【卡梅德生物】噬菌體展示肽庫構建與篩選
噬菌體是一種感染細菌的病毒，具有能夠在其表面展示外源肽或蛋白質的能力。通過基因工程方法，研究人員可以將外源DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白的編碼區，使得外源肽與外殼蛋白共同表達，形成展示在噬菌體表面的融合蛋白。噬菌體展示技術是一種重要的生物技術，它可以用于發現新的藥物靶點、疫苗設計以及研究蛋白質-蛋白質相互作用。本文將概述噬菌體展示肽庫的構建方法和篩選過程，并討論其在藥物發現和生物工程中的應用。一、噬菌體展示肽庫構建的基本原理肽庫的構建開始于設計一系列隨機或半隨機的DNA序列，這些序列編碼所需長度和復雜性的肽段。然后將這些序列克隆到噬菌體外殼蛋白的基因中，通常是pIII或pVIII蛋白。通過感染宿主細菌，可以產生展示隨機肽庫的噬菌體群。噬菌體展示肽庫的構建基于噬菌體感染細菌宿主的機制，使其能夠在噬菌體顆粒的外部表面顯示多肽或蛋白質。噬菌體展示肽庫構建步驟：1. 選擇噬菌體類型和載體： 首先，選擇適合實驗需求的噬菌體類型，......閱讀全文
【卡梅德生物】噬菌體展示肽庫構建與篩選
噬菌體是一種感染細菌的病毒，具有能夠在其表面展示外源肽或蛋白質的能力。通過基因工程方法，研究人員可以將外源DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白的編碼區，使得外源肽與外殼蛋白共同表達，形成展示在噬菌體表面的融合蛋白。噬菌體展示技術是一種重要的生物技術，它可以用于發現新的藥物靶點、疫苗設計以及研究蛋白質-蛋白
【卡梅德生物】SELEX技術|核酸適配體文庫篩選服務
? ?核酸適配體文庫篩選是一項關鍵的技術，為發現特定核酸序列與目標分子高度親和結合的適配體提供了強有力的工具。這一技術在諸多領域中展現了突破性的應用，包括藥物開發、診斷技術以及基因治療等。? ?核酸適配體是一類能夠與目標分子特異性結合的寡核苷酸序列，其結構和功能類似于抗體。與抗體相比，核酸適配體具有
單域抗體|納米抗體|VHH文庫構建
單域抗體，也稱為VHH（Variable domain of heavy chain of HCAb）抗體或納米抗體，是一種小型抗體分子。與傳統抗體相比，VHH具有更小的分子尺寸、更高的穩定性和更易于工程化的特點，具有廣泛的生物醫學應用潛力。單域抗體文庫的構建是開發和優化這些抗體的關鍵步驟之一。?一
【卡梅德生物】細胞永生化的方法介紹
一、背景：細胞永生化，即細胞繞過壽命的自然限制并持續分裂的能力，是一個有趣而重要的現象，對癌癥研究、衰老以及生物學和醫學的各個分支都有影響。本文探討了實現細胞永生的方法，闡明了它們的應用以及對科學研究和醫學進步的更廣泛影響。二、細胞永生化的方法1.端粒酶的激活：細胞永生化背后的主要機制之一涉及端粒酶
【卡梅德生物】為什么研究細胞永生化？
研究和理解細胞永生化過程的能力在生物醫學研究領域具有巨大意義。細胞永生化是指細胞獲得無限的增殖潛力，使其無限期地繼續分裂。這種現象在各種生物過程中起著關鍵作用，包括癌癥的發展、衰老和組織再生。通過研究細胞永生化，研究人員可以對這些過程獲得有價值的見解，并為疾病治療和再生醫學的進步做出貢獻。癌癥研究是
噬菌體抗體庫的富集篩選
實驗概要用于噬菌體抗體庫富集篩選的抗原至關重要，一般來說，純化后的可溶性蛋白純度高，含量大，可直接包被ELISA板，是篩選特異性抗體的最佳選擇。在某種情況下，需要獲得針對某一特殊蛋白的單克隆抗體，也可以用抗這種蛋白的單克隆抗體捕捉抗原的方法來進行篩選。實驗步驟1. 將用于篩選特異性抗體的抗原用0.1
噬菌體展示技術的原理及應用
將編碼多肽的外源DNA片段與噬菌體表面蛋白的編碼基因融合（插入信號肽與衣殼蛋白基因間）后，以融合蛋白的形式呈現在噬菌體的表面，每個噬菌體只含1個外源基因，被展示的多肽或蛋白可保持相對的空間結構和生物活性，展示在噬菌體的表面。導入了各種各樣外源基因的一群噬菌體，就構成一個展示各種各樣外源肽的噬菌體展示
噬菌體抗體庫的菌落篩選法
實驗概要本實驗介紹了噬菌體抗體庫的菌落篩選操作流程。實驗步驟1. 將每輪篩選洗脫的噬菌體用來感染新鮮的XLIBlu菌，以10μl、20μl等不同量菌液涂于LB氨芐青霉素平皿，37℃ 4~5h。2. 事先將硝酸纖維素膜在5mmol/L的IPTG溶液中浸泡10min，在超凈臺中晾干后，鋪在上述涂有細菌的
雜交瘤和噬菌體展示篩選方法開發
