等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點 實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子，向電場的正極泳動，在小于其等電點的 pH 環境中解離成帶正由荷的陽離子，向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的 pH 環境中，即蛋白質所帶的凈電荷為零時才能停止。如果在一個有 pH 梯度的環境中，對各種不同等電點的蛋白質混合樣品進行電泳，則在電場作用下，不管這些蛋白質分子的原始分布如何，各種蛋白質分子將按照它們各自的等電點大小在 pH 梯度中相對應的位置處進行聚焦，經過一定時間的電泳以后，不同等電點的蛋白質分子便分別聚焦于不同的位置 。這種按等電點的大小，生物......閱讀全文
常見蛋白質的等電點
常見蛋白質等電點參考值?蛋白質 等電點鮭精蛋白[salmine] 12.1鯡精蛋白[clupeine] 12.1鱘精蛋白[sturline] 11.71胸腺組蛋白[thymohistone] 10.8珠蛋白（人）[globin(human)] 7.5卵白蛋白[ovalbuin] 4.71；4.59伴
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子，向電場的
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦（Isoelectric focusing，簡稱 IEF）是六十年代中期出現的新技術。近年來等電聚焦技術有了新的進展，已迅速發展成為一門成熟的近代生化實驗技術。目前等電聚焦技術已可以分辨等電點（pI）只差 0.001pH 單位的生物分子。由于其分辨力高，重復性好，樣品容量大，操作簡便迅速，在
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子，向電場的正極泳動，在小于其等電點的 pH 環境中解離成帶正由荷的陽離子，向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的 pH 環境中，即蛋白質所帶的凈電荷為零時才能停止。如果在一個
等電點聚焦分離蛋白質實驗
等電點聚焦 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 等電點聚集（IEF） 分離可以通過 CE 輕易地達到，這也是選擇隨后用于蛋白質分離的緩沖液系統的有效的第一步。蛋白質和多肽是兩性
關于蛋白質等電點的簡介
由于蛋白質表面離子化側鏈的存在，蛋白質帶凈電荷。由于這些側鏈都是可以滴定的（titratable），對于每個蛋白都存在一個pH使它的表面凈電荷為零即等電點。 英文縮寫：pI。 蛋白質在溶液中有兩性電離現象。假設某一溶液中含有一種蛋白質。當pI=pH時該蛋白質極性基團解離的正負離子數相等，凈電荷
等電點聚焦分離蛋白質實驗
蛋白質可以在包被或非包被的毛細管柱分離，分離方案的選擇取決于靶蛋白的特異屬性。最重要的屬性就是pl，這由一般的凝膠電泳或CE決定。等電點聚焦分離是CE分離的一種。實驗方法原理等電點聚集（IEF） 分離可以通過 CE 輕易地達到，這也是選擇隨后用于蛋白質分離的緩沖液系統的有效的第一步。蛋白質和多肽是兩
等電點聚焦分離蛋白質實驗
實驗方法原理 等電點聚集（IEF） 分離可以通過 CE 輕易地達到，這也是選擇隨后用于蛋白質分離的緩沖液系統的有效的第一步。蛋白質和多肽是兩性的，因此它們的電荷由周圍的載體緩沖液決定。當蛋白質或多肽處于電場中，它移動到一個區域，這里周圍的 pH 等于其等電點（pI）。在包被的毛細管柱內可
等電聚焦電泳（IEF）分離蛋白及測定蛋白質等電點
一、原理等電點聚焦（IEF）是在電場中分離蛋白質技術的一個重要發展，等電聚焦是在穩定的pH梯度中按等電點的不同分離兩性大分子的平衡電泳方法。在電場中充有兩性載體和抗對流介質，當加上電場后，由于兩性載體移動的結果，在兩極間逐步建立穩定的pH梯度，當蛋白質分子或其他兩性分子存在于這樣的pH梯度中時，這種
簡述蛋白質等電點的計算方法
蛋白質等電點，找出所有可解離基團，并注明它們各自的pKa→假定它們在極低的pH下都處于非解離狀態→逐步提高溶液的pH→可解離基團按照pKa從低到高的順序依次釋放出質子，即pKa越低的就越先釋放出質子→寫出所以可能的解離形式→找出凈電荷為0的形式→將凈電荷為0形式兩側的pKa相加除于2 。
關于蛋白質等電點的測定方法介紹
一、蛋白質等電點的測定方法方法：平板等電聚焦 二、蛋白質等電點的測定原理：蛋白質分子在含有載體兩性電介質形成的連續而穩定的線性pH梯度中進行電泳。按照等電點不同被分離，形成一個很窄的區帶 三、蛋白質等電點的測定儀器：Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell 四、蛋白質等
關于蛋白質等電點的主要應用介紹
在等電點時，蛋白質分子以兩性離子形式存在，其分子凈電荷為零(即正負電荷相等)，此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉淀，所以蛋白質在等電點時，其溶解度最小，最易形成沉淀物。等電點時的許多物理性質如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小，從
等電點聚焦電泳
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
等電點小知識
小知識：等電點等電點（pI,isoelectric point）等電點：兩性離子所帶電荷因溶液的pH值不同而改變，當兩性離子正負電荷數值相等時，溶液的pH值即其等電點。兩性與等電點氨基酸具有氨基和羧基的典型反應，例如氨基可以羥基化、酰基化，可與亞硝酸作用；羧基以成酯或酰氯或酰胺等。此外，由于分子中同
