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  • 限制酶切割雙鏈DNA的方式

    限制酶切割雙鏈DNA的方式有兩種,產生的末端也有兩種:第一種是交錯切割,即兩條鏈的切點不在同一水平而是相隔數個堿基,故斷口產生兩小段自身互補的單鏈,這種末端容易互補連接,稱為粘性末端(cohesive terminus);第二種為平整切割。......閱讀全文

    限制酶切割雙鏈DNA的方式

    限制酶切割雙鏈DNA的方式有兩種,產生的末端也有兩種:第一種是交錯切割,即兩條鏈的切點不在同一水平而是相隔數個堿基,故斷口產生兩小段自身互補的單鏈,這種末端容易互補連接,稱為粘性末端(cohesive terminus);第二種為平整切割。

    經雙限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備實驗

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    經雙限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備實驗

    置換型載體(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位點,它們在中央填充片段的兩端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理置換型載體

    經雙限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備實驗

    實驗方法原理 置換型載體(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位點,它們在中央填充片段的兩端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)。實驗材料 噬菌體 T4 DNA 連接酶限制性內切核酸酶λ

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    可被單一限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA制備實驗

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    可被單一限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA制備實驗

    在某些情況下,制備好的 λ 噬菌體 DNA 經限制酶的簡單消化即可用于克隆。但只有當所用載體能用遺傳學方法篩選含有外源 DNA 序列的重組噬菌體時(如 EMBL 系列、λ2001、λDASH、λZAP、λgt10),這種方案才是可行的。因為在這種情況下,不必采取步驟來減少非重組噬菌體的形成。本實驗來

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