Part 1前言ELISA方法用于雜交瘤和噬菌體展示篩選是為廣泛的高通量的抗體發現的篩選方法，其實質是親和力測定方法的一種變種，其目的是需要建立ELISA信號值和樣品親和力大小之間的正相關性。相對于采用ELISA進行抗體的親和力測定方法，用于雜交瘤和噬菌體展示篩選的ELISA方法有以下難點，1.待測
噬茵體展示技術和噬菌體抗體庫
噬菌體展示技術是一種強有力的基因表達篩選技術，1985年首次由美國科學家SmithMl在(Science))雜志進行了闡述。噬菌體展示技術的基本原理是將外源蛋白的基因克隆到噬菌體的基因組DNA中，從而在噬菌體的表面表達特定的外源蛋白。Ellis SEp等指出利用噬菌體展示多肽庫可以篩選和確定線蟲
噬茵體展示技術和噬菌體抗體庫
噬菌體展示技術是一種強有力的基因表達篩選技術，1985年首次由美國科學家SmithMl在(Science)雜志進行了闡述。噬菌體展示技術的基本原理是將外源蛋白的基因克隆到噬菌體的基因組DNA中，從而在噬菌體的表面表達特定的外源蛋白。Ellis SEp等指出利用噬菌體展示多肽庫可以篩選和確定線蟲疫苗的
【卡梅德生物】細胞永生化方法介紹：EBV細胞永生化
一、簡介：在科學研究領域，細胞永生化已被證明是一種變革性技術，為研究人員提供了源源不斷的細胞，用于研究各種生物過程和解開疾病之謎。實現細胞永生化的最顯著方法之一是使用EB病毒，這是一種具有使人類B淋巴細胞永生化獨特能力的顯著病毒。本文探討了EBV細胞永生化方法及其在生物學領域的廣泛應用。?二、EB病
概述噬茵體展示技術和噬菌體抗體庫
噬菌體展示技術是一種強有力的基因表達篩選技術，1985年首次由美國科學家SmithMl在(Science)雜志進行了闡述。噬菌體展示技術的基本原理是將外源蛋白的基因克隆到噬菌體的基因組DNA中，從而在噬菌體的表面表達特定的外源蛋白。 Ellis SEp等指出利用噬菌體展示多肽庫可以篩選和確定線
噬菌體展示技術的技術原理
噬菌體展示技術其基本原理是：將編碼多肽的外源DNA片段與噬菌體表面蛋白的編碼基因融合后，以融合蛋白的形式呈現在噬菌體的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相對的空間結構和生物活性，展示在噬菌體的表面。導入了各種各樣外源基因的一群噬菌體，就構成一個展示各種各樣外源肽的噬菌體展示庫。當用一個蛋白質去篩查一個噬
噬菌體展示技術的原理
噬菌體展示技術其基本原理是：將編碼多肽的外源DNA片段與噬菌體表面蛋白的編碼基因融合后，以融合蛋白的形式呈現在噬菌體的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相對的空間結構和生物活性，展示在噬菌體的表面。導入了各種各樣外源基因的一群噬菌體，就構成一個展示各種各樣外源肽的噬菌體展示庫。當用一個蛋白質去篩查一個噬
構建硫氧還蛋白肽適配體組合庫實驗
實驗材料E.coli MC 1061 （Bio－Rad）硫氧還蛋白表達載體質粒DNA 洗脫液試劑、試劑盒DNA 聚合酶DNA 連接酶小牛腸堿性磷酸酶（CIP）限制性內切核酸酶反應緩沖液4dNTPTris·Cl培養基儀器、耗材QIAquick 膠回收試劑盒質粒制備試劑盒DNA 合成儀16℃ 和 95℃
構建硫氧還蛋白肽適配體組合庫實驗
實驗方法原理 實驗材料 E.coli MC 1061 （Bio－Rad）硫氧還蛋白表達載體質粒DNA 洗脫液試劑、試劑盒 DNA 聚合酶DNA 連接酶小牛腸堿性磷酸酶（CIP）限制性內切核酸酶反應緩沖液 4dNTPTris·Cl培養基儀器、耗材 QIAquick 膠回收試劑盒質粒制備試劑盒DNA 合
【卡梅德生物】兔多抗制備|兔多克隆抗體制備|兔抗體
? 多克隆抗體是指由多種免疫細胞產生的針對特定抗原的抗體群體。與單克隆抗體相比，多克隆抗體可以識別抗原的多個表位，因此在某些應用中更為有效。兔是制備多克隆抗體的常用動物模型，因其體型適中、免疫反應良好且抗體產量高。? 兔多抗（Polyclonal antibodies）是一種多克隆抗體，由多個B細胞
噬菌體展示技術與抗體藥物研發
2018年諾貝爾化學獎塵埃落定，授予Frances Arnold、George Smith、Gregory Winter三人。其中化學獎一半的獎金授予美國科學家Frances Arnold，獎勵她的工作實現了酶的定向進化；另一半的獎金授予英國科學家Gregory Winter以及美國科學家Geo
