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所需設備 原位PCR反應是在載玻片的平面上進行，保持水平可以使反應各組分均勻地分布在組織切片上，所以須在原位PCR儀上進行，該儀器不但可以使載玻片保持水平，而且還可以給載玻片進行均勻地加熱，保證擴增反應的順利進行。 探針種類 與原位雜交一樣，檢測原位PCR結果的探針可以是DNA探針，也可以是寡核苷酸探針，DNA探針的長度在100－200bp為宜，寡核苷酸探針為多個，在20－40bp為宜。 探針標記物種類 常用標記物有地高辛半抗原（digaoxigenin），生物素（biotin），過氧化物酶（HRP），還可以標記一些熒光物質如異硫氰酸熒光素（FITC），花青（cyanine，Cy2，Cy3，Cy5）等。......閱讀全文
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性（RFLP）、轉基因技術及基因芯片（DNA-chip）技術等分子生物學技術。目前，這些技術在血液學檢驗領域已得到廣泛應用，如應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。隨著分子生物
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
IS PCR的技術特點 （1）既具有PCR的特異性與高靈敏性，又具有原位雜交的定位準確性；（2）測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列，甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA；（3）有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析；（4）可用于正常或惡性細胞，感染或非感染細胞的鑒定
表觀遺傳修飾如m6A甲基化在腫 瘤的發生和發展中起到重要作用。而甲基化酶對ai癥的影響也受到廣 泛關注。其中去甲基化酶ALKBH5已被報道過能通過維持乳腺ai細胞的干細胞性而促進腫 瘤的形成，還有文章探究過其在急性白血病中的作用，但其對胰腺ai的影響還缺乏研究。今年5月份發表在Molecular
初步應用有關原位PCR技術應用成功的第一篇報道是對感染綿羊中樞神經系統visna病毒在綿羊脈絡從一細胞中檢查，通過PCR擴增，僅用150堿基對的短探針就可通過ISH檢查到了細胞內的visna病毒。從開始在試管內細胞行PCR擴增后再涂片做ISH(原位雜交)檢查，已發展到用福爾馬林固定、石蠟切片的常規病
PCR常見問題 一.沒有擴增產物 1.循環溫度：變性溫度、退火溫度 2.引物設計 3.DNA聚合酶活性 4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份) 5、DNA樣品 二.非特異產物及電泳呈涂布狀 1.Mg
八十年代以來由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起的艾滋病(AIDS)因其嚴重的危害性而受到人們高度重視，力爭早期診斷和尋求有效治療是防止其廣泛傳播的關鍵所在.聚合酶鏈反應(PCR)具有敏感、特異和快速的特點，是檢測病毒、評價病情進展和探討發病機理的有效工具.一、HIV的基因結構 HIV的基因
文章導讀 表觀遺傳修飾如m6A甲基化在腫 瘤的發生和發展中起到重要作用。而甲基化酶對ai癥的影響也受到廣 泛關注。其中去甲基化酶ALKBH5已被報道過能通過維持乳腺ai細胞的干細胞性而促進腫 瘤的形成，還有文章探究過其在急性白血病中的作用，但其對胰腺ai的影響還缺乏研究。今年5月份發表在M
簡單的說，PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前，常用的技術，可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準，可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR儀，實時熒光
舉乙肝的例子來說：通過酶免的方法查乙肝兩對半和通過熒光定量PCR的方法學查乙肝DNA小明得了肝炎，但他不知道自己得了肝炎，有一天身體不舒服或者正常體檢（比如入職體檢），他去看醫生，臨床醫生懷疑他得了肝炎（肝炎有很多種比如病毒性肝炎，也就是病毒傾入他體內后由于人體的三道防線沒能把病毒消滅掉，導致病毒在
基因表達的檢測有幾種方法。經典的方法（仍然重要）是根據在細胞或生物體中 所觀察到的生物化學或表型的變化來決定某一特定基因是否表達。隨著大分子分離技 術的進步使得特異的基因產物或蛋白分子的識別和分離成為可能。隨著重組DNA技術 的運用，現在有可能檢測．分析任何基因的轉錄產物。目前有好幾種方
今天黨的十九大召開，習近平大大指出：中國特色社會主義進入新時代，我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了，而考研又多了一道大題。然而這些年，醫療領域進展可不止一點！就讓我們一起看看這些年，分子病理領域的發展！ 其實相對于其
本文討論的范圍包括RNA酶保護分析，northernblot，原位雜交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不談具體protocol，是因為各種書籍和kit說明書上都有，主要說一些原則，而且大部分是失敗和成功的經驗，還有小組討論結果以及各種書里七零八落看的內容，希望對大家有用。 基因
前列腺癌（Prostate cancer，PCa）作為男性發病率第二的癌癥，嚴重影響了患者生殖健康和生活質量。由于前列腺癌受多種基因調控，且目前缺乏相關機制方面的深入研究，治療效果往往不甚理想。隨著高通量技術的發展，使研究PCa相關分子標志物基因和作用機制成為可能。目前，已有報道指出許多明星Ln
相關專題制備RNA探針在RNA的雜交檢測實驗中，應用標記的RNA 探針將獲得高靈敏度的雜交檢測結果，與DNA 探針相比，檢測靈敏度提高10-100倍。因為對于不同的雜交體類型來說，RNA-RNA雜交體的結合強度高于RNA-DNA和DNA-DNA雜交體。對于通過Northern blots檢
