關于逆轉錄酶的基本信息介紹
反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'-OH 末端上,根據堿基配對的原則,按5'-3'方向合成一條與RNA 模板互補的DNA 單鏈,這條DNA 單鏈叫做互補DNA (complementary DNA,CDNA)。 [1] 反轉錄酶(Reverse transcriptase)是以RNA為模板指導三磷酸脫氧核苷酸合成互補DNA(cDNA)的酶。哺乳類C型病毒的反轉錄酶和鼠類B型病毒的反轉錄酶都是一條多肽鏈。鳥類RNA病毒的反轉錄酶則由兩上亞基結構。真核生物中也都分離出具有不同結構的反轉錄酶。......閱讀全文
關于逆轉錄酶的基本信息介紹
反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'-OH
關于逆轉錄酶的合成步驟介紹
1、使用前每個組份輕輕混勻,然后2000rpm離心20s 2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管,依次加入2~5μgRNAnμL 3、65℃保溫5min,然后冰浴5min; 4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份 RNase抑制劑(40u/μL)0.5μL 10×M-MLV
關于AMV逆轉錄酶的基本介紹
amv逆轉錄酶分離自禽類成髓細胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改進而來。分離得到的酶是分子量為157kd的αβ全酶。amv逆轉錄酶經高度純化,完全無核酸酶污染。amv逆轉錄酶可用于cdna合成,也可用于rna和dna的雙脫氧測序。amv逆轉錄酶以總rnd或polya+rnd為模板,具有以r
關于逆轉錄酶的醫學發展介紹
細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA(TTAGGG)序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂,端粒會丟失50~200bp,當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解,細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用,可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重
關于逆轉錄酶的社會效益介紹
由它催化轉錄合成的DNA稱為互補DNA(cDNA)。通常情況下,細胞內的轉錄應由DNA到RNA的,所得RNA為信使RNA(mRNA)供蛋白質合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要實現自身擴增,必須具有DNA,因此先由RNA逆轉錄合成cDNA再由cDNA轉錄出RNA。逆轉錄酶可用RT—PCR,將R
關于逆轉錄酶的使用說明介紹
M-MLV反轉錄酶比AMV反轉錄酶缺乏連續性,因此要獲得像AMV反轉錄酶反應中產生同樣量的cDNA就要求使用較多單位的M-MLV反轉錄酶。用1微克的mRNA起始合成第一條鏈的cDNA,要用8單位的M-MLV反轉錄酶才相當于1單位的AMV反轉錄酶的作用。該酶很容易被亞精胺(Spermidine)所
關于逆轉錄酶的注意事項介紹
在進行RT反應之前,應考慮以下幾個方面: 1、RNA 成功的cDNA合成來自高質量的RNA,高質量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉錄酶的抑制劑,如EDTA或SDS。在提取RNA的過程中,要特別防止RNase的污染,同時在逆轉錄反應中經常加入RNase抑制劑以增加cDNA合成的長度和產量。R
關于逆轉錄酶的質量控制介紹
1.切口酶:在與200單位酶37oC保溫60分鐘后,超螺旋質粒保留在90%以上。 2.DNase測定:200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于1%。 3.RNase測定:200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于3%。 4.
