關于M13噬菌體的基本信息介紹
M13噬菌體是一種絲狀噬菌體，內有一個環狀單鏈DNA分子，長6407個核苷酸，含DNA復制和噬菌體增殖所需的遺傳信息。M13DNA的復制起始位點定位在基因間隔區內。但是基因間隔區的有些核苷酸序列即使發生突變、缺失或插入外源DNA片段，也不會影響M13DNA的復制，這為M13DNA構建克隆載體提供了條件。 其中M13mp系列對野生型M13加以改造，插入了多克隆位點和LacZ基因，可容納外源DNA300-400bp，可用于制備DNA測序時用的單鏈模板和核酸探針。 M13 噬菌體的生物學 M13 噬菌體顆粒是絲狀的，只感染F+（含F質粒，能產生性菌毛）的大腸桿菌。感染宿主后通常不裂解宿主細胞，而是從感染的細胞中分泌出噬菌體顆粒，宿主細胞仍能繼續生長和分裂。但生長水平比未感染組低。 M13 噬菌體的基因組為單鏈 DNA （+DNA），由 6407 的堿基組成。基因組 90% 以上的序列可編碼蛋白質，共有 11 個編碼基因，基因......閱讀全文
關于M13噬菌體的基本信息介紹
M13噬菌體是一種絲狀噬菌體，內有一個環狀單鏈DNA分子，長6407個核苷酸，含DNA復制和噬菌體增殖所需的遺傳信息。M13DNA的復制起始位點定位在基因間隔區內。但是基因間隔區的有些核苷酸序列即使發生突變、缺失或插入外源DNA片段，也不會影響M13DNA的復制，這為M13DNA構建克隆載體提供
關于M13噬菌體的優缺點介紹
1、優點 （1）有MCS，便于克隆不同的酶切片段。 （2）Xgal顯色反應，可供直接選擇。 （3）無包裝限制，克隆能力大。 （4）可以克隆雙鏈DNA分子中的每一條鏈（子代M13噬菌體中包含的是單鏈+DNA）。 2、缺點 （1）插入外源DNA后，遺傳穩定性顯著下降。 （2）實際克隆能
關于M13噬菌體載體的基本介紹
M13噬菌體是一類特異的雄性大腸埃希菌噬菌體，基因組為一長度6.4kb的且彼此同源性很高的單鏈閉環DNA分子。只感染雄性大腸埃希菌，但M13噬菌體DNA可以轉傳導進入雌性大腸埃希菌。M13子代噬菌體通過細胞壁擠出，并不殺死細菌，但細菌生長速度緩慢。 該類噬菌體作為克隆載體，可以通過質粒提取技術
關于M13噬菌體的宿主菌的介紹
由于 M13 噬菌體通過 F 質粒編碼的性纖毛進入宿主細胞內，故只能用雄性細菌來增殖病毒。 Messing 及其同事已經構建了許多攜帶 F' 質粒并便于 M13 載體進行基因操作的多種大腸桿菌菌株，其中最重要的遺傳標志有： （1） lacZ D Ml5 lacZ 基因缺失突變體。 （
M13噬菌體
·?????????M13 Phage?(Michael Blaber)Very useful background information about M13: its infection, replication, packing, cloning. If you are new to phag
M13噬菌體鋪平板
實驗方法原理 M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆粒感染鄰近細菌, 然后又產生下一代病毒顆粒，細菌在半固體培養基（如含瓊脂或瓊脂糖）上生長時，子代病毒顆粒的擴散受到一定限制。實驗材料 M13 噬菌體原種噬菌斑大腸桿菌 F' 菌株制備的主培養物試劑、試劑盒 IPTG 溶液
M13噬菌體鋪平板
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆粒感染鄰近細菌, 然后又產生下一代病毒顆粒，細菌在半固體培養基（如含瓊脂或瓊脂糖）上生長時，子代病毒顆粒的擴散受到一定限制。
M13噬菌體鋪平板
M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆粒感染鄰近細菌, 然后又產生下一代病毒顆粒，細菌在半固體培養基（如含瓊脂或瓊脂糖）上生長時，子代病毒顆粒的擴散受到一定限制。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆
M13噬菌體載體的克隆
實驗方法原理 雖然理論上 M13 重組噬菌體所能攜帶的外源 DNA 片段沒有限制，但實際上是有限的：長片段的外源 DNA 比短片段的更易發生缺失和重排。因此如果可能，最好克隆至 M13 噬菌體的 DNA 片段不要大于 1000 堿基。而且，當用“正向”或“反向”通用測序引物進行 DNA
M13噬菌體載體的克隆
雖然理論上 M13 重組噬菌體所能攜帶的外源 DNA 片段沒有限制，但實際上是有限的：長片段的外源 DNA 比短片段的更易發生缺失和重排。因此如果可能，最好克隆至 M13 噬菌體的 DNA 片段不要大于 1000 堿基。而且，當用“正向”或“反向”通用測序引物進行 DNA 測序時，大片段的中心區域可
M13噬菌體載體的構建
在IS區內插入LacZ基因 ⑵在標記基因區內組裝MCS區段所以能通過a互補在X-Gal/ IPTG平板上識別重組體。這類載體包括了 M13mp8、9 和 M13mp18 、 19等這類載體的突出優點在于其既可以提供單鏈DNA，也可以提供雙鏈的DNA。其最大的不足在于插入大的DNA片段后表現不穩定，在
M13噬菌體載體的克隆
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雖然理論上 M13 重組噬菌體所能攜帶的外源 DNA 片段沒有限制，但實際上是有限的：長片段的外源 DNA 比短片段的更易發生缺失和重排。因此如果可能，最好克隆至 M13 噬菌體的 DNA 片段不要大于 1000 堿基。
概述M13噬菌體的－構建
單鏈 DNA 的酶切和連接是比較困難的，因此 M13 噬菌體在用作載體時是利用其雙鏈 RF DNA。RF DNA 很容易從感染細胞中純化出來，可以象質粒一樣進行操作，并可通過轉化方法再次導入細胞。 （1）載體的插入位點 在 M13 噬菌體基因組中絕大多數為必需基因，只有兩個間隔區可用來插入外
