關于AMV逆轉錄酶的基本介紹
amv逆轉錄酶分離自禽類成髓細胞瘤病毒，其方法由houts等人的方法改進而來。分離得到的酶是分子量為157kd的αβ全酶。amv逆轉錄酶經高度純化，完全無核酸酶污染。amv逆轉錄酶可用于cdna合成，也可用于rna和dna的雙脫氧測序。amv逆轉錄酶以總rnd或polya+rnd為模板，具有以rna為模板的dna聚合酶活性，dna為模板的dna聚合酶活性和rnaseh酶活性，最適反應溫度在42-55℃，最高可達60℃，如果使用焦磷酸鈉，最適溫度為37-41℃。rtt反應緩沖液根據不同用途可以作為5x或10x反應液使用，同時可抑制rnaseh酶活性。按照標準使用方法可以得到長至10-12kbcdna。rt007amv逆轉錄酶比普通amv逆轉錄酶和mmlv逆轉錄酶能耐受更高的溫度和合成更長的cdna。......閱讀全文
關于AMV逆轉錄酶的基本介紹
amv逆轉錄酶分離自禽類成髓細胞瘤病毒，其方法由houts等人的方法改進而來。分離得到的酶是分子量為157kd的αβ全酶。amv逆轉錄酶經高度純化，完全無核酸酶污染。amv逆轉錄酶可用于cdna合成，也可用于rna和dna的雙脫氧測序。amv逆轉錄酶以總rnd或polya+rnd為模板，具有以r
關于AMV逆轉錄酶的特點和應用介紹
一、特點介紹 1．高靈敏度2、高得率 3．高達60℃的反應溫度可有效打開rna二級結構 4．可合成長至10-12kb的cdna 5．rt反應液可適用不同用途 二、應用 1．1μg helatotalrna在42℃，50℃，55℃，60℃經amv酶逆轉錄后進行pcr的產物電泳結果2、1
關于逆轉錄酶的基本信息介紹
反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶，該酶以RNA 為模板，以dNTP 為底物，tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物，在tRNA 3'-OH
關于逆轉錄酶抑制劑的基本介紹
獲得性免疫缺陷綜合征（艾滋病，AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的嚴重傳染性疾病。HIV是一種逆轉錄病毒，其逆轉錄過程就是在病毒逆轉錄酶的作用下，以病毒RNA為模板合成前病毒DNA的過程。病毒逆轉錄酶在病毒生命周期中的獨特功能使其成為抗病毒治療的重要靶點 。逆轉錄酶抑制劑能夠特異性作用于
關于逆轉錄酶的合成步驟介紹
1、使用前每個組份輕輕混勻，然后2000rpm離心20s 2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管，依次加入2～5μgRNAnμL 3、65℃保溫5min，然后冰浴5min； 4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份 RNase抑制劑（40u/μL）0.5μL 10×M-MLV
關于逆轉錄酶的醫學發展介紹
細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA（TTAGGG）序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂，端粒會丟失50～200bp，當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解，細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用，可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重
關于逆轉錄酶的社會效益介紹
由它催化轉錄合成的DNA稱為互補DNA(cDNA)。通常情況下，細胞內的轉錄應由DNA到RNA的，所得RNA為信使RNA（mRNA）供蛋白質合成作模板用。而在部分RNA病毒中，要實現自身擴增，必須具有DNA，因此先由RNA逆轉錄合成cDNA再由cDNA轉錄出RNA。逆轉錄酶可用RT—PCR，將R
關于逆轉錄酶的使用說明介紹
M-MLV反轉錄酶比AMV反轉錄酶缺乏連續性，因此要獲得像AMV反轉錄酶反應中產生同樣量的cDNA就要求使用較多單位的M-MLV反轉錄酶。用1微克的mRNA起始合成第一條鏈的cDNA，要用8單位的M-MLV反轉錄酶才相當于1單位的AMV反轉錄酶的作用。該酶很容易被亞精胺(Spermidine)所
關于逆轉錄酶的注意事項介紹
在進行RT反應之前，應考慮以下幾個方面： 1、RNA 成功的cDNA合成來自高質量的RNA，高質量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉錄酶的抑制劑，如EDTA或SDS。在提取RNA的過程中，要特別防止RNase的污染，同時在逆轉錄反應中經常加入RNase抑制劑以增加cDNA合成的長度和產量。R
關于逆轉錄酶的質量控制介紹
1.切口酶：在與200單位酶37oC保溫60分鐘后，超螺旋質粒保留在90%以上。 2.DNase測定：200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘，分解出的放射性低于1%。 3.RNase測定：200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘，分解出的放射性低于3%。 4.