關于逆轉錄酶抑制劑的基本介紹
獲得性免疫缺陷綜合征(艾滋病,AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的嚴重傳染性疾病。HIV是一種逆轉錄病毒,其逆轉錄過程就是在病毒逆轉錄酶的作用下,以病毒RNA為模板合成前病毒DNA的過程。病毒逆轉錄酶在病毒生命周期中的獨特功能使其成為抗病毒治療的重要靶點 。逆轉錄酶抑制劑能夠特異性作用于
關于AMV逆轉錄酶的特點和應用介紹
一、特點介紹 1.高靈敏度2、高得率 3.高達60℃的反應溫度可有效打開rna二級結構 4.可合成長至10-12kb的cdna 5.rt反應液可適用不同用途 二、應用 1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃經amv酶逆轉錄后進行pcr的產物電泳結果2、1
關于逆轉錄酶的簡介
多反轉錄酶都具有多種酶活性,主要包括以下幾種活性 。 ①RNA指導的DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反
逆轉錄酶抑制劑的基本信息
獲得性免疫缺陷綜合征(艾滋病,AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的嚴重傳染性疾病。HIV是一種逆轉錄病毒,其逆轉錄過程就是在病毒逆轉錄酶的作用下,以病毒RNA為模板合成前病毒DNA的過程。病毒逆轉錄酶在病毒生命周期中的獨特功能使其成為抗病毒治療的重要靶點 。逆轉錄酶抑制劑能夠特異性作用于病毒
逆轉錄酶的活性介紹
①RNA指導的DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。②RNase H活性;
關于逆轉錄酶抑制劑的概述
逆轉錄酶(RT)早于1964年發現,在結構上逆轉錄酶由兩個亞基α和β組成,α亞基的分子量為6.2萬,β亞基的分子量為9.5萬。在功能上,逆轉錄酶具有DNA聚合酶、內切酶和類似RNaseH活性;同時具有結合t-RNA和解開DNA-DNA或RNA-DNA的活性。逆轉錄酶在宿主細胞內有3個基因表達為多
關于白喉的基本信息介紹
白喉(diphtheria)是由白喉桿菌所引起的一種急性呼吸道傳染病,以發熱,氣憋,聲音嘶啞,犬吠樣咳嗽,咽、扁桃體及其周圍組織出現白色偽膜為特征。嚴重者全身中毒癥狀明顯,可并發心肌炎和周圍神經麻痹。 2022年7月3日,澳大利亞新南威爾士州北部的一名2歲兒童確診白喉,4日,一名6歲兒童確認為
關于腹水的基本信息介紹
正常狀態下,人體腹腔內有少量液體(一般少于200ml),對腸道蠕動起潤滑作用。任何病理狀態下導致腹腔內液體量增加,超過200ml時稱為腹腔積液(ascites)。腹腔積液僅是一種病征,產生腹腔積液的病因很多,比較常見的有心血管病、肝臟病、腹膜病、腎臟病、營養障礙病、惡性腫瘤腹腔轉移、卵巢腫瘤、結
關于補體的基本信息介紹
補體是一種血清蛋白質,存在于人和脊椎動物血清及組織液中,不耐熱,活化后具有酶活性、可介導免疫應答和炎癥反應。可被抗原-抗體復合物或微生物所激活,導致病原微生物裂解或被吞噬。可通過三條既獨立又交叉的途徑被激活,即經典途徑、旁路途徑和凝集素途徑。
關于多肽的基本信息介紹
肽是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,是蛋白質水解的中間產物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等。由三個或三個以上氨基酸分子組成的肽叫多肽。
關于斜視的基本信息介紹
斜視(squint)是指兩眼不能同時注視目標,屬眼外肌疾病,可分為共同性斜視和麻痹性斜視兩大類。共同性斜視以眼球無運動障礙、第一眼位和第二眼位斜視度相等為主要臨床特征;麻痹性斜視則有眼球運動受限,復視,可為先天性,也可因外傷、或全身性疾病導致。
