高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳（2-DE）是常用的對全蛋白組的分析方法，但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong等使用HPLC/質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC分離蛋白質，并用MALDI-TOF-MS鑒定收集的組分，從而在兩種細胞中的差異表達中對蛋白質進行定量分析。多維液相色譜作為一種新型分離技術，不存在相對分子質量和等電點的限制，通過不同模式的組合，消除了二維凝膠電泳的歧視效應，具有峰容量高、便于自動化等特點。二維離子交換-反相色譜(2D-IEC-RPLC)是蛋白質組學研究中最常用的多維液相色譜分離系統。......閱讀全文
選擇合適尺寸排阻色譜法分離蛋白質—選擇合適的色譜柱
（1）粒徑和柱長 在近年來SEC色譜柱技術得到發展之前，大多數使用的SEC色譜柱的直徑通常相對較大，通常為7.8 mm，長度為150至300 mm。由于使用了較大的顆粒，因此需要較長的色譜柱長度，其中大多數顆粒的機械強度不高，必須在相對較低的壓力下使用。SEC色譜柱技術的最新趨勢集中在開發具有
奶制品蛋白質、多肽液相色譜純化方法介紹
1、純化的一般目標和方法?首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。?然后進行捕獲色譜(capture chromatography)，主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步關心的是流速和載量，常采用高載量、快流速
不溶性蛋白質怎么測圓二色譜
1、首先取濃度大于0.5mg/ml，體積大于400ul的不溶性蛋白質。2、其次倒在一個容器中，然后倒入氫氧化鈉。3、最后靜置十分鐘，即可測出圓二色譜。
關于蛋白質組的高效液相色譜技術的介紹
盡管二維凝膠電泳（2-DE）是常用的對全蛋白組的分析方法，但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong 等使用HPLC/ 質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC 分離蛋白質，并用M
使用色譜法分離蛋白質的相關內容
許多類型的矩陣可以在市場上獲取，離子交換柱中充滿了攜帶正電荷或負電荷小珠子，因此蛋白質能夠根據其表面電荷的排列進行分類。疏水柱中填充有突出的疏水邊鏈的小珠子，選擇性地阻礙暴露疏水區域的蛋白質。根據蛋白質的尺寸對蛋白質進行分類的凝膠過濾柱，填充著微小的多孔珠：當它們通過柱子時，足夠小的能夠進入氣孔
色譜法的作用特征及分析蛋白質的治療藥物
色譜法在蛋白質治療藥物的表征和分析中占有突出地位，如今它在生物技術實驗室中發揮著關鍵作用。盡管反相色譜是用于此目的的最重要的色譜技術，但其他技術如離子交換，尺寸排阻，正相，親水相互作用和疏水相互作用色譜在表征和分析蛋白質藥物方面發揮著非常特殊的作用。?色譜法一直是蛋白質純化的重要工具。幾十年來，基于
如何用高效液相色譜（HPLC）進行蛋白質的純度檢測
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。
利用納升級液相色譜－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料:修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒:消化緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 萃取液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
利用納升級液相色譜－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒消化緩沖液萃取液清洗液脫色液儀器、耗材多通道移液槍Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管實驗步驟3.1 膠內蛋白的水解和多肽的提取（一天的實驗方案)對于從 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 電泳（經考馬斯亮藍 G-250
利用納升級液相色譜－－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料 修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒 消化緩沖液萃取液清洗液脫色液儀器、耗材 多通道移液槍Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管實驗步驟 3.1 膠內蛋白的水解和多肽的提取（一天的實驗方案)對于從 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 電泳（經考馬斯亮藍
比較疏水作用層析與反向液相色譜分離疏水性蛋白質
疏水作用色譜是根據分子表面疏水性的差異，分離蛋白質、多肽等生物大分子的常用方法。疏水基團經常暴露在蛋白質、多肽等生物大分子的表面。我們稱這些疏水基團為疏水斑塊。疏水性斑塊可以與疏水性色譜介質發生疏水性相互作用由于不同分子的疏水性不同它們與疏水色譜介質之間的疏水力是不同的疏水作用色譜是基于這一原理分離
選擇合適尺寸排阻色譜法分離蛋白質—選擇流動相
選擇色譜柱之后，下一個最重要的決定就是準確選擇將進入流動相的物質。如上所述，SEC分離的基本原則之一是應選擇條件，以使保留（化學意義上）最小。如果實現了此方法，則可確保洗脫體積是分子大小的指標。乍一看，這似乎應該很簡單-我們應該選擇一種固定相，該固定相不會通過與分析物的特定類型的相互作用而強烈地
二維液相色譜在蛋白質組學研究中的應用
?2001年2月人類基因組的全序列測序工作完成后，生命科學研究進入了后基因組時代。后基因組時代的任務是研究基因組的功能活動，即顯示生命所有遺傳信息轉移到整體水平上對生物功能的研究。但此類研究不能直接反應生命活動的執行體——蛋白質的種類和功能。? 在20世紀90年代中期在生命科學研究中，又開展了蛋白質
如何用高效液相色譜進行蛋白質的純度檢測及含量測定
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。