關于逆轉錄酶的簡介
多反轉錄酶都具有多種酶活性，主要包括以下幾種活性 。 ①RNA指導的DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反
逆轉錄酶的活性介紹
①RNA指導的DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。②RNase H活性；
逆轉錄酶抑制劑的基本信息
獲得性免疫缺陷綜合征（艾滋病，AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的嚴重傳染性疾病。HIV是一種逆轉錄病毒，其逆轉錄過程就是在病毒逆轉錄酶的作用下，以病毒RNA為模板合成前病毒DNA的過程。病毒逆轉錄酶在病毒生命周期中的獨特功能使其成為抗病毒治療的重要靶點 。逆轉錄酶抑制劑能夠特異性作用于病毒
關于逆轉錄酶抑制劑的概述
逆轉錄酶（RT）早于1964年發現，在結構上逆轉錄酶由兩個亞基α和β組成，α亞基的分子量為6.2萬，β亞基的分子量為9.5萬。在功能上，逆轉錄酶具有DNA聚合酶、內切酶和類似RNaseH活性；同時具有結合t-RNA和解開DNA-DNA或RNA-DNA的活性。逆轉錄酶在宿主細胞內有3個基因表達為多
依賴核酸序列的擴增技術解析
1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-basedamplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self-sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NA
反轉錄聚合酶鏈反應的操作注意事項
1、合成cDNA的引物：合成cDNA引物時，通常采用隨機六核苷酸引物能夠有效地指導從RNA有效地合成第一鏈cDNA：2、避免RNA酶的污染：在合成cDNA第一鏈時，應使用RNA酶抑制劑，進行RT-PCR時，用于合成cDNA第一鏈的RNA不會對PCR有影響，因此沒有必要用堿或RNA酶處理；3、不同來源
RTPCR技術的注意事項
1、合成cDNA的引物：合成cDNA引物時，通常采用隨機六核苷酸引物能夠有效地指導從RNA有效地合成第一鏈cDNA：2、避免RNA酶的污染：在合成cDNA第一鏈時，應使用RNA酶抑制劑，進行RT-PCR時，用于合成cDNA第一鏈的RNA不會對PCR有影響，因此沒有必要用堿或RNA酶處理；3、不同來源
關于cDNA探針的意義的介紹
逆轉錄現在已成為一項重要的分子生物學技術，廣泛用于基因的克隆和表達。從逆轉錄病毒中提取的逆轉錄酶已商品化，最常用的有AMV逆轉錄酶。利用真核Mrna3’末端存在一段聚腺苷酸尾，可以合成一段寡聚胸苷酸（oligo(dT)）用作引物，在逆轉錄酶催化下合成互補于mRNA的cRNA鏈，然后再用RNase
增加RTPCR靈敏度
分離高質量RNA成功的cDNA合成來自高質量的RNA。高質量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉錄酶的抑制劑，如EDTA或SDS。RNA的質量決定了你能夠轉錄到cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA純化方法是使用異硫氰酸胍／酸性酚的一步法。Trizol試劑法（見下圖）將一步法加以提高，可以從多種
RNA逆轉錄(RT)過程
一，準備工作? ? 1， 實驗器具與材料: (1)移液槍:200ul、10ul (2)吸頭:200ul、20ul (3)EP 管 1.5ml、100ul (4)水浴箱 2，實驗器具的處理與準備? ? 逆轉錄(RT)? ? 塑料制品:(包括吸頭、EP 管等)? ? 將塑料制品逐個浸泡于 1‰DEPC
依賴核酸序列的擴增技術的定義和原理
1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self- sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.
