樣品到達域值水平所經歷的循環數稱為Ct值(限制點的循環數)。域值應設定在使指數期的擴增效率為最大,這樣可以獲得最準確,可重復性的數據。如果同時擴增的還有標有相應濃度的標準品,線性回歸分析將產生一條標準曲線,可以用來計算未知樣品的濃度。......閱讀全文
眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能直接揭示病原體的存在,
摘要:熒光定量PCR是一種新的核酸定量技術,該技術在PCR儀反應系統中引入了熒光標記探針,通過熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使PCR擴增和終產物檢測全處在封閉的條件下進行,從而具有實時監測、無污染、快速、靈敏、精確、特異等特點,極大的克服了原有PCR儀技術的不足,其最主要的優勢是能對待測樣本起
實時熒光PCR檢測技術眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能
一、PCR的基本原理 聚合酶鏈反應(polymerasechain reaction,PCR)PCR反應過程與細胞內的DNA復制相似,但PCR的反應體系要簡單的多,主要包括DNA靶序列、引物、4種單核苷酸dNTP、耐熱DNA聚合酶以及合適的緩沖液體系。 PCR反應過程有以下3個步驟:1、變性
淺析乳制品中高危害食源性致病菌--阪崎腸桿菌的快速檢測摘 要:2006年國家出臺的《嬰幼兒配方乳粉生產許可證審查細則》中明確要求采用國際通行的“熒光PCR儀”作為出廠檢驗必備設備,此要求已成為乳品企業生產許可證核發的必要條件。本文簡單綜述了國際通行的保證食品安全的食
分子病理診斷,是指應用分子生物學技術,從基因水平上檢測細胞和組織的分子遺傳學變化,以協助病理診斷和分型、指導靶向治療、預測治療反應及判斷預后的一種病理診斷技術,是分子生物學、分子遺傳學和表觀遺傳學的理論在臨床病理中的應用,屬轉化醫學的范疇。分子病理診斷又稱分子病理檢查、分子病理檢測、分子病理技術,稱
一、阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種:1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血癥,死亡率高達50% 以上。目前,微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。阪崎腸桿茵的生物學性狀及其對人群的健康危
一、阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種:1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血癥,死亡率高達50% 以上。目前,微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。阪崎腸桿茵的生物學性狀及其對人群的健
文章要點:上海樂楓市場部對目前疫情防控工作中的熒光定量PCR的核酸檢測技術做了深入淺出地闡述,并為該實驗中使用的純水設備做了解析和介紹。轉載請注明原文出處 目前疫情的防控工作取得了階段性的成效,基于實時熒光定量PCR的核酸檢測技術在新冠病毒快速鑒定及確診中發揮了重要作用。 什么是
Kenneth J. Livak and Thomas D. SchmittgenDepartment of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy.Washington State University, Washington 99164-6534
5.PCR預實驗,主要檢測引物的特異性和擴增效率;6.正式定量實驗:對所有樣品上機檢測;7.實驗結果和數據分析,形成報告。收費標準優惠包干價:120元/樣/基因(SYBRgreenI法,相對定量)(含RNA提取,反轉錄,引物合成費用,上機測試費用(3個重復);一個內參免費(內參3個重復) Ct值(C
美吉生物配備的ABI7500型熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500結合了PCR熱循環、熒光檢測和各種應用分析軟件,可實時定量觀察各反應管中PCR每一循環的擴增產物情況。PCR反應結束后,即可得到定量結果,無需進行凝膠電泳分析,PCR產物純化或其他任何實驗操作。7500
美吉生物配備的ABI7500型熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500結合了PCR熱循環、熒光檢測和各種應用分析軟件,可實時定量觀察各反應管中PCR每一循環的擴增產物情況。PCR反應結束后,即可得到定量結果,無需進行凝膠電泳分析,PCR產物純化或其他任何實驗操作。7500
實時熒光定量PCR技術的應用定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Appliedbiosystems公司推出,它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的
QPCR 問:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。問:QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系?答:聚合酶鏈式反應(Polymer
