基因工程的原理和應用
基因工程(genetic engineering)又稱基因拼接技術和DNA重組技術,是以分子遺傳學為理論基礎,以分子生物學和微生物學的現代方法為手段,將不同來源的基因按預先設計的藍圖,在體外構建雜種DNA分子,然后導入活細胞,以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品的遺傳技術。基因工程技術為基因的結構和功能的研究提供了有力的手段。......閱讀全文
基因工程的原理和應用
基因工程(genetic engineering)又稱基因拼接技術和DNA重組技術,是以分子遺傳學為理論基礎,以分子生物學和微生物學的現代方法為手段,將不同來源的基因按預先設計的藍圖,在體外構建雜種DNA分子,然后導入活細胞,以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品的遺傳技術。基因工程技術為
基因工程疫苗的特點和應用
基因工程疫苗:是用基因工程方法或分子克隆技術,分離出病原的保護性抗原基因,將其轉入原核或真核系統使表達出該病原的保護性抗原,制成疫苗,或者將病原的毒力相關基因刪除掉,使成為不帶毒力相關基因的基因缺失苗。①多肽或亞單位疫苗。②顆粒載體疫苗。③病毒活載體疫苗。④細菌活載體疫苗。⑤基因重配疫苗。⑥基因缺失
基因工程抗體的概念和應用
基因工程抗體是指利用基因工程技術將抗體基因重組和克隆到表達載體中,并在合適的宿主中表達和折疊成功能性抗體分子。基因工程抗體具有分子小、免疫原性低、可塑性強、成本低等優點。該技術的基本原理是從雜交細胞、免疫脾細胞和外周血淋巴細胞中提取mRNA,反轉錄成cDNA,然后將擴增的重鏈和輕鏈基因抗體分別進行P
基因工程的應用前景
基因工程師指按照人們的意愿,進行嚴格的設計,并通過體外DNA重組和轉基因等技術,賦予生物以新的遺傳特性,從而創造出更符合人們需要的生物類型和生物產品。現狀:基因工程自20世紀70年代興起后,在短短的40年間得到飛速的發展,目前已成為生物開心的核心技術。基因工程在實際應用領域——農牧業,工業,環境,能
PCR技術應用基因工程的應用
基因融合通過 PCR 反應可以比較容易地將兩個不同的基因融合在一起。在兩個 PCR 擴增體系中,兩對引物分別有其中之一在其5'末端和3'末端引物帶上一段互補的序列。混合兩種 PCR 擴增產物,經變性和復性,兩組 PCR 產物通過互補序列發生粘連,其中一條重組雜合鏈能在 PCR 條件下
基因工程的載體和工具酶應用結合案例
第一節 載體引 言基因克隆的本質是使目的基因在特定的條件下得到擴增和表達,而目的基因本身無法進行復制和表達、不易進入受體細胞、不能穩定維持,所以就必須借助于“載體”及其“寄主細胞”來實現。作為基因克隆的載體必須具備以下特性:⑴載體必須是復制子。⑵具有合適的篩選標記,便于重組子的篩選。⑶具備多克隆位點
限制酶在基因工程和基因診斷中的應用
限制酶的上述特性在基因工程和基因診斷中具有重要用途:①首先不論DNA的來源如何,用同一種內切酶切割后產生的粘性末端很容易重新連接,因此很容易將人和細菌或人和質粒任何兩個DNA片段連接在一起,即重新組合,這是重組DNA技術的基礎。②人類的基因組很大,不切割無法分析其中的基因。限制酶能把基因組在特異的部
基因工程抗體技術的應用
1、生物傳感器:生物傳感器主要用于測定抗原和抗體的親和力。它利用抗體與抗原相互作用引起的細胞質表面共振來改變偏振光的反射。與傳統方法相比,它可以描述曲線并提供顯示動態變化的信息。2、噬菌體文庫技術的進展:過去,大多數材料是抗病毒抗體。由于病毒具有很強的抗原特異性,很容易篩選出相應的抗體。此外,該方法
基因工程在醫學領域的應用