關于膽紅素的基本信息介紹
膽紅素是膽色素的一種,是人膽汁中的主要色素。膽紅素是體內鐵卟啉化合物的主要代謝產物,有毒性,可對大腦和神經系統引起不可逆的損害,但也有抗氧化劑功能,可以抑制亞油酸和磷脂的氧化。膽紅素是臨床上判定黃疸的重要依據,也是肝功能的重要指標。
關于唇炎的基本信息介紹
唇炎是發生于唇部的炎癥性疾病的總稱。根據病程分類有急性唇炎和慢性唇炎;根據臨床癥狀特征分類有糜爛性唇炎、濕疹性唇炎、脫屑性唇炎;根據病因病理分類有慢性非特異性唇炎、腺性唇炎、良性淋巴增生性唇炎、肉芽腫性唇炎、梅-羅綜合征、光化性唇炎和變態反應性唇炎等。
關于紫紺的基本信息介紹
紫紺是指血液中還原血紅蛋白增多,導致皮膚和黏膜呈青紫色改變的一種臨床表現,俗稱為發紺。全身皮膚、黏膜均可出現發紺,但在皮膚較薄、色素較少和毛細血管豐富的部位,如口唇、鼻尖、舌、頰部等處較明顯。
關于梅毒的基本信息介紹
梅毒是由蒼白(梅毒)螺旋體引起的慢性、系統性性傳播疾病。主要通過性途徑傳播,臨床上可表現為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潛伏梅毒和先天梅毒(胎傳梅毒)等。是《中華人民共和國傳染病防治法》中,列為乙類防治管理的病種。
關于白介素的基本信息介紹
白細胞介素,簡稱白介素,是指在白細胞或免疫細胞間相互作用的淋巴因子,它和血細胞生長因子同屬細胞因子。兩者相互協調,相互作用,共同完成造血和免疫調節功能。白細胞介素在傳遞信息,激活與調節免疫細胞,介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用。
關于阿糖胞苷的基本信息介紹
阿糖胞苷是一種有機化合物,化學式為C9H13N3O5,臨床上主要作為細胞S增殖期的嘧啶類抗代謝藥物,通過抑制細胞DNA的合成干擾細胞的增殖。 基本信息 化學式:C9H13N3O5 分子量:243.217 CAS號:147-94-4 EINECS號:205-705-9
關于咯血的基本信息介紹
咯血是指喉部以下的呼吸器官(即氣管、支氣管或肺組織)出血,并經咳嗽動作從口腔排出的過程。咯血不僅可由呼吸系統疾病引起,也可由循環系統疾病、外傷以及其他系統疾病或全身性因素引起。應與口腔、咽、鼻出血以及嘔血相鑒別。
關于流感的基本信息介紹
流行性感冒,簡稱流感,是由甲、乙、丙三型流感病毒分別引起的一種急性呼吸道疾病,屬于丙類傳染病。 流感在中國以冬春季多見,臨床表現以高熱、乏力、頭痛、咳嗽、全身肌肉酸痛等全身中毒癥狀為主,而呼吸道癥狀較輕。 流感病毒容易發生變異,傳染性強,人群普遍易感,發病率高,歷史上在全世界引起多次暴發性流
關于乳突炎的基本信息介紹
乳突炎是乳突氣房黏膜及骨質的急性化膿性炎癥,多由急性化膿性中耳炎發展而來。乳突炎性病變雖繼續發展,而全身及局部癥狀卻不明顯,以致不被發現,稱隱性乳突炎。急性乳突炎如不能得到控制,炎癥繼續發展,可穿破乳突骨壁,引起顱內、外并發癥。
關于腎癌的基本信息介紹
腎癌是起源于腎實質泌尿小管上皮系統的惡性腫瘤,學術名詞全稱為腎細胞癌,又稱腎腺癌,簡稱為腎癌。包括起源于泌尿小管不同部位的各種腎細胞癌亞型,但不包括來源于腎間質的腫瘤和腎盂腫瘤。早在1883年德國的病理學家Grawitz根據顯微鏡下看癌細胞形態類似于腎上腺細胞,提出腎癌是殘存于腎臟內的腎上腺組織
關于胃癌的基本信息介紹
胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,胃癌發病有明顯的地域性差別,在我國的西北與東部沿海地區胃癌發病率比南方地區明顯為高。好發年齡在50歲以上,男女發病率之比為2:1。由于飲食結構的改變、工作壓力增大以及幽門螺桿菌的感染等原因,使得胃癌呈現年輕化傾向。胃癌可發生