沉寂需要經歷不同的反應過程才能實現,包括組蛋白N端結構域的賴氨酸殘基的去乙酰基化加工、甲基化修飾(由甲基轉移酶

    基因沉寂的定義和特點

    基因沉寂(Gene Silencing) 也可以被稱為“基因沉默”。基因沉寂是真核生物細胞基因表達調節的一種重要手段。指的是真核生物中由雙鏈RNA誘導的識別和清除細胞非正常RNA的一種機制。以前,“基因沉寂”被理解為是真核生物染色體形成異染色質(Heterochromatin)的過程。最近的研究表明

    基因沉寂的基本原理

    基因沉寂需要經歷不同的反應過程才能實現,包括組蛋白N端結構域的賴氨酸殘基的去乙酰基化加工、甲基化修飾(由甲基轉移酶催化,修飾可以是一價、二價和三價甲基化修飾,后者又被稱為'過度’甲基化修飾(Hypermethylation) ) 、以及和甲基化修飾的組蛋白結合的蛋白質(MBP)形成“異染色質

    動植物的基因沉寂現象介紹

      基因沉默現象首先在轉基因植物中發現,接著和線蟲、真菌、昆蟲、原生動物以及才鼠中陸續發現。大量的研究表明,環境因子、發育因子、DNA修飾、組蛋白乙酰化程度、基因拷貝數、位置效應、生物的保護性限制修飾以及基因的過度轉錄等都與基因沉默有關。但總的看來,基因沉默發生在兩種水平上,一種是由于DNA甲基化、

    關于基因沉寂的基本信息介紹

      基因沉寂(Gene Silencing) 也可以被稱為“基因沉默”。基因沉寂是真核生物細胞基因表達調節的一種重要手段。指的是真核生物中由雙鏈RNA誘導的識別和清除細胞非正常RNA的一種機制。以前,“基因沉寂”被理解為是真核生物染色體形成異染色質(Heterochromatin)的過程。最近的研究

    分子生態學詞匯--基因沉寂

    中文名:基因沉寂外文名:Gene Silencing定義:基因沉寂(Gene Silencing) 也可以被稱為“基因沉默”。基因沉寂是真核生物細胞基因表達調節的一種重要手段。指的是真核生物中由雙鏈RNA誘導的識別和清除細胞非正常RNA的一種機制。以前,“基因沉寂”被理解為是真核生物染色體形成異染色

    基因編輯工具的開發

    基因編輯已經被越來越廣泛的用于生物學的研究和應用當中,例如合成生物學,基因治療,藥物靶點發現,mRNA剪接,蛋白定向進化等等。我們在使用各種各樣的基因編輯工具時,不禁感嘆這些工具是多么的精巧絕倫。但科研人員發現基因編輯工具,改進這些工具的功能、效率并非易事。高效、精準、便捷的基因編輯工具,一直是人們

    integrate基因工具應用

      哥倫比亞大學的研究團隊在霍亂弧菌中發現了一個獨特的“跳躍基因”(轉座子)后,開發了一種名為INTEGRATE的工具,可以在基因組中精準位置插入大片段基因而不引入DNA斷裂。對于側重于敲除和降解目標DNA、且屢受到脫靶困擾的CRISPR技術,這種新的、精準插入大片段的基因編輯工具有望提供重要的補充

    基因操作的工具酶-2

    (三) DNA連接酶的反應條件影響連接效率的因素有:1. 溫度(通常在4-15℃ )2. ATP的濃度(10μM/L - 1mM/L )3. 連接酶濃度(一般平末端大約需1~2U,黏性末端僅需0.1U)4. 反應時間(通常連接過夜)5. 插入片段和載體片段的摩爾比( 1∶1~5∶1)(四)T4 DN

    基因操作的工具酶-1

    一、 限制性核酸內切酶及其應用(一)限制性核酸內切酶的發現當λ(k)噬菌體侵染E.coliB時,由于其DNA中有EcoB核酸酶特異識別的堿基序列,被降解掉。而E.coliB的DNA中雖然也存在這種特異序列,但可在EcoB甲基化酶的作用下,催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)將甲基轉移給限制酶識別序列的特定

    基因操作的工具酶-3

    (三)T4 DNA聚合酶 T4DNA聚合酶是從T4噬菌體感染了的大腸桿菌中分離出來的, 1.酶催活性: ⑴5′→3′的聚合酶活性 ⑵3 ′→ 5 ′的核酸外切酶活性。其外切酶活性要比大腸桿菌聚合酶 I 的活性高200倍。比Klenow 片段酶強100~1,00

    新工具實現貼壁細胞的單細胞分析

      美國麻省理工學院的研究人員開發出一種微流體裝置,一次能吸取一個細胞內的東西,而不干擾周圍的細胞,這為研究人員測定單細胞的生化性質帶來了一種新方法。它有助于研究不同干細胞之間的差異,或為什么同一腫瘤的不同細胞有著不同的治療響應。   MIT電氣工程與計算機科學系的Jongyoon

    基因檢測切莫淪為“營銷工具”

      大眾基因檢測公司“23魔方”26日宣布,該公司聯合知名生命科學公司賽默飛世爾,推出專為中國人設計的70萬+檢測位點的定制芯片。據稱,這是國內目前檢測位點數最多的定制芯片。  其實,基因檢測不是個新事物。該領域包括兩個方向:科研和醫療相關的專業級基因檢測,以及面向消費者的檢測,如易感疾病風險預估、

    基因工程常用的工具酶-2

    ①增加限制酶的用量,平均每微克底物DNA可高達10單位甚至更多。②增加酶反應體系的體積,以使潛在的抑制物被相應的稀釋。③延長酶解反應的保溫時間。④向反應體系中添加亞精胺(spermidine)(終濃度為1~2.5mmol/L),亞精胺與負電性的雜質結合。注意,亞精胺在4℃時會沉淀DNA,因此最好在反

    基因工程常用的工具酶-1

    一、限制性核酸內切酶(restriction endonuclease)1.定義:凡能識別和切割雙鏈DNA分子內特定核苷酸序列的酶,也稱為限制酶(restriction enzyme,RE)。2.類型:來自原核生物,有三種類型。Ⅰ型:兼具甲基化修飾和ATP參與的核酸內切酶活性,隨機切割。Ⅱ型:大多能

    改良CRISPR工具 產前編輯致病基因

      科學家們首次在實驗動物體內進行產前基因編輯試圖阻止致命的代謝紊亂疾病,為出生前治療人類先天性疾病提供了可能。費城兒童醫院(CHOP)和賓夕法尼亞大學醫學院的研究發表在今天出版的《Nature Medicine》上,證明了產前基因編輯的低毒性。   使用CRISPR-Cas9和堿基編輯器3

    基因工程的載體和工具酶-3

    2.M13噬菌體載體的構建 ? ⑴ 在IS區內插入LacZ基因 ⑵在標記基因區內組裝MCS區段 所以能通過a互補在X-Gal/ IPTG平板上識別重組體。這類載體包括了 M13mp8、9 和 M13mp18 、 19等 這類載體的突出優點在于其既可以提供單鏈DNA,也可以提供雙鏈的D

    基因工程的載體和工具酶-1

    第一節載體引言基因克隆的本質是使目的基因在特定的條件下得到擴增和表達,而目的基因本身無法進行復制和表達、不易進入受體細胞、不能穩定維持,所以就必須借助于“載體”及其“寄主細胞”來實現。作為基因克隆的載體必須具備以下特性:⑴載體必須是復制子。⑵具有合適的篩選標記,便于重組子的篩選。⑶具備多克隆位點(M

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