一、顯微切割技術出現的背景 在分子病理學研究中，常常遇到兩個比較棘手的問題： 一是選取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征，即具有一定程度的同質性。我們人體的各種組織絕大多數是由多種不同細胞組成的異質性的細胞群，這種選取同質性的研究材料問題在對人體組織的深入研究中常常遇到卻又不易解
一、顯微切割技術出現的背景 在分子病理學研究中，常常遇到兩個比較棘手的問題： 一是選取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征，即具有一定程度的同質性。我們人體的各種組織絕大多數是由多種不同細胞組成的異質性的細胞群，這種選取同質性的研究材料問題在對人體組織的深入研究中常常遇到卻又不易解
一、顯微切割技術出現的背景 在分子病理學研究中，常常遇到兩個比較棘手的問題： 一是選取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征，即具有一定程度的同質性。我們人體的各種組織絕大多數是由多種不同細胞組成的異質性的細胞群，這種選取同質性的研究材料問題在對人體組織的深入研究中常常遇到卻又不易解
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑 （江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所， 江西 南昌 330029） [摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點，目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用，但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量P
定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied biosystems公司推出，它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團，利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該
2.2.3 放射免疫沉淀試驗(RIPA) 本法是將病毒的蛋白與待測血清混合,如有HIV抗體，則同位素標記的HIV蛋白與之結合產生沉淀，沉淀物用配套的緩沖液和十二烷基硫酸(SDS)洗脫,即可將病毒抗原分離，最后病毒蛋白用放射自顯影鑒定,同時用已知的分子標記物比較。此方法敏感性和
腫瘤的個體化治療基因檢測已在臨床廣泛應用，實現腫瘤個體化用藥基因檢測標準化和規范化，是一項意義重大的緊迫任務。 為進一步提高腫瘤個體化用藥基因檢測技術的規范化水平，7月31日，國家衛生計生委個體化醫學檢測技術專家委員會，在廣泛征求意見的基礎上，制訂了《腫瘤個體化治療檢測技術指南（試行）》。
二十一世紀的今天，惡性腫瘤仍然是嚴重危害人類生命健康的重大疾病。從世界范圍內看，腫瘤的發生、發展不容樂觀。隨著人口逐漸老齡化、吸煙、感染、環境污染、膳食結構等問題的存在，腫瘤診斷所面臨的形勢極為嚴峻。 隨著分子生物學的發展，特別是人類基因組計劃的順利實施、人類基因組序列的剖析以及相關基因功能的
長期以來，人們一直認為病毒顆粒中只含有一種作為遺傳物質的核酸。然而，最近十年左右的研究表明，許多DNA病毒顆粒中除含有作為遺傳物質的DNA之外，還存在著許多mRNA分子。但是DNA病毒顆粒中具體RNA分子的構成仍然很不清楚。 中科院上海巴斯德研究所藍柯研究組
1983年春，Mullis發展出PCR的概念；1983年9月，Mullis用大腸桿菌DNA聚合酶做了第一個PCR實驗，只用一個循環；1986年6月，Cetus公司純化了第一種高溫菌DNA聚合酶。1988年，美國Cetus公司推出了第一臺PCR自動化熱循環儀；1990年，Haase首創原位PCR反應；
分析測試百科網訊 近日，中國機械進出口(集團)有限公司受中日友好醫院委托，對中日友好醫院臨床藥學服務及個體化治療體系建設項目及臨床醫學研究平臺建設項目第二批、呼吸二部醫療設備、檢驗科醫療設備第二批和口腔科醫療設備進行公開招標，招標編號分別為：B0708-CMC16N7790，
近10年來，現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域，為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為，人類基因組并非人們想像的那樣穩定，諸如基因重排、擴增、缺失，突變和DNA甲基化類型改變等時有發生，這些改變對于基因表達和調控，以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意
近10年來，現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域，為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為，人類基因組并非人們想像的那樣穩定，諸如基因重排、擴增、缺失，突變和DNA甲基化類型改變等時有發生，這些改變對于基因表達和調控，以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
二、沉淀反應可溶性抗原(如細菌的培養濾液、含細菌的患者血清、腦脊液及組織浸出液等)與相應抗體相混合，在比例適合和適量電解質的存在等條件下，形成肉眼可見的沉淀物，稱沉淀反應。利用沉淀反應進行血清學試驗的方法稱為沉淀試驗。沉淀反應有環狀、絮狀和瓊脂擴散法3種基本類型。1．環狀沉淀試驗將已知的抗血清加于內
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體，采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板，可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已