基因作為機體內的遺傳單位,不僅可以決定我們的相貌、高矮,而且它的異常會不可避免地導致各種疾病的出現。某些缺陷基因可能會遺傳給后代,有些則不能。基因治療的提出最初是針對單基因缺陷的遺傳疾病,目的在于有一個正常的基因來代替缺陷基因或者來補救缺陷基因的致病因素。用基因治病是把功能基因導入病人體內使之表達,
萃取的原理和應用
萃取又稱溶劑萃取或液液萃取(以區別于固液萃取,即浸取),亦稱抽提(通用于石油煉制工業),是一種用液態的萃取劑處理與之不互溶的雙組分或多組分溶液,實現組分分離的傳質分離過程,是一種廣泛應用的單元操作。利用相似相溶原理。被廣泛運用于食品、化工、醫藥、生物制品等領域。如:香精香料、調味品、中草藥、天然色素
吸附的原理和應用
吸附屬于一種傳質過程,物質內部的分子和周圍分子有互相吸引的引力,但物質表面的分子,其中相對物質外部的作用力沒有充分發揮,所以液體或固體物質的表面可以吸附其他的液體或氣體,尤其是表面面積很大的情況下,這種吸附力能產生很大的作用,所以工業上經常利用大面積的物質進行吸附,如活性炭、水膜等。
基因工程疫苗的制備和特點
獲得帶有病原體保護性抗原表位的目的基因,將其導入原核或真核表達系統,從而獲得該病原的保護性抗原,如乙型肝炎基因工程疫苗.具安全,高效,經濟,可批量生產等優點.
基因工程疫苗的概念和作用
基因工程疫苗:是用基因工程方法或分子克隆技術,分離出病原的保護性抗原基因,將其轉入原核或真核系統使表達出該病原的保護性抗原,制成疫苗,或者將病原的毒力相關基因刪除掉,使成為不帶毒力相關基因的基因缺失苗。①多肽或亞單位疫苗。②顆粒載體疫苗。③病毒活載體疫苗。④細菌活載體疫苗。⑤基因重配疫苗。⑥基因缺失
RACE技術在基因工程抗體中的應用
前言20世紀80年代后期,隨著分子生物學的迅速發展,使得人們可以通過基因工程技術對天然的分子進行人為的改造,這為抗體藥物帶來了新的突破點和希望。了解和闡明抗體分子的結構及功能,為人類疾病診斷及治療提供了新的推動力。基因工程抗體?為了解決傳統的鼠源性單抗存在的弊端,對鼠源性單抗進行改進以及人源化單抗的
基因工程藥物的定義及應用意義
基因工程藥物,是重組DNA的表達產物。廣義地說,凡是在藥物生產過程中涉及用基因工程的,都可以成為基因工程藥物。在這方面的研究具有十分誘人的前景。基因工程藥物研究的開發重點是從蛋白質類藥物,如胰島素、人生長激素、促紅細胞生成素等的分子蛋白質,轉移到尋找較小分子蛋白質藥物。這是因為蛋白質的分子一般都比較
基因工程在環境保護領域的應用
基因工程做成的DNA探針能夠十分靈敏地檢測環境中的病毒、細菌等污染。利用基因工程培育的指示生物能十分靈敏地反映環境污染的情況,卻不易因環境污染而大量死亡,甚至還可以吸收和轉化污染物。基因工程做成的“超級細菌”能吞食和分解多種污染環境的物質(通常一種細菌只能分解石油中的一種烴類,用基因工程培育成功的“
基因工程在人體上應用的利弊
基因作為機體內的遺傳單位,不僅可以決定我們的相貌、高矮,而且它的異常會不可避免地導致各種疾病的出現。某些缺陷基因可能會遺傳給后代,有些則不能。基因治療的提出最初是針對單基因缺陷的遺傳疾病,目的在于有一個正常的基因來代替缺陷基因或者來補救缺陷基因的致病因素。 用基因治病是把功能基因導入病人體內使之表達
消減探針的原理和應用
中文名稱消減探針英文名稱subtracted probe定 義經過消減雜交所構建的互補DNA探針。即將一種細胞或組織的全部信使核糖核酸(mRNA)逆轉錄合成單鏈cDNA,再與第二種細胞(不同類型或不同狀態下的細胞)過量的mRNA或cDNA雜交,留下第一種細胞cDNA未被雜交的部分,制備成標記探針,
酶標儀的應用和原理介紹
酶標儀即酶聯免疫檢測儀是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求酶標儀實際