M13噬菌體與其他噬菌體相比的優點
噬菌體展示技術的應用中，M13噬菌體與其他噬菌體比有什么優點？M13噬菌體和與其密切相關的絲狀噬菌體fd和f1均為非裂解性噬菌體，它們在增殖期間均不裂解宿主菌。這就極大地簡化了每輪淘選過程之間的中間噬菌體純化步驟，只用簡單的PEG沉淀方法就足以將噬菌體與其他所有污染的細胞蛋白分開。而其他用于噬菌體展
關于細菌噬菌體的基本信息介紹
噬菌體（phage）是侵襲細菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學性狀的遺傳物質。噬菌體必須在活菌內寄生，有嚴格的宿主特異性，其取決于噬菌體吸附器官和受體菌表面受體的分子結構和互補性。噬菌體是病毒中最為普遍和分布最廣的群體。通常在一些充滿細菌群落的地方，如：泥土、動物的腸道里，都可以找到噬菌體。
關于前噬菌體的基本信息介紹
處于前噬菌體狀態下，噬菌體基因組的增殖與細菌染色體的增殖緊密聯系著，此時前者可插入后者中作為擬核的一部分，也可作為擬核外的質粒存在。例如大腸桿菌中的λ噬菌體等，通常以插入擬核特定部位的形式存在；而P1噬菌體等則以質粒形式存在。帶有前噬菌體的菌稱為溶源菌，它們具有無需由外部感染而可產生噬菌體的遺傳
絲狀噬菌體M13噬菌體的生物學特性
⑴是單鏈閉合環狀噬菌體只能感染雄性細菌，外形成絲狀，基因組DNA長約6.4kb，可分為10個區和507 bp基因間隔區（IS區），該區可以接受外源DNA的插入而不會影響到噬菌體的活力。這是該噬菌體能用于單鏈DNA載體的重要前提。⑵復制與增殖（圖）
重組M13噬菌體克隆分析
在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌體克隆感染細菌后釋放至周圍培養基中的單鏈 DNA 進行凝膠電泳分析即可鑒定。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌
M13噬菌體液體培養
M13 噬菌體原種通常采用液體培養，感染細胞并不裂解而是緩慢生長形成稀懸液。接種幾乎總是用一個新挑取的噬菌斑或單個噬菌斑獲得的噬菌體顆粒懸液。感染細胞含 200 拷貝以上雙鏈 RF DNA，每代分泌數百個噬菌體顆粒。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌體原種通常采
重組M13噬菌體克隆分析
實驗方法原理 在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌體克隆感染細菌后釋放至周圍培養基中的單鏈 DNA 進行凝膠電泳分析即可鑒定。實驗材料 重組 M13 噬菌體單鏈 DNAM13 噬菌體重組噬菌斑M13 噬菌體非重組載體噬菌斑大腸桿菌 F' 菌株試劑
M13噬菌體液體培養
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌體原種通常采用液體培養，感染細胞并不裂解而是緩慢生長形成稀懸液。接種幾乎總是用一個新挑取的噬菌斑或單個噬菌斑獲得的噬菌體顆粒懸液。感染細胞含 200 拷貝以上雙鏈 RF DNA，每代分泌數百個噬菌體顆粒。
M13噬菌體液體培養
實驗方法原理 M13 噬菌體原種通常采用液體培養，感染細胞并不裂解而是緩慢生長形成稀懸液。接種幾乎總是用一個新挑取的噬菌斑或單個噬菌斑獲得的噬菌體顆粒懸液。感染細胞含 200 拷貝以上雙鏈 RF DNA，每代分泌數百個噬菌體顆粒。實驗材料 M13 噬菌斑大腸桿菌 F' 菌株儀器、耗材 LB
重組M13噬菌體克隆分析
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌體克隆感染細菌后釋放至周圍培養基中的單鏈 DNA 進行凝膠電泳分析即可鑒定。 實驗材料
M13噬菌體衍生載體的制備實驗
載體衍生法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 質粒 試劑、試劑盒
M13噬菌體單鏈DNA的制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。
M13噬菌體衍生載體的制備實驗
實驗材料?質粒試劑、試劑盒?YT培養基儀器、耗材?離心機分光光度計搖床實驗步驟 1.? 將來自一個單菌落的過夜培蕎新鮮菌液按1 ：50稀釋，在含有適當抗生素的2×YT培養液（1~5 ml）中，于37℃培養至OD600=0.1。2.? 按1，10，20，50 MOI感染細胞，于37℃劇烈振蕩下培養4.
M13噬菌體單鏈DNA的制備
M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌
來自噬菌體的驚喜——－M13－Antibody－(HRP)
前言2018年10月諾貝爾化學獎的一半頒發給了美國科學家George P. Smith和英國科學家Gregory P. Winter, 兩人獲獎的原因是多肽和抗體的噬菌體展示技術。噬菌體展示技術在生物醫藥研發中有著十分廣泛的應用，是生物新藥研發的源頭技術，M13噬菌體則被廣泛地應用于噬菌體展示技
M13噬菌體單鏈DNA的制備
實驗方法原理 M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。實驗材料 M13 單鏈噬菌體載體感染 M13 噬菌體的大腸桿菌培養物未感染的大腸桿菌的培養
M13－噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技
M13 噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 羧芐青霉素 氯霉素 大腸桿菌 CJ2