WIKI資訊
2、pUC質粒載體1987年，J.Messing和J.Vieria采用MCS技術在pBR322基礎上構建的。結構：（1）來自于pBR322的Ori（2）氨芐青霉素的抗性基因(ampr)。但核苷酸序列發生了變化（3） LacZ′基因編碼β—半乳糖酶的α—肽鏈即氨基末端。（4）MCS區段是一段用于插入外源DNA片段的特定區域，由一系列的緊密相連的限制性內切酶位點組成，而且每個限制性內切酶位點在整個載體中是唯一的。與pBR322相比， pUC質粒載體優點：（1）具有更小的分子量和更高的拷貝數如pUC8為2 750bp，pUCl8為2 686bp，控制質粒復制rop基因的缺失，平均每個細胞即可達500～700個拷貝（2）適用于組織化學法檢測重組體通過a-互補作用，利用菌落顏色篩選重組子。（3）具有多克隆位點區段（MCS）可以定向克隆防止載體自我連接。二、噬菌體載體（一）l噬菌體載體1. 噬菌體的生物學特性烈性噬菌體：只具有溶菌生長周期溫......閱讀全文
分子生物學是在生物化學基礎上發展起來的，以研究核酸和蛋白質結構、功能等生命本質的學科，在核酸、蛋白質分子水平研究發病、診斷、治療和預后的機制。其中基因工程（基因技術，基因重組）是目前分子生物學研究熱點，這些技術可以改造或擴增基因和基因產物，使微量的研究對象達到分析水平，是研究基因調控和表達的方法，也
經常提質粒嗎？熟練之后，提質粒乃至質粒構建都很簡單。但如果真問起一些質粒的細節，可能很多人回答不了。不信隨我看看。 質粒組成要素 一個合格的質粒含有以下組成部分： 復制起始位點 Ori 即控制復制起始的位點。原核生物 DNA 分子中只有一個復制起始點。而真核生物 DNA 分子有多個復制起始位點。
基因載體是基因工程的核心，也是基因治療中強有力的生物工具，我們先來認識和閱讀載體圖譜吧。 載體分類及載體組成元件 載體分類 1、按屬性分類：病毒載體和非病毒載體 病毒載體是一種常見的分子生物學工具，可將遺傳物質帶入細胞，原理是利用病毒具有傳送其基因組進入目的細胞，進行感染的分子機制。
重組DNA技術是現代分子生物技術發展中最重要的成就之一。即是基因工程(Gene Engineering)的核心技術。重組DNA技術（Recombinant DNA Technique）是人類根據需要選擇目的基因（DNA片段）在體外與基因運載體重組，轉移至另一細胞或生物體內，以達到改良和創造新的物種和
一、限制性內切酶限制性內切酶（restriction endonucleases，RE）是其中最重要的工具酶之一。它是一類核酸水解酶，能識別和切割雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列。（一）命名原則限制性內切酶大多從細菌中發現，根據來源進行命名，限制酶的第一個字母（大寫，斜體）為宿主菌的屬名，第二、第三
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
載體主要有病毒和非病毒兩大類,其中質粒DNA是一種新的非病毒轉基因載體。一、一個合格質粒的組成要素? 復制起始位點Ori 即控制復制起始的位點。原核生物DNA分子中只有一個復制起始點。而真核生物DNA分子有多個復制起始位點。? 抗生素抗性基因 可以便于加以
載體主要有病毒和非病毒兩大類,其中質粒DNA是一種新的非病毒轉基因載體。一、一個合格質粒的組成要素? 復制起始位點Ori 即控制復制起始的位點。原核生物DNA分子中只有一個復制起始點。而真核生物DNA分子有多個復制起始位點。? 抗生素抗性基因 可以便于加以
載體主要有病毒和非病毒兩大類,其中質粒DNA是一種新的非病毒轉基因載體。一、一個合格質粒的組成要素? 復制起始位點Ori 即控制復制起始的位點。原核生物DNA分子中只有一個復制起始點。而真核生物DNA分子有多個復制起始位點。? 抗生素抗性基因 可以便于加以
1.生物反應器：生物反應器是利用酶或生物體（如微生物）所具有的生物功能，在體外進行生化反應的裝置系統，是一種生物功能模擬機，如發酵罐、固定化酶或固定化細胞反應器等。內容生物反應器聽起來有些陌生，基本原理卻相當簡單。胃就是人體內部加工食物的一個復雜生物反應器。食物在胃里經過各種酶的消化，變成我們能吸收
用于基因工程的工具酶一,限制性內切酶(Endonucleosase)(一)限制性內切酶(Endonucleosase)的發現與分類1) 50年代初發現細菌能將外來DNA片段在某些專一位點上切斷,從而保證其不為外來噬菌體所感染,而其自身的染色體DNA由于被一種特殊的酶所修飾而得以保護,這種現象叫做限制
基因載體是基因工程的核心，也是基因治療中強有力的生物工具，我們先來認識和閱讀載體圖譜吧。 一、載體分類及載體組成元件載體分類1、按屬性分類：病毒載體和非病毒載體病毒載體是一種常見的分子生物學工具，可將遺傳物質帶入細胞，原理是利用病毒具有傳送其基因組進入目的細胞，進行感染的分子機制。可發生于
基因克隆技術是分子生物學的核心技術，其目的是獲得某一基因或DNA片段的大量拷貝，用于深入分析基因的結構與功能，并可達到人為改造細胞以及物種遺傳性狀的目的。基因克隆的一項關鍵技術是DNA重組技術，它利用酶學方法將不同來源的DNA分子進行體外特異性切割，重新拼接組裝成一個新的雜合DNA分子。在此基礎上將
一個PCR反應的總耗時取決于變性、退火、延伸中每一個步驟所需的時間和從一個步驟到下一個步驟的溫度變化幅度。現有的快速PCR儀和特殊PCR管等，通過特殊的加溫和降溫技術，提高溫度升降幅度和減少熱傳導時間，從而縮短PCR過程中PCR變化所需的時間。也有采用特殊試劑促進引物和模板的結合或通過減少反應體積縮