利用實時定量PCR和2-△△CT法分析基因相對表達量 METHODS 25, 402–408 (2001)Analysis of Relative Gene Expression Data Using Real-Time Quantitative PCR and the 2-△△CT M
實時熒光定量PCR儀的優點實時熒光定量PCR儀又稱為qPCR儀,一步即可完成PCR擴增和檢則,因此無需使用凝膠電泳檢測產品,同時真正實現了定量PCR。實時熒光定量PCR系統采用熒光染料檢測反應指數期PCR產物的積聚,以實現快速和精確的產品定量和目標數據分析。相反,終點PCR需要通過凝膠電泳、RNA印
感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查,體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體,抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況,或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應( PCR )
聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法,而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展,定量PCR技術取得了突飛猛進的發展,不僅建立了一系
1961年國際酶學會(IEC)根據酶催化反應的類型將酶分為六大類,制定了系統命名法,規定每一種酶只有一個系統名稱和系統標號,系統標號由四個數字組成,如脂肪酶的系統標號為 EC 3.1.1.3。六大類酶主要是催化反應性質不同,催化氧化還原反應的酶稱為氧化還原酶類,包括氧化酶和還原酶;催化底物之
QPCR 問:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。問:QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系?答:聚合酶鏈式反應(Polymer
PCR實驗包括三大主要的熱循環步驟 ,在這個過程中需要多種必要的反應成分 ,通過對PCR的設置做相應的調整,便可以獲得一些特殊的實驗結果,如產率提高,特異性增強或反應時間縮短等。 表 1.常用PCR方法及其核心優勢熱啟動PCR常用于增強PCR擴增的特異性。該方法主要利用抗體、親合配體、適體
定量PCR儀主要由兩部分組成,一個是PCR系統,一個是熒光檢測系統。選擇定量PCR儀的關鍵——由于定量PCR必需借助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對于定量PCR系統來說,重要的參數除了傳統PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指
IVD增速最快的細分行業當屬分子診斷,而分子診斷主要包括核酸診斷和生物芯片技術。核酸診斷主要分為聚合酶鏈式反應(PCR)和熒光原位夾雜(FISH)。PCR目前在分子診斷細分技術中最為成熟且應用最廣。在這一技術紅海的最遠處,數字化PCR技術因為其先進性尚處于藍海競爭市場,國內外企業積極參戰,讓這一領域
定量PCR儀主要由兩部分組成,一個是PCR系統,一個是熒光檢測系統。選擇定量PCR儀的關鍵——由于定量PCR必需借助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對于定量PCR系統來說,重要的參數除了傳統PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指數級放大。至于熒
寵物已成為現代人的重要家庭成員,圍繞其吃穿用度、生老病死,形成了一條千億級的“經濟”產業鏈。其中,需求剛性大、消費支出高的寵物醫療更占據了產業鏈中的核心地位,成了寵物消費中的“大頭”。寵物醫療服務包括為寵物提供疾病診療和日常保健服務,是寵物行業中僅次于寵物食品的第二大細分行業。按疾病種類劃分,寵物醫
定量PCR儀主要由兩部分組成,一個是PCR系統,一個是熒光檢測系統。從前面的原理介紹不難看出選擇定量PCR儀的關鍵——由于定量PCR必需借助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對于定量PCR系統來說,重要的參數除了傳統PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性
定量PCR儀主要由兩部分組成,一個是PCR系統,一個是熒光檢測系統。選擇定量PCR儀的關鍵——由于定量PCR必需借助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對于定量PCR系統來說,重要的參數除了傳統PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指
我國是禽畜產品生產和消費大國。食品及飼料中動物源性成分的檢測關系食品安全和畜牧業安全。近年來,市場上屢次出現不法分子在肉制品中摻雜摻假現象,食品安全問題層出不窮,尤其是牛羊肉中,經常被曝光其中摻雜了一些豬肉、鴨肉甚至狐貍肉、老鼠肉等,涉嫌虛假宣傳欺詐消費者和侵犯消費者的合法權益,降低食品安全的公眾信
(張蓓,沈立松 上海第二醫科大學附屬新華醫院上海兒童醫學中心實驗診斷中心)摘要:多聚酶鏈反應飛速的發展使其成為了分子生物學實驗室重要的工具,實時熒光定量PCR(real-timequantitative PCR)技術以其敏感性高、重復性好、速度快和污染少使PCR技術又