篩選構建于λ噬菌體載體的表達文庫實驗
在典型的免疫篩選實驗中，λ噬菌體表達載體構建的文庫應鋪在不含異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG) 的大腸桿菌菌株的平板上。誘導物的缺少保證了噬菌斑順利形成前不產生對宿主有毒性的融合蛋白，2~4 h 后，將平板從 42°C 移到 37°C 以穩定溫度敏感型的所有融合蛋白。本實驗來源于分子克隆實驗指
篩選構建于λ噬菌體載體的表達文庫實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 封閉緩沖液 氯仿 IPTG 抗原-抗體復合物檢測試劑 SM TNT 緩沖液 洗滌緩沖液 放射
噬菌體展示技術
1985年，Smith G P第一次將外源基因插入絲狀噬菌體f1的基因Ⅲ，使目的基因編碼的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌體表面，從而創建了噬菌體展示技術。該技術的主要特點是將特定分子的基因型和表型統一在同一病毒顆粒內，即在噬菌體表面展示特定蛋白質，而在噬菌體核心DNA中則含有該蛋白的結構基因。另
噬菌體展示技術常見問題與解答
1、在噬菌體展示技術的應用中，M13噬菌體與其他噬菌體比有什么優點？ M13噬菌體和與其密切相關的絲狀噬菌體fd和f1均為非裂解性噬菌體，它們在增殖期間均不裂解宿主菌。這就極大地簡化了每輪淘選過程之間的中間噬菌體純化步驟，只用簡單的PEG沉淀方法就足以將噬菌體與其他所有污染的細胞蛋白分開
運用肽庫篩選磷酸化激酶motif方法
Screening Kinase Phosphorylation Motifs Using Peptide LibrariesIsaac A. Manke and Michael B. YaffeCenter for Cancer Research, Massachusetts Institute
篩選構建于λ噬菌體載體的表達文庫實驗（一）
試劑、試劑盒 封閉緩沖液氯仿IPTG抗原-抗體復合物檢測試劑SMTNT 緩沖液洗滌緩沖液放射性碘標記第二抗體第一抗體LB 瓊脂板LB 頂層瓊脂板硝酸纖維素濾膜λ噬菌體表達文庫E.coli儀器、耗材 預設 42°C 的空氣培養箱培養管平頭鑷子裝有防水黑墨水（印度墨水）并帶有 18 號針頭的注射器實驗步
篩選構建于λ噬菌體載體的表達文庫實驗（二）
方法λ噬菌體的平板培養1. 取適當大腸桿菌菌株的單克隆進行接種，按第 2 章方案 1 介紹的方法制備用于鋪平板的培養細菌。2. 假定每個 90 mm 平皿和 150 mm 平皿分別可長出 2X104 個和 5X104 個噬菌斑，計算篩選文庫所需平皿數。對應每個平皿準備一個無菌試管（13 mm
噬菌體展示技術簡介
噬菌體展示技術是一種將外源肽或蛋白基因與噬菌體特定蛋白基因在其表面進行融合表達的新技術。該技術實現了表型與基因型的統一。隨著噬菌體展示技術的進一步發展，其優越性被越來越多的實驗室所認識，使得該技術的使用范圍不斷擴展，也使該技術得以不斷的完善和發展。
噬菌體展示技術介紹
噬菌體展示技術(phage display technology)是將多肽或蛋白質的編碼基因或目的基因片段克隆入噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，在閱讀框正確且不影響其他外殼蛋白正常功能的情況下，使外源多肽或蛋白與外殼蛋白融合表達，融合蛋白隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體表面。被展示的多肽或
納米抗體制備新平臺：羊駝VHH－SingleB?快速發現
羊駝等駱駝科動物體內天然存在缺失輕鏈及重鏈CH1結構但完全保留抗原結合活性的重鏈抗體（HCAb），其中特異性結合抗原的重鏈可變區稱為單域抗體（sdAbs），即納米抗體（Nanobody），簡稱VHH，是最小單元抗原結合片段。納米抗體集傳統抗體與小分子藥物的優點于一體，并在諸多方面克服了傳統抗體的缺陷
利用現代生物技術進行多肽類藥物的生產和改進
??? 目前我國的生物技術藥物研究已開始步入自主創新時期，尤其是利用現代生物技術生產多肽類藥物將成為我國今后多肽類藥物生產和改進的主要途徑，具體有以下幾個方面。??? 1、利用組合化學與藥物高通量篩選相結合的技術開發多肽類藥物組合化學技術使一次合成成千上萬的多肽成為可能，藥物高通量篩選又可從成千