液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余的清洗
液相色譜儀檢測的對象是高沸點、難氣化的大分子化合物，其具有高效、快速、靈敏的特點，在生物醫藥研究、檢測方面有較多的應用。然而，在使用液相色譜儀檢測生物醫藥上的樣品時，由于行業特性，樣品中的蛋白質殘留，時常會對液相色譜柱造成污染。本文主要介紹液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余清洗方法。????在檢測
如何用高效液相色譜進行蛋白質的純度檢測及含量測定
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。
毛細管等電聚焦電泳色譜儀分離蛋白質的原理
蛋白質是一種兩性電解質分子，當它在大于其等電點的pH環境中時，會解離成帶負電的離子，在電場中向正極泳動；當它在小于其等電點的pH環境中時，會解離成帶正電荷的離子，在電場中向負極泳動。這種泳動作用到達它的等電點的pH環境中，即它的凈電荷為零時才會停止，此時蛋白質在電場作用下的遷移運動與擴散運動達到平衡
如何用高效液相色譜進行蛋白質的純度檢測及含量測定
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。
譚敏佳：色譜質譜雙翼護航－助力蛋白質組學新突破
分析測試百科網訊 2021年9月23日，賽默飛雙重新品線上直播發布會召開，重磅推出了Thermo Scientific? TSQ? Plus 三重四極桿質譜儀和Vanquish Neo UHPLC 系統，為蛋白質組學、精準醫學、制藥和生物制藥、臨床研究、轉化研究等領域提供了從色譜到質譜的高效、高
疏水作用層析與反向液相色譜分離疏水性蛋白質的比較
疏水作用層析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根據分子表面疏水性差別來分離蛋白質和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。蛋白質和多肽等生物大分子的表面常常暴露著一些疏水性基團，我們把這些疏水性基團稱為疏水補丁，疏水補丁可以與疏水性層析介質發生疏
蛋白質的蛋白質的提取技術
選擇材料及預處理? 以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方
蛋白質根據蛋白質結構進行分類
纖維蛋白（fibrous protein）：一類主要的不溶于水的蛋白質，通常都含有呈現相同二級結構的多肽鏈許多纖維蛋白結合緊密，并為單個細胞或整個生物體提供機械強度，起著保護或結構上的作用。球蛋白(globular protein)：緊湊的，近似球形的，含有折疊緊密的多肽鏈的一類蛋白質，許多都溶于水
蛋白質轉印法檢定蛋白質
蛋白質轉印法檢定蛋白質?????蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose）?上，先經?素洗去SDS，并使蛋白質回?原態抗原性，可使用抗體進?免疫染色?（Towbin?et?al,?1979）。儀器用具：電泳轉印槽?（Hoefer?Tra
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—蛋白質激酶C
試劑、試劑盒PKC 分析緩沖液組蛋白 HI 儲存液磷脂酰絲氨酸甘油二油酸脂實驗步驟1. 在冰浴的離心管內配制如下 20 μl 反應混合物：5X PKC 分析緩沖液??????????????????????????????????????? 4 μl10 mg/ml 組蛋白 HI 儲存液 ?????
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析—凝膠蛋白質激酶分析
試劑、試劑盒Tris-HClDTT鹽酸胍尿素激酶分析緩沖液儀器、耗材SDS-PAGE實驗步驟1. 準備下列材料：SDS-PAGE 要用到的所有試劑50 mmol/L Tris-HCl，室溫（pH 8.0)，1 mmol/L DTT6 mol/L 鹽酸胍，50 mmol/L Tris-HCl，室溫（p
如何清洗液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余
液相色譜儀檢測的對象是高沸點、難氣化的大分子化合物，其具有、快速、靈敏的特點，在生物醫藥研究、檢測方面有較多的應用。然而，在使用液相色譜儀檢測生物醫藥上的樣品時，由于行業特性，樣品中的蛋白質殘留，時常會對液相色譜柱造成污染。本文主要介紹液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余清洗方法。在檢測生物物質如血
如何清洗液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余？
液相色譜儀檢測的對象是高沸點、難氣化的大分子化合物，其具有高效、快速、靈敏的特點，在生物醫藥研究、檢測方面有較多的應用。然而，在使用液相色譜儀檢測生物醫藥上的樣品時，由于行業特性，樣品中的蛋白質殘留，時常會對液相色譜柱造成污染。本文主要介紹液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余清洗方法。在檢測生物物質
完全蛋白質、不完全蛋白質及半完全蛋白質的概念
完全蛋白質所含必需氨基酸種類齊全，數量充足，相互之問比例也適當，不但能夠維持成人的健康，也能夠促進人體的生長發育，如乳中的酪蛋白、蛋類中的卵白蛋白、大豆球蛋白、小麥中的麥符蛋白等。?半完全蛋白質所含各種必需氨基酸種類齊全，但各種氨基酸含量多少不勻，互相之間比例不合適。在膳食中作為唯一的蛋白質來源時，
蛋白質組和蛋白質組學分析
?隨著人類基因 組計劃研究成果的公布，人們對基因的認識逐漸清晰，但基因數量的有限性和基因結構的相對穩定性，與生命現象的復雜性和多樣性之間存在巨大反差。如何了解眾多的基因與危害人類身心健康的疾病之間的關系，對生命科學研究者來說仍是一項長期而艱巨的任務。因此，作為生命活動的直接承擔者――蛋白質，成為后基
蛋白質譜測定蛋白質的基礎原理
蛋白質是一條或者多條肽鏈以特殊方式組合而成的生物大分子，大多數蛋白質會自然折疊為一個特定的三維結構。蛋白質的結構層次可以分為一級結構、二級結構、三級結構和四級結構： 一級結構：組成蛋白質多肽鏈的線性氨基酸序列。 二級結構：依靠不同氨基酸之間的C=O和N-H基團間的氫鍵形成的穩定結構，主要為α