隨著基因工程的發展，常常需要構建一種能高水平表達異源蛋白質的表達載體。啟動子對外源基因的表達水平影響很大，是基因工程表達載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法，對研究基因表達調控和構建表達載體至關重要。迄今為止，國外尚未見到有關啟動子克隆方法的綜述性報道，國內僅孫曉紅等曾就啟動子的結構、分類、克隆
隨著基因工程的發展，常常需要構建一種能高水平表達異源蛋白質的表達載體。啟動子對外源基因的表達水平影響很大，是基因工程表達載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法，對研究基因表達調控和構建表達載體至關重要。 迄今為止，國外尚未見到有關啟動子克隆方法的綜述性報道，國內僅孫曉紅等曾就啟動子的結構、分類、
DNA重組技術（或基因工程）是20世紀生物學的偉大成就，并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域，為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用，著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
隨著基因工程的發展，常常需要構建一種能高水平表達異源蛋白質的表達載體。啟動子對外源基因的表達水平影響很大，是基因工程表達載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法，對研究基因表達調控和構建表達載體至關重要。迄今為止，國外尚未見到有關啟動子克隆方法的綜述性報道，國內僅孫曉紅等曾就啟動子的結構、分類、克隆
基因工程小鼠的命名規則有沒有發現，當你在查詢或看paper時，往往會蹦出幾個賊長的，還夾雜著數字、上標、符號的名稱，比如：129-Trp53tm1Holl/J、FVB-Tg(PomcCre)5Brn...... 看上去很復雜的樣子。這些其實是基因工程小鼠的全名。如果把這一長串字符解構一下，常見的基因
《Nature Methods》盤點2015年度技術，選出了最受關注的技術成果：單粒子低溫電子顯微鏡（cryo-EM）技術。 除此之外，也整理出了2016年最值得關注的幾項技術，分別為：細胞內蛋白標記（Protein labeling in cells）、細胞核結構（Unraveling nuc
基因組編輯技術CRISPR/Cas9被《科學》雜志列為2013年年度十大科技進展之一，受到人們的高度重視。CRISPR是規律間隔性成簇短回文重復序列的簡稱，Cas是CRISPR相關蛋白的簡稱。CRISPR/Cas最初是在細菌體內發現的，是細菌用來識別和摧毀抗噬菌體和其他病原體入侵的防御系統。圖片
基因治療（Gene Therapy）是指將外源正常基因導入靶細胞，以糾正或補償缺陷和異常基因引起的疾病，以達到治療目的。目前已在癌癥、遺傳性疾病如地中海貧血，鐮刀狀貧血癥、血友病及先天性黑蒙癥等多種疾病中表現出巨大的治療潛力。基因治療以其一次給藥終身治愈遺傳疾病的獨特潛力讓一切不可能變為有可能。
基因治療（Gene Therapy）是指將外源正常基因導入靶細胞，以糾正或補償缺陷和異常基因引起的疾病，以達到治療目的。目前已在癌癥、遺傳性疾病如地中海貧血，鐮刀狀貧血癥、血友病及先天性黑蒙癥等多種疾病中表現出巨大的治療潛力。基因治療以其一次給藥終身治愈遺傳疾病的獨特潛力讓一切不可能變為有可能。
本期為大家帶來的是帕金森領域的相關研究進展，希望讀者朋友們能夠喜歡。 1. neurology：眼部疾病常見于帕金森癥患者 DOI: https://doi.org/10.1212/WNL.0000000000009214 根據最近發表的一項研究，患有帕金森氏病的人比健康人群更容易出現視力
2014年10月16~17日，中國儀器儀表學會分析儀器分會快速檢測技術及儀器專業委員會第一屆學術研討會在浙江嘉興隆重召開，本次會議由中國儀器儀表學會分析儀器分會及快速檢測技術及儀器專業委員會主辦，首都科技條件平臺檢測與認證領域中心、浙江
CRISPR/Cas9基因編輯技術深受研究人員的喜愛，那么它為什么如此優秀呢？ CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromicrepeats）規律成簇間隔短回文重復；Cas9（CRISPR associated nucle
優秀的基因編輯技術CRISPR/Cas9基因編輯技術深受研究人員的喜愛，那么它為什么如此優秀呢？CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromicrepeats）規律成簇間隔短回文重復；Cas9（CRISPR associated nuc
俞曉峰博士現任賽業模式生物副總裁、高級科學家，負責基因修飾模式動物的研發與技術服務等工作。 俞博士在遺傳基因模式動物領域有超過20年研發與管理等方面的豐富經驗，在干細胞相關領域及哺乳動物細胞系基因改造研究也取得了巨大成就，其研究成果多次發表在Nature Immunology、Hum Mo
轉眼已至年末，回望即將結束得2016，精準醫療各個領域均取得了不俗的成績。今天小編就和大家盤點一下2016年影響全年并且將繼續產生影響的精準醫療突破。別急，我們慢慢聊。 基因編輯工具CRISPR的專利和應用 年末大盤點：影響2016的精準醫療突破 基因編輯工具CRISPR–Cas9的新應用