關于甲溝炎的基本介紹
甲溝炎（paronychia）是一種累及甲周圍皮膚皺襞的炎癥反應，表現為急性或慢性化膿性、觸痛性和疼痛性甲周組織腫脹，由甲皺襞膿腫引起。當感染變成慢性時，甲基底部出現橫嵴，并隨著復發出現新嵴。手指受累較腳趾更常見。主要易感因素為損傷導致甲上皮與甲板分離，化膿性球菌或酵母菌可繼發性侵入潮濕的甲溝和
關于強脊炎的基本介紹
強脊炎屬于風濕病范疇，是血清陰性脊柱關節病中的一種。研究表明，該病原因尚不很明確，以脊柱為主要病變的慢性疾病，病變主要累及骶髂關節，引起脊柱強直和纖維化，造成彎腰、行走活動受限，并可有不同程度的眼、肺、肌肉、骨骼的病變，也有自身免疫功能的紊亂，所以又屬自身免疫性疾病。
關于丙磺舒的基本介紹
丙磺舒（Probenecid）抑制尿酸鹽在近曲腎小管的主動再吸收，增加尿酸鹽的排泄而降低血中尿酸鹽的濃度。可緩解或防止尿酸鹽結節的生成，減少關節的損傷，亦可促進已形成的尿酸鹽溶解。無抗炎、鎮痛作用。可以競爭性抑制弱有機酸（如青霉素、頭孢菌素）在腎小管的分泌，故可以增加這些抗生素的血藥濃度和延長它
關于鼻衄的基本介紹
鼻衄是臨床常見的癥狀之一，俗稱鼻出血。可由鼻部疾病引起，也可由全身疾病所致。鼻出血多為單側，少數情況下可出現雙側鼻出血；出血量多少不一，輕者僅為涕中帶血，重者可引起失血性休克，反復鼻出血可導致貧血。
關于皰疹的基本介紹
皰疹是指皰疹病毒科病毒所致疾病。目前已知在皰疹病毒科中有八種病毒（單純皰疹病毒1、2型，水痘-帶狀皰疹病毒，人巨細胞病毒，EB病毒和人類皰疹病毒6、7、8型）可造成人類疾病，這類病毒被統稱為人類皰疹病毒（HHV）。HHV是一組中等大小的有囊膜的DNA病毒，能引起人類多種疾病，并能長期潛伏在體內，
關于氣胸的基本介紹
氣胸（pneumothorax）是指氣體進入胸膜腔，造成積氣狀態，稱為氣胸。多因肺部疾病或外力影響使肺組織和臟層胸膜破裂，或靠近肺表面的細微氣腫泡破裂，肺和支氣管內空氣逸入胸膜腔。因胸壁或肺部創傷引起者稱為創傷性氣胸；因疾病致肺組織自行破裂引起者稱“自發性氣胸”，如因治療或診斷所需人為地將空氣注
關于苯妥英鈉的基本介紹
苯妥英鈉（Phenytoin sodium）對大腦皮層運動區有高度選擇性抑制作用，一般認為是通過穩定腦細胞膜的功能及增加腦內抑制性神經遞質5-羥色胺（5-HT）和γ-氨基丁酸（GABA）的作用，來防止異常放電的傳播而具有抗癲癇的作用。抗神經痛的作用機制可能與本品作用與中樞神經系統，降低突觸傳遞或
關于端粒的基本介紹
端粒（英文名：Telomere）是存在于真核細胞線狀染色體末端的一小段DNA-蛋白質復合體，端粒短重復序列與端粒結合蛋白一起構成了特殊的“帽子”結構，作用是保持染色體的完整性和控制細胞分裂周期。端粒、著絲粒和復制原點是染色體保持完整和穩定的三大要素。 端粒的長度反映細胞復制史及復制潛能，被稱作
關于阿斯巴甜的基本介紹
阿斯巴甜作為一種重要的甜味劑,被廣泛應用于藥劑加工和食品加工中,其安全性非常重要。雖然市場上部分甜味劑已由阿斯巴甜更換成果葡糖漿等安全性相對較高的甜味劑,但其應用仍十分廣泛, 尤其過量使用,可能會影響人們的生命安全。 天門冬酰苯丙胺酸甲酯俗稱阿斯巴甜,化學式為C14H18N2O5,在室溫下以白