酶標儀酶標儀的原理和應用
酶標儀即酶聯免疫檢測儀是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求酶標儀實際
酶工程的原理和應用
酶工程就是將酶或者微生物細胞,動植物細胞,細胞器等在一定的生物反應裝置中,利用酶所具有的生物催化功能,借助工程手段將相應的原料轉化成有用物質并應用于社會生活的一門科學技術。它包括酶制劑的制備,酶的固定化,酶的修飾與改造及酶反應器等方面內容。酶工程的應用,主要集中于食品工業,輕工業以及醫藥工業中。
鹽析的原理和應用特點
鹽析(salting out)是指在蛋白質水溶液中加入中性鹽,隨著鹽濃度增大而使蛋白質沉淀出來的現象。中性鹽是強電解質,溶解度又大,在蛋白質溶液中,一方面與蛋白質爭奪水分子,破壞蛋白質膠體顆粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白質顆粒上的電荷,從而使水中蛋白質顆粒積聚而沉淀析出。常用的中性鹽有氯化鈉、
流式熒光的原理和應用
流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、
電泳的原理、分類和應用
【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。 1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。
基因工程的載體和工具酶1
第一節載體引言基因克隆的本質是使目的基因在特定的條件下得到擴增和表達,而目的基因本身無法進行復制和表達、不易進入受體細胞、不能穩定維持,所以就必須借助于“載體”及其“寄主細胞”來實現。作為基因克隆的載體必須具備以下特性:⑴載體必須是復制子。⑵具有合適的篩選標記,便于重組子的篩選。⑶具備多克隆位點(M
基因工程疫苗的制備方法和種類
基因工程疫苗:是用基因工程方法或分子克隆技術,分離出病原的保護性抗原基因,將其轉入原核或真核系統使表達出該病原的保護性抗原,制成疫苗,或者將病原的毒力相關基因刪除掉,使成為不帶毒力相關基因的基因缺失苗。①多肽或亞單位疫苗。②顆粒載體疫苗。③病毒活載體疫苗。④細菌活載體疫苗。⑤基因重配疫苗。⑥基因缺失
基因工程的載體和工具酶3
2.M13噬菌體載體的構建 ? ⑴ 在IS區內插入LacZ基因 ⑵在標記基因區內組裝MCS區段 所以能通過a互補在X-Gal/ IPTG平板上識別重組體。這類載體包括了 M13mp8、9 和 M13mp18 、 19等 這類載體的突出優點在于其既可以提供單鏈DNA,也可以提供雙鏈的D
基因工程的載體和工具酶5
(二)Klenow片段酶Klenow片段是大腸桿菌聚合酶 I 全酶經枯草桿菌蛋白酶處理后產生的大片段酶分子,分子量為76KD 。酶催活性:⑴5’ →3’ 的聚合酶活性 ⑵3’→5’ 的核酸外切酶活性Klenow片段的主要用途(利用5’ →3’ 的聚合酶活性):⑴修補限制性酶消化DNA形成的3
基因工程的載體和工具酶2
2、pUC質粒載體1987年,J.Messing和J.Vieria采用MCS技術在pBR322基礎上構建的。結構:(1)來自于pBR322的Ori(2)氨芐青霉素的抗性基因(ampr)。但核苷酸序列發生了變化(3) LacZ′基因編碼β—半乳糖酶的α—肽鏈即氨基末端。(4)MCS區段是一段用于插入外
基因工程的載體和工具酶4
與II型核酸內切酶有關的幾個概念粘性末端:cohesive ends是指DNA分子在限制酶的作用之下形成的具有互補堿基的單鏈延伸末端結構,它們能夠通過互補堿基間的配對而重新環化起來。平 末 端 :Blunt end在識別序列對稱處同時切開DNA分子兩條鏈,產生的平齊末端結構。則不易于重新環化。同裂酶