聚丙烯酰胺等電聚焦電泳測蛋白質的等電點2
四、固定、，染色和脫色將凝膠板放在培養皿中，加入固定液，浸泡數小時后，用脫色液清洗兩次，每次10min, 然后加入染色液，室溫下放置15－30min，再用脫色液洗脫數次，直至譜帶清晰，放入保存液中浸泡10min,可制干板。五、制作干膠板1. 取完全浸濕的平整玻璃紙一張，于玻璃板上鋪平，紙與板之間不可
聚丙烯酰胺等電聚焦電泳測蛋白質的等電點1
實驗原理所有的氨基酸均為兩性物質，即它們至少含有一個羧基（carboxyl）及一個氨基（α-amino）。這些可游離的基團隨著pH變化可以三種形式存在，即正電荷（cation）、兩性離子（zwitterion）及負電荷（anion）等三種，在酸性溶液中帶正電荷，在堿性溶液中帶負電荷。若氨基酸在某一p
蛋白質沉淀方法等電點沉淀法介紹
此法單獨應用較少，多與其它方法結合使用 兩性電解質分子上的凈電荷為零時溶解度最低，不同的兩性電解質具有不同的等電點，以此為基礎可進行分離。如工業上生產胰島素時，在粗提液中先調PH8.0去除堿性蛋白質，再調PH3.0去除酸性蛋白質。利用等電點除雜蛋白時必須了解制備物對酸堿的穩定性，不然盲目使用十
蛋白質等電點的測定和沉淀實驗結果
1，在等電點附近，蛋白質溶液開始變渾濁，離心可見沉淀2，遠離等電點，蛋白質溶液開始變澄清，離心未見沉淀
聚丙烯酰胺凝膠平板等電聚焦電泳測定蛋白質等電點
一、目的：學習聚丙烯酰胺凝膠平板等電聚焦電泳測定蛋白質等電點的原理及方法。二、原理：等電點聚焦（isoelectric focusing, IEF）或簡稱電聚焦（electrofocusing），也曾稱等電點分離聚焦電泳等。它是60年代中期出現的技術，克服了一般電泳易擴散的缺點。近年來，等電點聚
蛋白質的分離實驗——IEF（等電點聚焦電泳）法
實驗方法原理凡鹽析所獲得的粗制蛋白質（鹽析得到的IgG）中均含有硫酸銨等鹽類，這類將影響以后的純化，所以純化前均應除去，此過程稱為“脫鹽”（desalthing）。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法，這兩種方法各有利弊。前者的優點是透析后析品終體積較小，但所需時間較長，且鹽不易除盡；凝膠過濾法則能將鹽除盡，
蛋白質兩性性質及等電點的測定
實驗原理蛋白質是兩性電解質。蛋白質分子中可以解離的基團除N端α―氨基與C端α―羧基外，還有肽鏈上某些氨基酸殘基的側鏈基團，如酚基、巰基、胍基、咪唑基等基團，它們都能解離為帶電基團。因此，在蛋白質溶液中存在著下列平衡： 陽離子兩性離子陰離子 pH < pIpH = pIpH > p
等電點聚焦電泳的定義
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
關于等電點的應用介紹
1、蛋白質的沉淀 同種蛋白質在水溶液中帶有同種電荷，互相排斥，且蛋白質表面能形成水化膜，這就使得蛋白質溶液（實際上是膠體）十分穩定。要想破壞其穩定性讓其沉淀則需要從這兩方面入手，也就是除去水化膜和表面電荷。 比如，可以先將蛋白質的pH調整至等電點，這時的蛋白質分子呈等電狀態，雖不很穩定，但還
蛋白質的兩性解離和等電點測定實驗結果
在等電點附近，蛋白質溶液開始變渾濁，離心可見沉淀。遠離等電點，蛋白質溶液開始變澄清，離心未見沉淀。當蛋白質溶液處于某一pH時，蛋白質解離成正、負離子的趨勢相等，即成為兼性離子，凈電荷為零，此時溶液的pH稱為蛋白質的等電點。在等電點時蛋白質的溶解度最小，在電場中不移動。在pI時，蛋白質失去了膠體的穩定
原生質等電點測定實驗
實驗方法原理原生質的主要組成物質──蛋白質為兩性化合物，它在不同pH的介質中，其解離情況不同：（1）在酸性介質中：（2）在堿性介質中：當介質的pH值愈小時，此物質的解離就趨向于（1）式，反之則趨向于（2）式，若在某一pH值下，此物質的解離程度達到平衡，這些外界介質的pH即為此物的等電點。不同的植物組
等電點聚焦電泳的技術介紹
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
等電點聚焦電泳的技術介紹
聚丙烯酰胺凝膠電泳（ polyacrylamide gel electrophoresis，簡稱PAGE），是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術，用于分離蛋白質和寡核苷酸。
等電點聚焦的定義和特點
等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質，當通以直流電時，兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度，當蛋白質放進此體系時，不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上。
等電點聚焦的定義和特點
等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質，當通以直流電時，兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度，當蛋白質放進此體系時，不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上。
原生質等電點測定實驗
實驗方法原理：原生質的主要組成物質──蛋白質為兩性化合物，它在不同pH的介質中，其解離情況不同：（1）在酸性介質中：（2）在堿性介質中：當介質的pH值愈小時，此物質的解離就趨向于（1）式，反之則趨向于（2）式，若在某一pH值下，此物質的解離程度達到平衡，這些外界介質的pH即為此物的等電點。不同的植物